不同产区黄褐毛忍冬的成分与药用价值分析-现代护理杂志投稿须知
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1 仪器、试剂及材料
1.1 仪器
UV-2501紫外分光光度计（日本岛津），电子天平（梅特勒-托利多），超声波清洗器。
1.2 试剂
芦丁对照品（中国药品生物制品检定所，供含量测定用；编号：0080-9504），其他试剂均为分析纯。
1.3 样品
黄褐毛忍冬为忍冬科植物黄褐毛忍冬（Lonicera fulvotomentosa Hsu et S.C Cheng）的干燥花蕾，贵州是主产区之一，资源丰富，被贵州省中药材、民族药材质量标准收载［1］。红腺忍冬为忍冬科植物红腺忍冬（Lonicera hypoglauca Miq）的干燥花蕾［2］，主产于河南、山东、云南等地。所含有效成分为黄酮类化合物、绿原酸等。本实验采用紫外分光光度法，对贵州不同产地栽培黄褐毛忍冬及红腺忍冬的总黄酮含量进行对比分析，为贵州黄褐毛忍冬收入为药典品种提供理论依据［3，4］。
黄褐毛忍冬采于贵州栽培地安龙、贞丰、兴义；河南、山东、云南红腺忍冬为市售。经贵阳中医学院何顺志研究员鉴定为黄褐毛忍冬（Lonicera fulvotomentosa Hsu et S.C Cheng）的干燥花蕾，红腺忍冬（Lonicera hypoglauca Miq）的干燥花蕾。
2 实验部分
2.1 对照品溶液的制备
精密称取芦丁对照品7.68 mg，置50 ml容量瓶中，加60%乙醇溶液，并稀释至刻度，即得浓度为0.1536 mg/ml的对照品溶液。
2.2 供试品溶液制备
精密称取各样品粉末（过60目筛）约0.2 g，置于100 ml圆底烧瓶中，精密加入60%乙醇50 ml，称定重量，水浴加热回流提取1 h，放冷，称重，用60%乙醇补足重量，摇匀，滤过。滤液作为供试品溶液。
2.3 检测波长的选择
取对照品溶液1 ml置于10 ml容量瓶中，加入0.5%亚硝酸钠1.0 ml，10%硝酸铝1.0 ml，10%氢氧化钠1.0 ml，加入60%乙醇稀释至刻度，摇匀，放置15 min；于400~600 nm波长处扫描，结果表明，在494 nm波长处有最大吸收，故选择494 nm为测定波长。精密吸取对照品溶液0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 ml分别置于10 ml量瓶中，分别加入5%亚硝酸钠1.0 ml、10%硝酸铝1.0 ml、10%氢氧化钠1.0 ml，并加入60%乙醇稀释至刻度，摇匀，放置15 min，在494 nm波长处测定。以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程为：A=0.0107C-0.0115，r=0.9999。结果表明，芦丁在7.68~76.8 μg/ml范围内呈良好线性关系。
2.4 重现性实验
精密称取同一批号样品5份，分别按“供试品溶液制备”项下操作，按“样品测定”项下测定，结果总黄酮的平均含量为：10.49%，RSD为1.01%。取供试品溶液按“样品测定”项下，分别放置0、1、2、3 h测定，RSD为1.67%，结果表明在3 h内稳定。
2.5 回收率实验
取已知含量的样品5份，每份约0.1 g，精密称定，分别精密加入对照品溶液4.0 ml，按“供试品溶液制备”项下操作，按“样品测定”项下测定，计算得平均回收率为98.71%，RSD为0.52%，结果见表1。表1 回收率实验 （略） 注：对照品加入量为0.3088 mg
2.6 样品测定
精密吸取供试品溶液1 ml置于10 ml容量瓶中，加入5%亚硝酸钠1.0 ml、10%硝酸钠1.0 ml、10%氢氧化钠1.0 ml，用60%乙醇稀释至刻度，摇匀，放置15 min，在494 nm波长处测定，按回归方程计算含量，结果见表2。表2 不同产地总黄酮含量测定结果 （略）
