淡竹叶中总黄酮提取工艺的效果测定-2011年护理学毕业论文
2011年护理学毕业论文 大学护理论文 医学护理毕业论文 医学护理本科论文
1 仪器、试剂与材料
HH-S型水浴锅(巩义市英峪华仪器厂)；RE-52A旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)；SHZ-D(Ⅲ)循环水式真空泵(巩义市英峪华仪器厂)；754型紫外可见分光光度计(上海光谱仪器有限公司)；AY220电子天平(岛津)；DZF-6050真空干燥箱。对照品芦丁购自中国药品生物制品检定所,批号为0080-9705；淡竹叶产地为浙江,加工单位为安徽丰原铜陵中药饮片有限公司,经南京中医药大学中药鉴定教研室吴启南教授鉴定,粉碎后备用。医用酒精；甲醇AR级；蒸馏水；其余所用试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 标准曲线的制备
精密称取在105 ℃干燥下的芦丁对照品0.020 0 g,置100 mL 容量瓶中,加适量甲醇溶解,定容至刻度,摇匀,即得对照品溶液(每1 mL中含无水芦丁0.2 mg)。精密吸取上述对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL,分别置25 mL容量瓶中,各加水至6.0 mL,加5%亚硝酸钠溶液1 mL,混匀,放置6 min,加10%硝酸铝溶液1 mL,摇匀,放置6 min,加4%氢氧化钠试液10 mL,再加水至刻度,摇匀,放置15 min,进行全波长扫描,在510 nm处均有最大吸收。以510 nm 得的吸收度A对浓度C回归,以吸光度为纵坐标、浓度为横坐标,绘制标准曲线,计算回归方程为A=3.865 7C-0.052 5 (r=0.999 4)。在8～48 μg/mL的范围内,浓度与吸收度有良好的线性关系。
2.2 总黄酮提取量的测定
按2.3.3项下方法制备样品。精密称定一定量的干燥品,用甲醇定容至25 mL容量瓶中,再精密吸取3 mL,置25 mL容量瓶中,照标准曲线制备项下的方法,自“加水至6.0 mL”起,依法测定吸光度。按照2005版《中国药典》(一部)[4]规定的方法测定。
2.3 醇提工艺条件的选择
2.3.1 醇提浓度的选择
将浙江产淡竹叶药材粉碎,称取20 g/份,共3份,加15倍量的50%乙醇,回流提取2 h(85 ℃),3份提取液分别进行抽滤,将滤液在旋转蒸发仪上浓缩(80 ℃,0.08 Mpa),浓缩液在水浴锅上蒸至成稠膏状,再放置真空干燥箱中(80 ℃,0.08 Mpa),24 h后取出,取少量醇浸膏测定总黄酮提取量。同法测定60%、75%、95%醇提液的总黄酮提取量(见表1)。结果表明,以20 g原药材中总黄酮提取量为考察指标,75%醇提液得到的总黄酮量最多,故采用75%乙醇提取的工艺。表1 醇提浓度的选择（略）
由上述直观分析结果可知,以总黄酮提取量为考察指标,最佳提取工艺条件为A1B2C1,即18倍量75%乙醇回流提取1次,每次1.5 ｈ。方差分析结果显示：A因素(加醇量)对总黄酮提出有显著影响,B因素(提取时间),C因素(提取次数)对总黄酮提出无显著影响。结合生产实际,从降低生产成本出发,对提取条件作适当调整,确定醇提工艺条件为A1B3C1,即18倍量75%乙醇回流1 h,提取1次。
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1 仪器、试剂与材料
HH-S型水浴锅(巩义市英峪华仪器厂)；RE-52A旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)；SHZ-D(Ⅲ)循环水式真空泵(巩义市英峪华仪器厂)；754型紫外可见分光光度计(上海光谱仪器有限公司)；AY220电子天平(岛津)；DZF-6050真空干燥箱。对照品芦丁购自中国药品生物制品检定所,批号为0080-9705；淡竹叶产地为浙江,加工单位为安徽丰原铜陵中药饮片有限公司,经南京中医药大学中药鉴定教研室吴启南教授鉴定,粉碎后备用。医用酒精；甲醇AR级；蒸馏水；其余所用试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 标准曲线的制备
精密称取在105 ℃干燥下的芦丁对照品0.020 0 g,置100 mL 容量瓶中,加适量甲醇溶解,定容至刻度,摇匀,即得对照品溶液(每1 mL中含无水芦丁0.2 mg)。精密吸取上述对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL,分别置25 mL容量瓶中,各加水至6.0 mL,加5%亚硝酸钠溶液1 mL,混匀,放置6 min,加10%硝酸铝溶液1 mL,摇匀,放置6 min,加4%氢氧化钠试液10 mL,再加水至刻度,摇匀,放置15 min,进行全波长扫描,在510 nm处均有最大吸收。以510 nm 得的吸收度A对浓度C回归,以吸光度为纵坐标、浓度为横坐标,绘制标准曲线,计算回归方程为A=3.865 7C-0.052 5 (r=0.999 4)。在8～48 μg/mL的范围内,浓度与吸收度有良好的线性关系。
2.2 总黄酮提取量的测定
按2.3.3项下方法制备样品。精密称定一定量的干燥品,用甲醇定容至25 mL容量瓶中,再精密吸取3 mL,置25 mL容量瓶中,照标准曲线制备项下的方法,自“加水至6.0 mL”起,依法测定吸光度。按照2005版《中国药典》(一部)[4]规定的方法测定。
2.3 醇提工艺条件的选择
2.3.1 醇提浓度的选择
将浙江产淡竹叶药材粉碎,称取20 g/份,共3份,加15倍量的50%乙醇,回流提取2 h(85 ℃),3份提取液分别进行抽滤,将滤液在旋转蒸发仪上浓缩(80 ℃,0.08 Mpa),浓缩液在水浴锅上蒸至成稠膏状,再放置真空干燥箱中(80 ℃,0.08 Mpa),24 h后取出,取少量醇浸膏测定总黄酮提取量。同法测定60%、75%、95%醇提液的总黄酮提取量(见表1)。结果表明,以20 g原药材中总黄酮提取量为考察指标,75%醇提液得到的总黄酮量最多,故采用75%乙醇提取的工艺。表1 醇提浓度的选择（略）
由上述直观分析结果可知,以总黄酮提取量为考察指标,最佳提取工艺条件为A1B2C1,即18倍量75%乙醇回流提取1次,每次1.5 ｈ。方差分析结果显示：A因素(加醇量)对总黄酮提出有显著影响,B因素(提取时间),C因素(提取次数)对总黄酮提出无显著影响。结合生产实际,从降低生产成本出发,对提取条件作适当调整,确定醇提工艺条件为A1B3C1,即18倍量75%乙醇回流1 h,提取1次。
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