营养免疫学的临床医疗作用研究-护理论文如何投稿
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营养免疫是当今热门的研究课题之一。人体许多种疾病都涉及免疫系统，免疫系统有防御、监视、耐受和调节功能。各种营养素，是人体依存最为重要的环境因素，也是维持人体正常免疫功能和健康的物质基础。各种维生素虽然人体每日需要量很少，它们常以辅酶或辅基的形式参与酶的功能，尤其是B族的维生素，因此它们在调节人体物质代谢过程中起着关键的作用。研究各种维生素对人体免疫系统的作用是营养免疫的重要任务。
Mosmon （1983年）［1］报道噻唑蓝（MTT）比色法测定细胞活性。MTT可被各种类型的活性细胞（RBC除外）摄取，活性强的细胞摄取较多的MTT，在线粒体内被脱氢酶还原为甲簪颗粒（Formazan），颜色由黄变深紫，加入SDS使细胞完全裂解释放出甲簪，在波长570nm下酶标仪测量OD值，
OD值越高，其甲簪浓度越高，反应活的细胞活性越强［2，3］。因此，MTT法可定量检测各种细胞的活性。我们曾经报道 几种水溶性维生素对小鼠淋巴细胞活性的作用［4］。本报道VitB1、VitB6、VitB12 和VitC对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用，它们在一定浓度下对小鼠腹腔巨噬细胞活性有增强作用，VitB12 尤为显着。VitB1、VitB6、VitB12 均涉及体内细胞正常生理生化功能，因此，它们当然参与小鼠腹腔巨噬细胞的生化反应，完成正常生理功能。VitC经临床实验证实［5］，它具有抗氧化作用，增强巨噬细胞的吞噬杀菌功能，并有增强淋巴细胞功能（曾已报道）的VitC还参与免疫球蛋白的二硫键的形成，从而促进免疫球蛋白的合成。有增加补体C1和干扰素的产生，以及增强NK细胞的活性，因此增强人体抗肿瘤的作用［6，7］。
1 材料与方法
1.1 实验动物和主要试剂及实验仪器
ICR小鼠体重（20±2）g，雄性，由首都医科大学实验动物部提供。RPMI1640培养液为Hyclmone公司产品。噻唑蓝（MTT）为Sigma公司产品，10%十二烷基磺酸钠（SDS）为BRL公司产品，淋巴细胞分离液为TBD生物技术发展中心产品，液体石蜡油为北京旭东化工厂产品， VitB1 （5mg/ ml）、VitB6 （5mg/ ml）、VitB12 （0.5mg/ ml）均为天津金耀氨基酸有限公司产品， VitC（400mg/ ml）为北京双鹤药业有限公司产品，酶标仪为SLT公司产品（型号为A-5082）。
1.2 方法
（1）对小鼠腹腔注射（VitB1 、VitB6 、VitB12 和VitC，无菌液体石蜡油），取ICR小鼠40只分成4组，每组10只，分别为1组、2组、3组和4组。1组为VitB1实验组，第1天对其中5只小鼠腹腔注射无菌生理盐水 0.2ml/只，作为对照，另外5只小鼠腹腔注射VitB1 0.05ml/只作为实验组。2组为VitB6 实验组，第1天对其中5只小鼠腹腔注射无菌生理盐水 0.2ml/只，作为对照，另外5只小鼠腹腔注射VitB6 0.2ml/只作为实验组。3组为VitB12 实验组，第1天对其中5只小鼠腹腔注射无菌生理盐水 0.2ml/只，作为对照，另外5只小鼠腹腔注射VitB120.2ml /只作为实验组。4组为VitC 实验组，第1天对其中5只小鼠腹腔注射无菌生理盐水 0.2ml /只，作为对照，另外5只小鼠腹腔注射VitC 0.2ml/只作为实验组。以上4组小白鼠经腹腔注射生理盐水和维生素，均于48h后再经腹腔注射无菌液体石蜡油0.1ml /只。48h后行颈椎脱臼处死。
（2）巨噬细胞的制备：将处死的小白鼠行腹部皮肤消毒后，持镊提起腹中部皮肤并剪开，暴露腹膜，避开血管剪开腹膜一小口。用毛细吸管取出腹腔液，并收集于试管中。作好标记后离心，弃上清，洗3次，立即进行台盼蓝染色，计算活细胞数。细胞数108/ ml。
（3）噻唑蓝比色法，将制备的小鼠巨噬细胞按组分管，每组实验管（孔）3管（孔）对照管（孔）3管（孔）。37℃温育2h后，每管加10%SDS（溶于双蒸水），轻轻震荡，待甲簪颗粒完全释放后，再用酶标仪测OD570值。
2 结果
VitB1对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用 VitB1对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用，VitB150μl（0.0025μg）对小鼠腹腔巨噬细胞活性有增 强作用，P<0.01，见图1。VitB6对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用， VitB6200μl（0.002μg）对小鼠腹腔巨噬细胞活性有增强作用，P<0.01，见图2。VitB12对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用，200μl（0.002μg）对小鼠腹腔巨噬细胞活性有增强作用，P<0.001，见图3。 VitC对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用，200μl（0.08μg）对小鼠腹腔巨噬细胞活性有增强作用，P<0.01，见图4。
