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正交设计法提取骨碎补有效成分的实验-儿科临床医学论文

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 1 仪器和材料
  1.1 仪器
  uv-2800H 型紫外可见分光光度计(尤尼柯(上海)仪器有限公司)。
  1.2 材料
  所有药材均购于北京本草方源药业有限公司。
  2 方法和结果
  2.1 样品的制备
  按处方投料,加规定量的水,煎煮规定的时间和次数,滤过,滤液浓缩至稠膏,放入真空干燥箱,干燥得干膏作为样品,进行测定。
  2.2 正交试验设计
  选用L9(34)正交试验,结合影响该药材提取效率的主要因素,考察药材加水量、提取时间、提取次数对总黄酮含量的影响,同时考虑生产实际,选取3 个水平,见表1。
  2.3 总黄酮含量的测定方法
  2.3.1 对照品溶液制备
  精密称取芦丁(批号100080-200707,购于中国药品生物制品鉴定所)5.1 mg,加甲醇溶解并定容至100 mL,即得0.051 mg/mL。
  2.3.2 标准曲线的制备
  吸取芦丁标准溶液:0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL 于10 mL 比色管中,加甲醇至刻度,摇匀,于波长360 nm 比色。求得回归方程,Y=31.29X+0.0018 R2 = 0.9997,计算试样中总黄酮含量。
  2.3.3 供试品溶液的制备
  称取一定量的试样(大约0.5 g),加乙醇定容至25 mL,摇匀后,超声提取20 min,放置,吸取上清液1.0 mL,于蒸发皿中,加1g 聚酰胺粉吸附,于水浴上挥去乙醇,然后转入层析柱。先用甲苯洗,甲苯液弃去,然后用甲醇洗脱黄酮,定容至25 mL。此液于波长360 nm 测定吸收值。计算试样中总黄酮含量。
  3 结果 : 影响因素大小顺序为C>A>B,即提取为最重要,其次为含醇量。
  骨碎补具有补肾强骨、养伤止痛之功效。用于肾虚腰痛、耳鸣耳聋、牙齿松动、跌扑闪挫、筋骨伤折等症[1]。其活性成分为柚皮苷等二氢黄酮类化合物。据报道,用水提取和醇提取,提取的活性成分含量相差不多[2]。骨碎补浸膏以水为溶剂时提取效果较好[3],淫羊藿,具有补肾阳、强筋骨、祛风湿等功效;
  黄酮类化合物及淫羊藿苷是淫羊藿重要的活性成分。可用水提或乙醇提取[4]。怀牛膝,具有活血祛瘀、补肝肾、强筋骨、利尿通淋、引血下行功效。甾酮,皂苷,多糖为主要成分。枸杞有清肺、明目、滋肝、补肾之功效,多糖为主要成分。延胡索具有活血化疲,行气止痛功效。五味配伍组方则有补肾,壮腰膝,强筋骨止痛之功效。为了保证制剂质量,用正交设计法研究其最佳提取工艺,分析加水倍数,提取时间,提取次数对总黄酮得率的影响,优选出最佳提取条件。
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