玉郎伞总黄酮提取工艺研究_护理论文如何发表

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【摘要】目的对玉郎伞总黄酮的几种提取工艺进行比较研究。方法以总黄酮得率为主要指标，辅以提取时间、提取次数、试剂用量、提取成本、人员及环境保护等因素，对传统热回流提取、微波提取、冷浸提取等3种提取工艺进行比较。结果微波提取玉郎伞总黄酮的提取率较传统热回流提取和冷浸提取高，且提取时间短、试剂用量少、成本较低。结论提取玉郎伞总黄酮以微波提取法为佳。

玉郎伞(Yulangsan,YLS)为蝶形花科植物疏叶崖豆Millettia pulcha Kurz vur. Laxior (Dunn) Z. Wei的块根，是广西壮族习用药材，具有补气、补血、提高免疫力、抗衰老、抗应激、改善大脑记忆等功能，用于治疗老年健忘、小儿智力低下、强身健体消除疲劳、体弱多病及病后、产后虚弱等［1］。目前，在国内外只有本课题组对YLS进行了初步提取分离及相关药理、药效研究。YLS成分复杂，黄酮为其主要活性成分。YLS黄酮具有降血压、抗自由基、减轻心肌缺血再灌注损伤、抑制心肌收缩力、减慢心率和增加冠脉流量等作用［2］。探索高效、稳定、低毒、低成本的提取YLS黄酮方法，对进一步的新药开发意义重大。鉴于此，作者以YLS总黄酮得率为主要指标，辅以提取时间、提取次数、试剂用量、提取成本、人员及环境保护等因素，对传统热回流提取、微波提取、冷浸提取等3种提取工艺进行比较研究。现报道如下。

　　1 材料

　　1.1 试剂YLS饮片（经广西区药检所鉴定）、芦丁对照品（中国药品生物制品检定所）；无水乙醇、石油醚、醋酸乙酯（均为分析纯）。

　　1.2 仪器热回流提取装置、WA-812型微波提取仪、RE一52AA旋转蒸发器、DZF一250型微波真空干燥箱、贝克曼紫外分光光度计、薄层扫描仪等。

　　2 方法

　　2.1 YLS 总黄酮的提取

　　2.1.1 热回流提取取500 g YLS饮片，按料液比＝1∶8比例加入70%乙醇，加热回流提取3次，2 h/次。过滤，减压回收乙醇、浓缩，得淡黄褐色浸膏11.045 6 g。重复实验5次。

　　2.1.2 微波提取将500 g YLS饮片粉碎成2 mm粒径，提取溶剂为60%乙醇，料液比为1∶8，提取温度 < 60°C，微波功率240 W，提取时间20 min , 提取1次。过滤，减压回收乙醇、浓缩，得淡黄褐色浸膏9.532 4 g。重复实验5次。

　　2.1.3 冷浸提取将500 g YLS饮片粉碎成2 mm粒径，以石油醚：醋酸乙酯＝5∶5混和溶剂冷浸过夜提取，料液比为1∶8，连续提取5次，过滤，合并所有滤液，减压回收溶剂、浓缩，得淡黄褐色浸膏10.259 8 g。重复实验5次。

　　2.2 YLS 总黄酮的分离3种方法提取所得的浸膏均按下法分离得到总黄酮。

将浸膏加适量蒸馏水混悬，3 500 r/min离心，倾去上清液，沉淀物加适量80%乙醇溶解，过滤除去沉淀，滤液加入适量石油醚，振摇30 min，室温静置12 h，除去石油醚萃取液，所得乙醇液浓缩至小体积，上AB-8大孔树脂柱(40 mm×800 mm)，用2倍量蒸馏水洗涤树脂柱，收集流出液和水洗液，再用95%乙醇洗脱，流速为50～60滴·min-1（约2～2.5 ml·min-1）。收集洗脱液并减压回收乙醇，浓缩物在60℃减压恒温干燥，干燥物用少量甲醇使之刚好完全溶解，室温放置24 h，有晶体析出，过滤，重结晶3次，得到黄色针状结晶。
3 讨论

传统的热回流提取法具有成本低、安全性高、适合工业生产等优点。缺点是：①总黄酮提取率低；②温度过高导致部分黄酮类化合物分解;③由于提取溶剂中含水，在加热状态下，一些溶于水的杂质如糖类、蛋白质等一并进入提取液中，加大了进一步分离的困难。

微波提取是利用不同结构的物质在微波场中吸收微波能力的差异，使基体物质中的某些区域或提取体系中的某些组分被选择性加热，从而使被提取物质从基体或体系中分离，进入介电常数较小、微波吸收能力相对较差的提取剂中［4］。此法的主要优点是：①可有效保护药材中的功能成分，对提取物具有较高的选择性，提取率高；②提取速度快、省时、溶剂用量少；③安全、节能、设备简单、节省投资。

用石油醚、醋酸乙酯等极性较小的有机溶剂，主要是提取黄酮苷元部分。虽然有机溶剂对黄酮的提取率较高，而且冷浸提取也避免了黄酮类物质的受热分解，然而还是存在一些缺点：①石油醚、醋酸乙酯等有机溶剂易燃易爆；②试剂有毒和强烈刺激性，危害人体、污染环境;③提取周期较长，试剂成本较高。

从表2可见，微波提取玉郎伞总黄酮的提取率较传统热回流提取和冷浸提取高，且提取时间短、试剂用量少、成本较低，为目前玉郎伞总黄酮的最佳提取方法。
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