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复方中药基因转录水平机理分析-中华医学会数字化期刊

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  对中药的作用机理研究不仅仅是用现代科学技术、语言对其功能主治的单纯解释,通过此方面研究,不仅有助于阐明中医药学的基础理论,如对补肾中药的机理研究有助于阐明肾本质;还可以改进方剂,发现新功效、扩大应用范围,确定相应的活性成分等。但中药的作用机理研究长久以来一直难有突破性进展,成为阻碍中药发展提高的重大难题。以分子生物学技术为代表的新技术的发展改变了这一困境。从以上对近年来采用分子生物学技术研究中药基因转录水平机理的报道来看,大部分中药及其活性成分对选定的相关基因转录水平是有影响的,因此,在研究中药的作用机理时非常有必要考察对相关基因转录的影响。
  保心丸有抗AS的作用,樊氏等[15]用dot blot研究其作用机制,考察内皮素(ET)和NOS在AS家兔主动脉壁的表达,表明保心丸组ET-1mRNA 的表达较模型组低,而NOS mRNA较模型组高,推测保心丸抗AS的作用机制之一可能是通过调节血管内源性NO和ET之间的平衡。王氏等[16]采用原位杂交技术,研究精制血府胶囊对心肌缺血密切相关的基因表达的影响,结果表明,精制血府胶囊组ET-1和内皮素转换酶(ECE)-1的mRNA表达较其它组明显减少,且心肌细胞损伤也较其它组显著减轻。因而,推测精制血府胶囊可能是通过抑制ET-1、ECE-1的基因表达,减少ET-1的生成,从而减轻其对心肌细胞的直接损伤,发挥保护心肌细胞的作用。
  易氏等[22]应用RT-PCR在益髓生血颗粒对β-地中海贫血患者造血刺激因子干细胞因子(SCF)及人红细胞生成素受体(EPOR)mRNA表达的实验结果中显示,治疗后,外周血EPOR、SCF mRNA表达明显增强,因此,推测益髓生血颗粒可能是通过影响SCF以及EPOR mBNA表达来促进骨髓造血,提高血红蛋白、红细胞的水平,达到治疗β-地中海贫血病的目的。周氏等[23]采用含2 048个基因的小鼠基因表达谱芯片检测黄连解毒汤及其成分黄芩苷和盐酸小檗碱对LPS造型的小鼠脾细胞基因表达的影响,结果复方的作用明显优于有效成分的作用,但对具体基因表达影响的分析存在一定难度。
  KIM Su-Jin等[17]用RT-PCR研究Gumiganghwaltang(GMGHT)在小鼠腹膜巨噬细胞中的抗炎机制,实验显示,GMGHT以剂量依赖的方式降低了LPS诱导的TNF-α、IL-6和环氧化酶-2 mRNA表达水平,推测这是GMGHT减少炎症的重要分子机制之一。郑氏等[18]应用RNA酶保护技术进行的补肾、活血复方对老年大鼠T细胞凋亡相关基因Fas、FasL转录影响的实验说明,老年大鼠T细胞的过量凋亡与Fas、FasL基因的高表达相关,而只有补肾复方具有下调T细胞FasL基因转录的作用,活血复方则没显示对两基因有影响,这可能是补肾复方下调老年大鼠T细胞过度凋亡的分子机理之一。
  钟氏等[19]采用RT-PCR化学发光定量法观察了补肾、健脾、活血三类复方分别对下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺(HPAT)轴受抑制模型的下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子(CRT)mRNA表达的影响,结果只有补肾药可通过提高下丘脑CRT mRNA表达来保护HPAT轴免受外源性皮质酮的抑制,活血药对HPAT轴无任何影响,因此,从药物验证的角度确定药物对肾阳虚证的主要调节点在下丘脑。郑氏等[20]通过用RT-PCR考察二仙汤不同时间对肾阳虚大鼠垂体促肾上腺皮质激素(ACTH)基因表达的影响,表明二仙汤可以上调垂体组织ACTH基因表达,且表达量随用药时间延长而增加,提示上调ACTH mRNA表达是二仙汤治疗肾阳虚证的作用机理之一。
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