部分中药中抗金黄色葡萄球菌的药力活性分析-医药营销毕业论文
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金黄色葡萄球菌是化脓性感染中最常见的致病菌,可引起人类局部化脓性感染,如疖、痈、脓肿等,也可引起严重的肺炎、伪膜性肠炎、脑膜炎、骨关节感染和心内膜炎等,甚至败血症、脓毒症等全身感染,同时也可引起中毒性休克综合征(Toxic shock syndrome,TSS)。血液透析治疗的晚期肾病患者特别容易感染金黄色葡萄球菌。此外,多重耐药的甲氧西林金葡菌(MRSA)所引起的感染在不断上升。
1 实验材料
微量多点接种仪:北京医科大学昆仑药物发展研究所生蔓荆子果实中部(果实直径最大处):果皮表皮细胞多角形,垂周壁多数平直而厚,少数壁不清晰,气孔稀疏散布,多凹陷,有时突出;果皮表面密被腺毛和非腺毛,有时可以看到腺毛头部脱落后的残迹;果实表面具有纵横纹饰。果皮表面特征见表1。
垂周壁多数平直而厚产;培养基:Mueller-Hinton琼脂(美国BD公司生产,BBL,简称M-H琼脂);药物:五倍子、连翘、儿茶、黄连和黄芩等14种中药购自河北省药材公司,先将五倍子等按常法做成煎液,即100 g五倍子,文火煎成200 mL煎液(为50%五倍子煎液)备用;菌种:从本院和河北省人民医院临床患者的血液、尿液、脓汁、痰等标本分离的菌株共112株。
2 实验方法
以五倍子为例,采用琼脂稀释法,用M-H琼脂对五倍子等进行定量抗菌实验[1-2]。
2.1 药液稀释
排列无菌中试管10只,于2~10只管中加无菌蒸馏水10 mL,取50%(1∶2)五倍子水煎液20 mL,于第1管加入10 mL,第2管加入10 mL,与第2管混合后取出10 mL,加入第3管,再混合后取10 mL放入第4管,如此连续稀释至第9管,取出10 mL弃掉。第10管只有无菌蒸馏水作对照。这样1~9管含有不同浓度药液各10 mL。
2.2 含药平板制备
用无菌操作将已溶化的无菌M-H琼脂900 mL分装于10瓶,每瓶90 mL,将第1管含10 mL 50%的五倍子水煎液放入含90 mL培养基的瓶中,混合后倾注4个平板,每个平板含25 mL含药琼脂;第2管以后的平板制备同第1管,凝固后备用。这样,第1组的琼脂平板实际含五倍子5%(1∶20),第2组为1∶40,第3组为1∶80……。
含药培养基的药物浓度计算:将一定量(50 mL或100 mL)、一定比例(1∶2或1∶4)的原药材水煎液于37 ℃温箱中烘干,称重,求出每1 mL水煎液的实际重量,就可算出每1 mL培养基中水煎液干重量。如每100 mL 50%五倍子煎液干重为13 000 mg,第1组每100 mL含药培养基含有煎液10 mL,那么每1 mL培养基含煎液干重则等于:13 700/100×10/100=13.0 mg。
2.3 指标测定
用多点接种仪分别吸取各种菌液并将菌液点种于含不同药物浓度的琼脂平板上。于35 ℃培养18~24 h,观察MIC,并统计出MIC50和MIC90的药物浓度和累积抑菌百分率。
医药卫生体制改革论文 http://www.qikanba.com/
金黄色葡萄球菌是化脓性感染中最常见的致病菌,可引起人类局部化脓性感染,如疖、痈、脓肿等,也可引起严重的肺炎、伪膜性肠炎、脑膜炎、骨关节感染和心内膜炎等,甚至败血症、脓毒症等全身感染,同时也可引起中毒性休克综合征(Toxic shock syndrome,TSS)。血液透析治疗的晚期肾病患者特别容易感染金黄色葡萄球菌。此外,多重耐药的甲氧西林金葡菌(MRSA)所引起的感染在不断上升。
1 实验材料
微量多点接种仪:北京医科大学昆仑药物发展研究所生蔓荆子果实中部(果实直径最大处):果皮表皮细胞多角形,垂周壁多数平直而厚,少数壁不清晰,气孔稀疏散布,多凹陷,有时突出;果皮表面密被腺毛和非腺毛,有时可以看到腺毛头部脱落后的残迹;果实表面具有纵横纹饰。果皮表面特征见表1。
垂周壁多数平直而厚产;培养基:Mueller-Hinton琼脂(美国BD公司生产,BBL,简称M-H琼脂);药物:五倍子、连翘、儿茶、黄连和黄芩等14种中药购自河北省药材公司,先将五倍子等按常法做成煎液,即100 g五倍子,文火煎成200 mL煎液(为50%五倍子煎液)备用;菌种:从本院和河北省人民医院临床患者的血液、尿液、脓汁、痰等标本分离的菌株共112株。
2 实验方法
以五倍子为例,采用琼脂稀释法,用M-H琼脂对五倍子等进行定量抗菌实验[1-2]。
2.1 药液稀释
排列无菌中试管10只,于2~10只管中加无菌蒸馏水10 mL,取50%(1∶2)五倍子水煎液20 mL,于第1管加入10 mL,第2管加入10 mL,与第2管混合后取出10 mL,加入第3管,再混合后取10 mL放入第4管,如此连续稀释至第9管,取出10 mL弃掉。第10管只有无菌蒸馏水作对照。这样1~9管含有不同浓度药液各10 mL。
2.2 含药平板制备
用无菌操作将已溶化的无菌M-H琼脂900 mL分装于10瓶,每瓶90 mL,将第1管含10 mL 50%的五倍子水煎液放入含90 mL培养基的瓶中,混合后倾注4个平板,每个平板含25 mL含药琼脂;第2管以后的平板制备同第1管,凝固后备用。这样,第1组的琼脂平板实际含五倍子5%(1∶20),第2组为1∶40,第3组为1∶80……。
含药培养基的药物浓度计算:将一定量(50 mL或100 mL)、一定比例(1∶2或1∶4)的原药材水煎液于37 ℃温箱中烘干,称重,求出每1 mL水煎液的实际重量,就可算出每1 mL培养基中水煎液干重量。如每100 mL 50%五倍子煎液干重为13 000 mg,第1组每100 mL含药培养基含有煎液10 mL,那么每1 mL培养基含煎液干重则等于:13 700/100×10/100=13.0 mg。
2.3 指标测定
用多点接种仪分别吸取各种菌液并将菌液点种于含不同药物浓度的琼脂平板上。于35 ℃培养18~24 h,观察MIC,并统计出MIC50和MIC90的药物浓度和累积抑菌百分率。
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