五味保肝丸的药效成分实验测定分析-优质护理论文
优质护理论文 护理论文格式 护理专业毕业论文 护理本科论文
五味保肝丸的主要药效成分为五味子，其主要有效成分为五味子甲素、五味子乙素。五味子甲素为脂溶性成分,能溶于乙醇、甲醇,极易溶于苯、氯仿、乙醚。因此,在提取样品中一般都采用乙醚、氯仿、石油醚等有机溶剂超声提取后,挥干有机溶剂,残渣加甲醇定容来制备样品溶液。本实验采用氯仿超声提取，甲醇定容来制备样品溶液，五味子甲素加样回收率为97.64%,RSD=1.41%(n=6)，效果满意。
HTLC法测定五味子及其制剂中有效成分常用的流动相多用不同比例的甲醇-水[2～4]，也有用乙腈-水[5，6]，乙腈-甲醇-水[7]和甲醇-四氢呋喃-水[8]。对比试验结果表明，选用甲醇-水(80：20) ，供试品溶液相邻峰分离度能满足实验要求。
1 主要仪器、试剂与药材
1.1 主要仪器
Agilent 1100型高效液相色谱仪 (美国)， JA2003型电子分析天平(上海)，KQ100型超声波清洗器(昆山)。
1.2 主要试剂
五味子甲素对照品(中国药品生物制品检定所)，甲醇为色谱纯(美国),水为重蒸馏水,其余试剂均为分析纯。
1.3 主要药材
五味保肝丸由本院制剂室提供，其他实验用药材取自本院中药库，经鉴定五味子为木兰科植物五味子Schisandchinensis(Turcz.)Bail的干燥成熟果实，丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.干燥根及根茎。阴性对照品实验时现制。
2 薄层色谱定性鉴别
2.1 五味子定性鉴别
取五味保肝丸2g，研碎，加氯仿30ml，超声提取30min，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿1ml使溶解，作为供试品溶液;另取缺五味子的处方比例量的其他药材细粉2g，按上述方法,制成五味子阴性对照液。再取五味子甲素对照品，加氯仿制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液;吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚(30℃～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15：5：1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干。置紫外灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，五味子阴性对照液无此斑点。
3 五味子甲素含量测定
3.1 色谱条件
色谱柱：Agilent ODS柱(4.6mm×150mm,5μm)。柱温：30℃,流动相：甲醇-水(80：20),流速：1.5ml/min，检测波长：250nm。理论板数按五味子甲素计应不低于3000,五味子甲素峰与相邻峰分离度符合要求。
3.2 对照品溶液制备
精密称取减压干燥至恒重的五味子甲素对照品6.32mg,加甲醇使溶解,并定容至25 ml;制成浓度为0.2528mg/ml的对照品溶液。
3.3 样品液制备
取五味保肝丸适量，粉碎过四号筛, 置硅胶于干燥器中干燥24h后备用。取样品粉末约2g，精密称定,置150ml 具塞三角烧瓶中,准确加入氯仿50ml,称重，超声提取40min, 水浴温度45℃。提取液放至室温, 再称定重量，用氯仿补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液10ml，置水浴上蒸干,残渣加甲醇分次溶解定溶于10ml 容量瓶中, 得样品液。
3.4 阴性对照溶液制备:取不含五味子的处方比例量的其他药材细粉，照“2.3”项方法制成阴性对照溶液。按“2.1”项下条件，将对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液分别进样10μl进行测定, 结果对照品溶液和供试品溶液色谱图在相应的保留时间处均有最大吸收峰，供试品溶液相邻峰无干扰;阴性样品色谱图中,在与对照品色谱相应的保留时间处无色谱峰出现,表明该制剂中其他组分对五味子甲素的测定无干扰。
3.5 精密度试验
精密吸取“2.2”步对照品溶液(浓度为0.2528mg/ml)2μl, 按“2.1”色谱条件连续进样5次, 测定峰面积RSD为1.42%(n=5)。精密度良好。精密吸取对照品溶液(浓度为0.2528mg/ml)2μl,分别于配制后0、2、4、8、16、24h进样,测定面积的RSD为1.81%，表明供试品溶液在24h内稳定。精密称定研细的同一批(090901)样品粉末2.0g共5份,按“2.3”项方法制备5份样品溶液,各吸取10μl进样,测定面积的RSD值为0.99%(n=5)。表明方法重复性较好。
3.6 加样回收率实验
精密量取已知含量五味子样品液(五味子甲素浓度为0.04136μg/μl)5.0ml 6份, 分别精密加入浓度为0.2528mg/ml的对照品溶液0.25、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml，并分别用甲醇定溶至10.0ml。分别进样10μl，测定,并计算回收率。结果见表1。表1 加样回收测定结果取5批五味保肝丸(降酶丸)样品，批号分别是：100312、100427、100604、100712、100802,按“2.3”步方法分别制备样品液，并进样，测定，计算，5批样品五味子甲素含量分别为0.3075、0.3121、0.2976、0.2684、0.2713mg/g。按5批样品含量测定结果，暂定降酶丸中五味子甲素含量不低于0.250mg/g。
中华护理杂志论文 http://www.qikanba.com/
五味保肝丸的主要药效成分为五味子，其主要有效成分为五味子甲素、五味子乙素。五味子甲素为脂溶性成分,能溶于乙醇、甲醇,极易溶于苯、氯仿、乙醚。因此,在提取样品中一般都采用乙醚、氯仿、石油醚等有机溶剂超声提取后,挥干有机溶剂,残渣加甲醇定容来制备样品溶液。本实验采用氯仿超声提取，甲醇定容来制备样品溶液，五味子甲素加样回收率为97.64%,RSD=1.41%(n=6)，效果满意。