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1 仪器、试剂及材料
1.1 仪器
UV-2501紫外分光光度计（日本岛津），电子天平（梅特勒-托利多），超声波清洗器。
1.2 试剂
芦丁对照品（中国药品生物制品检定所，供含量测定用；编号：0080-9504），其他试剂均为分析纯。
1.3 样品
黄褐毛忍冬为忍冬科植物黄褐毛忍冬（Lonicera fulvotomentosa Hsu et S.C Cheng）的干燥花蕾，贵州是主产区之一，资源丰富，被贵州省中药材、民族药材质量标准收载［1］。红腺忍冬为忍冬科植物红腺忍冬（Lonicera hypoglauca Miq）的干燥花蕾［2］，主产于河南、山东、云南等地。所含有效成分为黄酮类化合物、绿原酸等。本实验采用紫外分光光度法，对贵州不同产地栽培黄褐毛忍冬及红腺忍冬的总黄酮含量进行对比分析，为贵州黄褐毛忍冬收入为药典品种提供理论依据［3，4］。
黄褐毛忍冬采于贵州栽培地安龙、贞丰、兴义；河南、山东、云南红腺忍冬为市售。经贵阳中医学院何顺志研究员鉴定为黄褐毛忍冬（Lonicera fulvotomentosa Hsu et S.C Cheng）的干燥花蕾，红腺忍冬（Lonicera hypoglauca Miq）的干燥花蕾。
2 实验部分
2.1 对照品溶液的制备
精密称取芦丁对照品7.68 mg，置50 ml容量瓶中，加60%乙醇溶液，并稀释至刻度，即得浓度为0.1536 mg/ml的对照品溶液。
2.2 供试品溶液制备
精密称取各样品粉末（过60目筛）约0.2 g，置于100 ml圆底烧瓶中，精密加入60%乙醇50 ml，称定重量，水浴加热回流提取1 h，放冷，称重，用60%乙醇补足重量，摇匀，滤过。滤液作为供试品溶液。
2.3 检测波长的选择
取对照品溶液1 ml置于10 ml容量瓶中，加入0.5%亚硝酸钠1.0 ml，10%硝酸铝1.0 ml，10%氢氧化钠1.0 ml，加入60%乙醇稀释至刻度，摇匀，放置15 min；于400~600 nm波长处扫描，结果表明，在494 nm波长处有最大吸收，故选择494 nm为测定波长。精密吸取对照品溶液0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 ml分别置于10 ml量瓶中，分别加入5%亚硝酸钠1.0 ml、10%硝酸铝1.0 ml、10%氢氧化钠1.0 ml，并加入60%乙醇稀释至刻度，摇匀，放置15 min，在494 nm波长处测定。以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程为：A=0.0107C-0.0115，r=0.9999。结果表明，芦丁在7.68~76.8 μg/ml范围内呈良好线性关系。
2.4 重现性实验
精密称取同一批号样品5份，分别按“供试品溶液制备”项下操作，按“样品测定”项下测定，结果总黄酮的平均含量为：10.49%，RSD为1.01%。取供试品溶液按“样品测定”项下，分别放置0、1、2、3 h测定，RSD为1.67%，结果表明在3 h内稳定。
2.5 回收率实验
取已知含量的样品5份，每份约0.1 g，精密称定，分别精密加入对照品溶液4.0 ml，按“供试品溶液制备”项下操作，按“样品测定”项下测定，计算得平均回收率为98.71%，RSD为0.52%，结果见表1。表1 回收率实验 （略） 注：对照品加入量为0.3088 mg
2.6 样品测定
精密吸取供试品溶液1 ml置于10 ml容量瓶中，加入5%亚硝酸钠1.0 ml、10%硝酸钠1.0 ml、10%氢氧化钠1.0 ml，用60%乙醇稀释至刻度，摇匀，放置15 min，在494 nm波长处测定，按回归方程计算含量，结果见表2。表2 不同产地总黄酮含量测定结果 （略）
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