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营养免疫是当今热门的研究课题之一。人体许多种疾病都涉及免疫系统，免疫系统有防御、监视、耐受和调节功能。各种营养素，是人体依存最为重要的环境因素，也是维持人体正常免疫功能和健康的物质基础。各种维生素虽然人体每日需要量很少，它们常以辅酶或辅基的形式参与酶的功能，尤其是B族的维生素，因此它们在调节人体物质代谢过程中起着关键的作用。研究各种维生素对人体免疫系统的作用是营养免疫的重要任务。
Mosmon （1983年）［1］报道噻唑蓝（MTT）比色法测定细胞活性。MTT可被各种类型的活性细胞（RBC除外）摄取，活性强的细胞摄取较多的MTT，在线粒体内被脱氢酶还原为甲簪颗粒（Formazan），颜色由黄变深紫，加入SDS使细胞完全裂解释放出甲簪，在波长570nm下酶标仪测量OD值，
OD值越高，其甲簪浓度越高，反应活的细胞活性越强［2，3］。因此，MTT法可定量检测各种细胞的活性。我们曾经报道 几种水溶性维生素对小鼠淋巴细胞活性的作用［4］。本报道VitB1、VitB6、VitB12 和VitC对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用，它们在一定浓度下对小鼠腹腔巨噬细胞活性有增强作用，VitB12 尤为显着。VitB1、VitB6、VitB12 均涉及体内细胞正常生理生化功能，因此，它们当然参与小鼠腹腔巨噬细胞的生化反应，完成正常生理功能。VitC经临床实验证实［5］，它具有抗氧化作用，增强巨噬细胞的吞噬杀菌功能，并有增强淋巴细胞功能（曾已报道）的VitC还参与免疫球蛋白的二硫键的形成，从而促进免疫球蛋白的合成。有增加补体C1和干扰素的产生，以及增强NK细胞的活性，因此增强人体抗肿瘤的作用［6，7］。
1 材料与方法
1.1 实验动物和主要试剂及实验仪器
ICR小鼠体重（20±2）g，雄性，由首都医科大学实验动物部提供。RPMI1640培养液为Hyclmone公司产品。噻唑蓝（MTT）为Sigma公司产品，10%十二烷基磺酸钠（SDS）为BRL公司产品，淋巴细胞分离液为TBD生物技术发展中心产品，液体石蜡油为北京旭东化工厂产品， VitB1 （5mg/ ml）、VitB6 （5mg/ ml）、VitB12 （0.5mg/ ml）均为天津金耀氨基酸有限公司产品， VitC（400mg/ ml）为北京双鹤药业有限公司产品，酶标仪为SLT公司产品（型号为A-5082）。
1.2 方法
（1）对小鼠腹腔注射（VitB1 、VitB6 、VitB12 和VitC，无菌液体石蜡油），取ICR小鼠40只分成4组，每组10只，分别为1组、2组、3组和4组。1组为VitB1实验组，第1天对其中5只小鼠腹腔注射无菌生理盐水 0.2ml/只，作为对照，另外5只小鼠腹腔注射VitB1 0.05ml/只作为实验组。2组为VitB6 实验组，第1天对其中5只小鼠腹腔注射无菌生理盐水 0.2ml/只，作为对照，另外5只小鼠腹腔注射VitB6 0.2ml/只作为实验组。3组为VitB12 实验组，第1天对其中5只小鼠腹腔注射无菌生理盐水 0.2ml/只，作为对照，另外5只小鼠腹腔注射VitB120.2ml /只作为实验组。4组为VitC 实验组，第1天对其中5只小鼠腹腔注射无菌生理盐水 0.2ml /只，作为对照，另外5只小鼠腹腔注射VitC 0.2ml/只作为实验组。以上4组小白鼠经腹腔注射生理盐水和维生素，均于48h后再经腹腔注射无菌液体石蜡油0.1ml /只。48h后行颈椎脱臼处死。
（2）巨噬细胞的制备：将处死的小白鼠行腹部皮肤消毒后，持镊提起腹中部皮肤并剪开，暴露腹膜，避开血管剪开腹膜一小口。用毛细吸管取出腹腔液，并收集于试管中。作好标记后离心，弃上清，洗3次，立即进行台盼蓝染色，计算活细胞数。细胞数108/ ml。
（3）噻唑蓝比色法，将制备的小鼠巨噬细胞按组分管，每组实验管（孔）3管（孔）对照管（孔）3管（孔）。37℃温育2h后，每管加10%SDS（溶于双蒸水），轻轻震荡，待甲簪颗粒完全释放后，再用酶标仪测OD570值。
2 结果
VitB1对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用 VitB1对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用，VitB150μl（0.0025μg）对小鼠腹腔巨噬细胞活性有增 强作用，P<0.01，见图1。VitB6对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用， VitB6200μl（0.002μg）对小鼠腹腔巨噬细胞活性有增强作用，P<0.01，见图2。VitB12对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用，200μl（0.002μg）对小鼠腹腔巨噬细胞活性有增强作用，P<0.001，见图3。 VitC对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用，200μl（0.08μg）对小鼠腹腔巨噬细胞活性有增强作用，P<0.01，见图4。
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