HTLC法测定五味子及其制剂中有效成分常用的流动相多用不同比例的甲醇-水[2～4]，也有用乙腈-水[5，6]，乙腈-甲醇-水[7]和甲醇-四氢呋喃-水[8]。对比试验结果表明，选用甲醇-水(80：20) ，供试品溶液相邻峰分离度能满足实验要求。
1 主要仪器、试剂与药材
1.1 主要仪器
Agilent 1100型高效液相色谱仪 (美国)， JA2003型电子分析天平(上海)，KQ100型超声波清洗器(昆山)。
1.2 主要试剂
五味子甲素对照品(中国药品生物制品检定所)，甲醇为色谱纯(美国),水为重蒸馏水,其余试剂均为分析纯。
1.3 主要药材
五味保肝丸由本院制剂室提供，其他实验用药材取自本院中药库，经鉴定五味子为木兰科植物五味子Schisandchinensis(Turcz.)Bail的干燥成熟果实，丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.干燥根及根茎。阴性对照品实验时现制。
2 薄层色谱定性鉴别
2.1 五味子定性鉴别
取五味保肝丸2g，研碎，加氯仿30ml，超声提取30min，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿1ml使溶解，作为供试品溶液;另取缺五味子的处方比例量的其他药材细粉2g，按上述方法,制成五味子阴性对照液。再取五味子甲素对照品，加氯仿制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液;吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚(30℃～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15：5：1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干。置紫外灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，五味子阴性对照液无此斑点。
3 五味子甲素含量测定
3.1 色谱条件
色谱柱：Agilent ODS柱(4.6mm×150mm,5μm)。柱温：30℃,流动相：甲醇-水(80：20),流速：1.5ml/min，检测波长：250nm。理论板数按五味子甲素计应不低于3000,五味子甲素峰与相邻峰分离度符合要求。
3.2 对照品溶液制备
精密称取减压干燥至恒重的五味子甲素对照品6.32mg,加甲醇使溶解,并定容至25 ml;制成浓度为0.2528mg/ml的对照品溶液。
3.3 样品液制备
取五味保肝丸适量，粉碎过四号筛, 置硅胶于干燥器中干燥24h后备用。取样品粉末约2g，精密称定,置150ml 具塞三角烧瓶中,准确加入氯仿50ml,称重，超声提取40min, 水浴温度45℃。提取液放至室温, 再称定重量，用氯仿补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液10ml，置水浴上蒸干,残渣加甲醇分次溶解定溶于10ml 容量瓶中, 得样品液。
3.4 阴性对照溶液制备:取不含五味子的处方比例量的其他药材细粉，照“2.3”项方法制成阴性对照溶液。按“2.1”项下条件，将对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液分别进样10μl进行测定, 结果对照品溶液和供试品溶液色谱图在相应的保留时间处均有最大吸收峰，供试品溶液相邻峰无干扰;阴性样品色谱图中,在与对照品色谱相应的保留时间处无色谱峰出现,表明该制剂中其他组分对五味子甲素的测定无干扰。
3.5 精密度试验
精密吸取“2.2”步对照品溶液(浓度为0.2528mg/ml)2μl, 按“2.1”色谱条件连续进样5次, 测定峰面积RSD为1.42%(n=5)。精密度良好。精密吸取对照品溶液(浓度为0.2528mg/ml)2μl,分别于配制后0、2、4、8、16、24h进样,测定面积的RSD为1.81%，表明供试品溶液在24h内稳定。精密称定研细的同一批(090901)样品粉末2.0g共5份,按“2.3”项方法制备5份样品溶液,各吸取10μl进样,测定面积的RSD值为0.99%(n=5)。表明方法重复性较好。
3.6 加样回收率实验
精密量取已知含量五味子样品液(五味子甲素浓度为0.04136μg/μl)5.0ml 6份, 分别精密加入浓度为0.2528mg/ml的对照品溶液0.25、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml，并分别用甲醇定溶至10.0ml。分别进样10μl，测定,并计算回收率。结果见表1。表1 加样回收测定结果取5批五味保肝丸(降酶丸)样品，批号分别是：100312、100427、100604、100712、100802,按“2.3”步方法分别制备样品液，并进样，测定，计算，5批样品五味子甲素含量分别为0.3075、0.3121、0.2976、0.2684、0.2713mg/g。按5批样品含量测定结果，暂定降酶丸中五味子甲素含量不低于0.250mg/g。
中华护理杂志论文 http://www.qikanba.com/
我要分享到：
最新文章NEWS
- • 高职生道德信仰调查 本文版权由期刊吧所有
- • 医学论文中的统计问题
- • 医学论文投稿秘籍
- • 医学论文写作的程序介绍
- • 医学论文摘要的书写过程中存在的问题
- • 叙述医学研究论文标引用词的选择
- • 医学论文写作五大妙招
- • 如何进行儿科临床科学研究选题
- • 医学论文写作的流程
- • 医学论文统计设计方面存在问题总结
推荐期刊Tui Jian
Chinese Journal of Integrative Medicine
Journal of Genetics and Genomics
Journal of Bionic Engineering
Chinese Journal of Structural Chemistry
Pedosphere