正交设计法提取骨碎补有效成分的实验-儿科临床医学论文
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1 仪器和材料
1.1 仪器
uv-2800H 型紫外可见分光光度计（尤尼柯（上海）仪器有限公司）。
1.2 材料
所有药材均购于北京本草方源药业有限公司。
2 方法和结果
2.1 样品的制备
按处方投料，加规定量的水，煎煮规定的时间和次数，滤过，滤液浓缩至稠膏，放入真空干燥箱，干燥得干膏作为样品，进行测定。
2.2 正交试验设计
选用L9（34）正交试验，结合影响该药材提取效率的主要因素，考察药材加水量、提取时间、提取次数对总黄酮含量的影响，同时考虑生产实际，选取3 个水平，见表1。
2.3 总黄酮含量的测定方法
2.3.1 对照品溶液制备
精密称取芦丁（批号100080-200707，购于中国药品生物制品鉴定所）5.1 mg，加甲醇溶解并定容至100 mL，即得0.051 mg/mL。
2.3.2 标准曲线的制备
吸取芦丁标准溶液：0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL 于10 mL 比色管中，加甲醇至刻度，摇匀，于波长360 nm 比色。求得回归方程，Y=31.29X+0.0018 R2 = 0.9997，计算试样中总黄酮含量。
2.3.3 供试品溶液的制备
称取一定量的试样（大约0.5 g），加乙醇定容至25 mL，摇匀后，超声提取20 min，放置，吸取上清液1.0 mL，于蒸发皿中，加1g 聚酰胺粉吸附，于水浴上挥去乙醇，然后转入层析柱。先用甲苯洗，甲苯液弃去，然后用甲醇洗脱黄酮，定容至25 mL。此液于波长360 nm 测定吸收值。计算试样中总黄酮含量。
3 结果 ： 影响因素大小顺序为C>A>B，即提取为最重要，其次为含醇量。
骨碎补具有补肾强骨、养伤止痛之功效。用于肾虚腰痛、耳鸣耳聋、牙齿松动、跌扑闪挫、筋骨伤折等症[1]。其活性成分为柚皮苷等二氢黄酮类化合物。据报道，用水提取和醇提取，提取的活性成分含量相差不多[2]。骨碎补浸膏以水为溶剂时提取效果较好[3]，淫羊藿，具有补肾阳、强筋骨、祛风湿等功效；
黄酮类化合物及淫羊藿苷是淫羊藿重要的活性成分。可用水提或乙醇提取[4]。怀牛膝，具有活血祛瘀、补肝肾、强筋骨、利尿通淋、引血下行功效。甾酮，皂苷，多糖为主要成分。枸杞有清肺、明目、滋肝、补肾之功效，多糖为主要成分。延胡索具有活血化疲，行气止痛功效。五味配伍组方则有补肾，壮腰膝，强筋骨止痛之功效。为了保证制剂质量，用正交设计法研究其最佳提取工艺，分析加水倍数，提取时间，提取次数对总黄酮得率的影响，优选出最佳提取条件。
中西医临床医学论文 http://www.qikanba.com/
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1.1 仪器
uv-2800H 型紫外可见分光光度计（尤尼柯（上海）仪器有限公司）。
1.2 材料
所有药材均购于北京本草方源药业有限公司。
2 方法和结果
2.1 样品的制备
按处方投料，加规定量的水，煎煮规定的时间和次数，滤过，滤液浓缩至稠膏，放入真空干燥箱，干燥得干膏作为样品，进行测定。
2.2 正交试验设计
选用L9（34）正交试验，结合影响该药材提取效率的主要因素，考察药材加水量、提取时间、提取次数对总黄酮含量的影响，同时考虑生产实际，选取3 个水平，见表1。
2.3 总黄酮含量的测定方法
2.3.1 对照品溶液制备
精密称取芦丁（批号100080-200707，购于中国药品生物制品鉴定所）5.1 mg，加甲醇溶解并定容至100 mL，即得0.051 mg/mL。
2.3.2 标准曲线的制备
吸取芦丁标准溶液：0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL 于10 mL 比色管中，加甲醇至刻度，摇匀，于波长360 nm 比色。求得回归方程，Y=31.29X+0.0018 R2 = 0.9997，计算试样中总黄酮含量。
2.3.3 供试品溶液的制备
称取一定量的试样（大约0.5 g），加乙醇定容至25 mL，摇匀后，超声提取20 min，放置，吸取上清液1.0 mL，于蒸发皿中，加1g 聚酰胺粉吸附，于水浴上挥去乙醇，然后转入层析柱。先用甲苯洗，甲苯液弃去，然后用甲醇洗脱黄酮，定容至25 mL。此液于波长360 nm 测定吸收值。计算试样中总黄酮含量。
3 结果 ： 影响因素大小顺序为C>A>B，即提取为最重要，其次为含醇量。
骨碎补具有补肾强骨、养伤止痛之功效。用于肾虚腰痛、耳鸣耳聋、牙齿松动、跌扑闪挫、筋骨伤折等症[1]。其活性成分为柚皮苷等二氢黄酮类化合物。据报道，用水提取和醇提取，提取的活性成分含量相差不多[2]。骨碎补浸膏以水为溶剂时提取效果较好[3]，淫羊藿，具有补肾阳、强筋骨、祛风湿等功效；
黄酮类化合物及淫羊藿苷是淫羊藿重要的活性成分。可用水提或乙醇提取[4]。怀牛膝，具有活血祛瘀、补肝肾、强筋骨、利尿通淋、引血下行功效。甾酮，皂苷，多糖为主要成分。枸杞有清肺、明目、滋肝、补肾之功效，多糖为主要成分。延胡索具有活血化疲，行气止痛功效。五味配伍组方则有补肾，壮腰膝，强筋骨止痛之功效。为了保证制剂质量，用正交设计法研究其最佳提取工艺，分析加水倍数，提取时间，提取次数对总黄酮得率的影响，优选出最佳提取条件。
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