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医学论文论改良嗜酸性粒细胞计数稀释液及应用

  嗜酸性粒细胞计数临床常见的是直接计数、涂片白细胞分类计数和血球计数仪分类计数3种方法。但是临床上为了解疾病进展过程,需要动态观察嗜酸性粒细胞的变化,往往采用嗜酸性粒细胞直接计数。文献报道”。嗜酸性粒细胞直接计数的稀释液较多,用等渗的生理盐水配制嗜酸性粒细胞计数稀释液,与《全国临床检验操作规程》推荐的稀释液相比,各有优缺点。
 
  我院探讨使用血小板计数稀释液来配制嗜酸性粒细胞计数稀释液,在临床实践了3年,计数结果准确可靠,报告如下。
 
  1 材料与方法
 
  1.1 试剂《全国临床检验操作规程》推荐的稀释液配制详见《全国临床检验操作规程》。嗜酸性粒细胞计数稀释液。称取草酸铵1.Og,EDTA.2Na 0.012g,伊红0.2g,溶于50mL蒸馏水中,再加人0.6mL TritonX一100,加蒸馏水至lOOmL。
 
  1.2 方法于试管中加入稀释液0.38mL,取患者末梢血(或EDTA.2K抗凝全血)0.02 mL,混匀,5min后冲入计数板的两计数池内,静置3~5min。用低倍镜计数,镜下嗜酸性粒细胞被染成桔红色,其它未被破坏的细胞几乎不着色。计数两个计数室10个大方格(中央和四角大方格)内嗜酸性粒细胞数。计算嗜酸性粒细胞/L=10个大方格内嗜酸性粒细胞数X20×10 /L。
 
  2 结果
 
  2.1 对比试验取住院121例患者的EDTA.2K抗凝全血,分别用《全国临床检验操作规程》推荐的稀释液(Y)与本法稀释液(X)进行嗜酸性粒细胞计数,结果本法稀释液(163.4±34.7)×106/L,推荐稀释液(165.0±35.1)×10/L,2种稀释液计数结果差异无显著性(P>0.05),其相关系数r=0.991,相关方程Y=1.0216X +3.1247。
 
  2.2 着色时问比较 将稀释液与抗凝全血混合后,分别在120、180、240、270、300s进行直接计数,《全国临床检验操作规程》推荐的稀释液在300s后嗜酸性粒细胞被染成红色,本法稀释液在180s后嗜酸性粒细胞被染成红色。
 
  2.3 重复性试验用本法稀释液进行嗜酸性粒细胞计数25次重复试验,x±S=(226.1±6.9)X 10 /L,CV=3.1%。
 
  3 讨论文献报道,嗜酸性粒细胞计数稀释液有很多种,主要是围绕破坏红细胞和部分白细胞,嗜酸性粒细胞不被破坏且着色进行改进的。根据草酸铵有破坏红细胞的作用,巧妙地运用血小板计数稀释液来配制嗜酸性粒细胞计数稀释液。我们在配制血小板计数稀释液的同时,在每100 mL血小板计数稀释液中加入伊红0.2g、0.6mL TritonX一100即可成为嗜酸性粒细胞计数稀释液,这样就可以简化嗜酸性粒细胞计数稀释液配制过程。ED—TA.2Na有抗凝和防止草酸钙沉淀作用。表面活性剂TritonX一100能加速染料溶解,增强染料对细胞的渗透作用,从而使嗜酸性粒细胞着色加快。TritonX一100的浓度为0.6%时,只破坏除嗜酸性粒细胞以外的细胞,嗜酸性粒细胞几乎不受影响。本稀释液没使用挥发性试剂,这样稀释液保质期就相对较长,使用一年之久,仍效果很好。本法具有试剂配制简单,着色时间短,试剂保质期长,一种试剂2种用途等优点。
 
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