免疫荧光法和电化学发光法快速测定脑钠肽含量的评价

　　B型尿钠肽又称脑钠肽(BNP)，1988年由日本学者从猪脑中发现和分离，随后研究发现它是心脏的产物，并在心力衰竭中起重要作用j。B型尿钠肽是一种心脏神经激素，只有在血容量增加和压力超负荷的情况下才反应性地从心室分泌。近年来的研究表明，BNP具有病理生理学意义，呵作为心力衰竭的血浆标志物，用于心力衰竭的诊断、治疗、预后评估和治疗。因此即时准确地测定BNP在心力衰竭的诊断治疗中尤其重要．材料和方法1标本来源本院急诊患者51例，住院患者55例，共106例，男58例，女48例，平均年龄46．8±5．1岁。本院健康体检者197名，男105名，女92名，平均年龄45．2±4．6岁。

　　2仪器与试剂免疫荧光法采用PATHFAST分析仪及其配套试剂(三菱公司)，试剂批号：061207265，标准品批号：0126。电化学发光法采用ELECSYS2010电化学发光仪及其配套试剂(Et立公司)，试剂批号：16201904，标准品1批号：16604901；标准品2批号：16604902；质控品1批号：40251；质控品2批号：40252；质控品3批号：40253。

　　3方法

　　3．1批内精密度按美国临床实验室标准化委员会(NationalCommitteeforClinicalLaboratoryStandards，NCCLS)EP5一A2文件精密度评价的要求，在PATHFAST分析仪上测定正常值及高值质控血浆BNP含量。各连续测定20次，计算批内变异系数(CV％)。

　　3．2批间精密度按上述方法，测定正常值及高值质控血浆BNP含量，每天测定1次，连续测定20天，计算批问变异系数(CV％)。

　　3．3比对实验根据CLSIEP9一A2文件对能力比对的相关要求，选取随机的住院患者新鲜全血标本162份，采用上述两种方法平行检测BNP含量，连续检测5天。最后对检测结果进行相关性分析。

　　3．4两种方法测定的均值根据临床使用要求，采用低、中、高质控血浆BNP含量连续测定20次，计算两种方法测定的均值，观察实验方法的系统误差(sE)及临床可接受性。Es参照下列公式计算：SE(绝对值)=1YC—XCl，sE(％)=(SE／XC)×100％，(YC，为免疫荧光法测定值，XC，为电化学发光法测定值)临床可接受性依照sE(％)小于1／2CLLA’88室间质评充许误差(10％)时为可以接受。

　　4统计学分析采用MicrosoflExcel2003，结果以x-4-s表示，两样本均数比较用t检验；相关性用线性相关分析。

　　结果

　　1精密度试验批内精密度和批间精密度试验结果，见表1。从表1可见，质控血浆BNP正常值和高值批内CV分别为3．1％，4．5％；质控血浆BNP正常值和高值批间CV分别为3．3％，4．8％。

　　2对比试验按照NCCLSEP9一A2文件要求随机抽取162份高低不同浓度的标本，比较两法所测结果，将检测数据分3组进行统计分析：第一组的BNP含量检测值小于100pg／mL，见表2；第二组的BNP含量检测值在100～1000pmL，见表3；第三组的BNP含量检测值大于1000pmL。根据NCCLS文件要求相关系数r>0．975表示两种测定方法相关良好，否则相关不良。从表2和表3中可见两种方法在检测BNP含量小于100pg／mL和BNP含量在100—1000pmL时，相关系数分别为：r=0．991和r=0．986，表明两方法的相关性良好。从表4可见在检测BNP含量大于1000pg／mL时，r3=0．962，可见两种方法在高浓度时相关性不理想。

　　3实验方法的系统误差及临床可接受性能评价实验方法的系统误差(SE)及临床可接受性能评价，Y为免疫荧光法测定BNP含量，x电化学发光法测定BNP含量，BNP医学决定水平(10％)，见表5。讨论B型脑钠肽是心室分泌的、反映心脏负荷过重的应激性肽类激素，具有抑制肾素一血管紧张素-醛固酮系统(HAAS)及交感神经系统的作用。血浆BNP／NT和proBNP水平检测不仅可用于诊断心力衰竭及评估预后，还可作为心力衰竭疗效评价的一项可靠指标。目前用于测定脑钠肽的仪器和试剂有多种，方法学的差异，致使同一标本在不同仪器检测的D．二聚体结果相差较大。本文意在探讨同一实验室不同仪器间的可比性和临床可接收性。

　　本科急诊化验室于2011年引进世纪PATHFAST分析仪，能在24h内不间断测定BNP，测定快速，17min出结果，弥补了夜间急诊病人急诊抢救的需要。为了保证了同一实验室检测结果的准确可靠，本文对PATHFAST分析仪测定BNP，参照NCCLS有关文件进行了一系列实验，结果表明该仪器精密度高，BNP批内批间CV均小于5％；从对比试验中提示PATHFAST分析仪与ELECSYS2010电化学发光仪具有一定的相关性，当测定BNP含量小于lOOp~mL时，相关系数r=0．986，当测定BNP含量在100—1000pg／mL，相关系数r=0．979；测定BNP含量小于lO00pg／mL时，配对t检验结果t=0．918，P：0．225也表明检测结果无差异；当测定BNP含量大于1000pg／mL时，相关系数r=0．962，提示相关不良。

　　PATHFAST分析仪与ELECSYS2010电化学发光仪Es分析显示，从表5结果可见，BNP医学决定水平1362pg／mL的sE临床不可接受。这可能与PATHFAST分析仪的检测线性范围较小有关，因此有必要对该系统进行调整。

　　总之，本文依照NCCLS文件要求进行实验，结果表明PATHFAST分析仪测定BNP含量准确可靠，适合急诊使用，但高浓度标本有一定偏差需适当调整，以满足急诊患者的需要。

　　本文由学术期刊吧整理发布，转载请注明出处！

我要分享到：

职称论文发表交流平台！

免疫荧光法和电化学发光法快速测定脑钠肽含量的评价

最新文章NEWS

推荐期刊Tui Jian

热点文章HOT