欢迎来到期刊吧-专注期刊发表！
关于我们联系我们发表流程付款方式医学sci转让留言板
您的位置： 首页 > 专业指导 > 医学论文写作指导

男性不育症患者AZF基因与临床相关性研究

　　世界卫生组织(WHO)1997年统计大约有15％ 的夫妇患有不孕／育症，男性不育占一半左右，其中30％以上的患者是由于遗传学异常引起的。Y染色体微缺失是导致男性不育的主要遗传学因素。早期的细胞遗传学揭示Y染色体与生精功能相关。Y染色体微缺失主要集中于Y染色体长臂远端第5、6区(interval 5、6)，该区段是涉及生精的关键区域被称为无精因子基因家族(Azoospermia factor，AZF)，主要由AZFa、AZFb、AZFc三个区域组成。发生在AZF区域的Y染色体微缺失不仅引起无精症，而且与唯支持细胞综合征(SCO综合征)、生精功能减退等睾丸组织学变化相关。据推测AZF基因可能编码RNA结合蛋白，主要调控基因的表达? 。对于AZF微缺失类型与男性不育患者的临床关系仍不甚清晰。本研究对418例男性不育症患者进行Y染色体微缺失检测，并对结果分类研究，探讨Y染色体微缺失与男性不育症之间的关系，为男性不育症患者的I临床诊断和治疗提供实验依据。

　　1 资料与方法

　　1．1 一般资料2006年6月至2009年l2月在广西妇幼保健院就诊的不育男性症患者418例。按WHO实验室标准将患者分为4类：无精症患者(无精子射出)11l例，严重少精症患者(精子数<5×10。／m1)152例，弱精症患者(活动精子数<50％)98例，畸形精子数>40％者57例。健康体检人员105例作为对照。所有研究对象都征求其知情同意。

　　1．2 方法抽取2～3 ml外周血采用天根公司全血细胞DNA抽提试剂盒提取DNA。多重聚合酶链式反应(PCR)扩增：采用Y染色体微缺失检测试剂盒(深圳亚能生物有限公司)分别对AZFa(SY82、SY84、SY86)、AZFb(SY124、SY127、SY128、SY133、SY134 SY143、)、AZFc(SY239、SY242、SY254、SY255)、AZFd(SY145、SY152)覆盖4个区15个序列标签位点(sequence taggedsite，STS)进行多重PCR扩增，同时选择正常男性DNA样品为阳性对照，正常女性DNA样品为阴性对照，灭菌蒸馏水为空白对照进行扩增。取10~IPCR产物加6倍上样缓冲液经2．0％的琼脂糖凝胶电泳，凝胶成像系统拍照分析。

　　1．3 统计学处理采用SPSS 11．0软件进行统计，计数资料用是百分率(％)表示。

　　2 结果在418例不育患者中检出Y染色体微缺失43例，缺失率10．3％。对照组例未发现Y染色体微缺失。

　　AZFd区SY152和AZFc区4个STS全部缺失的患者人数最多到达23例，占缺失总数的53．5％，且患者的病情较重均为无精症或严重少精症患者；AZFd区SY152、AZFb区6个STS和AZFc区4个STS全部缺失的患者有2例(4．7％)临床表现为无精症；AZFc区4个STS全部缺失有2例(4．7％)临床表现为严重少精症；AZFa区域SY84、SY84缺失有6例均为严重少精症患者，占缺失总数的14％ ；单独AZFd区域SY152缺失有10例(23．3％)组成类型复杂包括了严重少精症、畸形精子症、弱精症类患者(图1)。Y染色体缺失区域例数与临床表征关系见表1。3 讨论AZFa缺失在男性不育症中较少见，但其临床结果比AZFc缺失严重，AZFa区域完全缺失与单纯塞尔托利细胞综合征(Sertoli cell—only syndrome)相关。睾丸组织活检显示曲细精管内没有或存在少量精子，由于精母细胞分化障碍，导致精子数量缺如或不足。本研究有6例Y染色体微缺失发生在AZFa区域，其中5例确诊为单纯塞尔托利细胞综合征，临床症状严重，均表现为无精症。AZFa区覆盖三个候选基因DBY、UTY、USP9Y。

　　Foresta等报道精子的发生与USP9Y和DBY相关，DBY缺失发生频率高，缺失后引起精子显着减少或缺如，由此推论DBY可能是AZFa区主要的候选基因 。USP9Y(ubiquitin—specific protease 9，Y chromosome)在配子发育过程起关键作用，其编码特异蛋白酶具有泛素c端的水解酶结构。Sun等 证实该基因的的点突变引起无精症，确认精子的形成与泛素相关。

　　在我们研究中单个区域缺失以AZFd区域发生频率最高共计10例(23．2％)。严重少精症6例、弱精症和畸形精子症个2例。AZFd缺失引起的临床症状较轻。患者可以表现为轻度的少精症或精子数正常仅有形态畸形。在本研究中具有较轻临床症状的弱精症组和畸形精子症组也只检出AZFd缺失。该区至今没有鉴定出候选基因，但在不育症患者中AZFd区DYS237位点缺失频率较高，Mtislumanoglu等 指出该位点可能与精子的形成相关 。

　　本研究中涉及AZFc区域的缺失频率最高达62．7％。在精子生成障碍的男性患者中，通常会出现AZFc区域缺失。AZFc缺失主要由跨越3．5 Mb的8个基因家族和b2、b4重复片段发生同源重组产生。DAZ是AZFc的主要候选基因，Poongathai等 发现13％的不育男性存在DAZ突变，而10％ ～15％ 的无精症男性DAZ基因完全缺失。虽然AZFc区域缺失大体相同，然而这些微缺失患者在临床症状呈现很大的变异性。临床表型不一可能是生殖上皮进行性退化的结果。而更多的推论趋向于个体的遗传背景和环境不同引起表型不一。

　　本研究没有发现单独AZFb区域缺失病例，有2例AZFb区域合并AZFc、AZFd区域缺失。具有严重的表型均为无精症患者。由于AZFc、AZFd区域缺失表型较轻，AZFb在男性不育症患者中发挥重要作用。AZFb区的正常表达精母细胞发育期相关，AZFb缺失精母细胞发育受阻于有丝分裂期。AZFb的候选基因是RBM基因家族主要包括RBM1和RBM2，该基因家族编码睾丸特异的RNA结合蛋白。RBM2基因功能尚不清楚。在AZFb缺失的不育症患者中通常出现RBM1基因的完全缺失。RBM1主要在初级精母细胞内转录，由此可认为是AZFb表达的候选基因。

　　总之，Y染色体微缺失是男性不育症的重要原因之一。其中AZFa缺失和AZFb缺失具有相对严重的临床表型。AZFc缺失临床表型多变，AZF的缺失临床症状轻微。Y染色体微缺失与临床的关系对于阐明男性不育症的病因，对疾病作出诊断和治疗具有显着作用。

　　本文由学术期刊吧整理发布，转载请注明出处！

我要分享到：