气候对虎杖大黄素含量的影响分析-齐鲁护理杂志网上投稿
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1 材料
Agilent 1100 series 高效液相色谱仪；色谱柱：Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)；Agilent色谱化学工作站。大黄素对照品(中国药品生物制品检定所提供,供含量测定用,批号756-9203)；虎杖药材采于安徽省委党校植物园,经本实验室鉴定为虎杖Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc.。甲醇为色谱纯；水为重蒸水；其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：Diamonsil-C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)；流动相：甲醇-0.1%磷酸(80∶20)；检测波长：254 nm；流速：1.0 mL/min；柱温：27 ℃；进样量：20 μL。
2.2 对照品溶液的配制
精密称取大黄素对照品1.0 mg,以甲醇溶解并定容至10 mL,摇匀,配成100 μg/mL的溶液。
2.3 供试品溶液的制备[3]
取虎杖茎叶与根适量,分别干燥研细,过60目筛,精密称取约0.1 g,加入三氯甲烷25 mL和2.5 mol/L硫酸溶液20 mL,称定重量,置80 ℃水浴回流2 h,冷却后称重,用三氯甲烷补足失重,摇匀,分取三氯甲烷,精密量取10 mL,水浴蒸干,残渣加甲醇使溶解,定容至10 mL,用0.45 μm微孔滤膜滤过,备用。
2.4 线性关系试验
取100 μg/mL的对照品溶液,用甲醇稀释为100、16.67、8.33、1.67、0.83 μg/mL,按上述色谱条件测定,每个浓度重复3次,进样量为20 μL。以对照品峰面积积分值为纵坐标,以进样浓度为横坐标进行线性回归,得回归方程为：Y＝134 405X＋16.119(R＝0.999 9)。表明大黄素在0.83～100 μg/mL浓度范围内线性关系良好。
2.5 试验
精密吸取同一对照品溶液20 μL,重复进样5次,测定大黄素的峰面积值,RSD＝1.83%,表明仪器精密度良好。将待测样品溶液在室温下贮存,在相同的色谱条件下,每隔2 h进样1次,共5次,测定大黄素的峰面积值,RSD＝0.91%,表明该样品溶液在10 h内基本稳定。取同一代样品5份,每份0.1 g,精密称取,按“2.3”项中的方法处理,测定大黄素的峰面积值,结果大黄素峰面积值RSD＝1.85%。结果表明重复性良好。
虎杖(Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc.)是蓼科蓼属多年生草本植物,在我国有广泛的分布,常见于江苏、浙江、安徽、山东、广东、广西、四川、陕西、云南、贵州等地。传统药用部分为其干燥根和根茎,性味苦寒,具有祛风利湿、祛痰止咳、清热解毒、活血化瘀等功效。其主要化学成分有蒽醌、酚性物质及黄酮类化合物等,其中蒽醌类化合物主要有大黄素、大黄素甲醚、大黄酚等。大黄素有较广泛的生物活性,具有抑菌、抗炎、免疫调节和抗肿瘤等作用[1]。由于大黄素具有显著的药理学功效,故有着广泛的应用。
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Agilent 1100 series 高效液相色谱仪；色谱柱：Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)；Agilent色谱化学工作站。大黄素对照品(中国药品生物制品检定所提供,供含量测定用,批号756-9203)；虎杖药材采于安徽省委党校植物园,经本实验室鉴定为虎杖Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc.。甲醇为色谱纯；水为重蒸水；其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：Diamonsil-C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)；流动相：甲醇-0.1%磷酸(80∶20)；检测波长：254 nm；流速：1.0 mL/min；柱温：27 ℃；进样量：20 μL。
2.2 对照品溶液的配制
精密称取大黄素对照品1.0 mg,以甲醇溶解并定容至10 mL,摇匀,配成100 μg/mL的溶液。
2.3 供试品溶液的制备[3]
取虎杖茎叶与根适量,分别干燥研细,过60目筛,精密称取约0.1 g,加入三氯甲烷25 mL和2.5 mol/L硫酸溶液20 mL,称定重量,置80 ℃水浴回流2 h,冷却后称重,用三氯甲烷补足失重,摇匀,分取三氯甲烷,精密量取10 mL,水浴蒸干,残渣加甲醇使溶解,定容至10 mL,用0.45 μm微孔滤膜滤过,备用。
2.4 线性关系试验
取100 μg/mL的对照品溶液,用甲醇稀释为100、16.67、8.33、1.67、0.83 μg/mL,按上述色谱条件测定,每个浓度重复3次,进样量为20 μL。以对照品峰面积积分值为纵坐标,以进样浓度为横坐标进行线性回归,得回归方程为：Y＝134 405X＋16.119(R＝0.999 9)。表明大黄素在0.83～100 μg/mL浓度范围内线性关系良好。
2.5 试验
精密吸取同一对照品溶液20 μL,重复进样5次,测定大黄素的峰面积值,RSD＝1.83%,表明仪器精密度良好。将待测样品溶液在室温下贮存,在相同的色谱条件下,每隔2 h进样1次,共5次,测定大黄素的峰面积值,RSD＝0.91%,表明该样品溶液在10 h内基本稳定。取同一代样品5份,每份0.1 g,精密称取,按“2.3”项中的方法处理,测定大黄素的峰面积值,结果大黄素峰面积值RSD＝1.85%。结果表明重复性良好。
虎杖(Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc.)是蓼科蓼属多年生草本植物,在我国有广泛的分布,常见于江苏、浙江、安徽、山东、广东、广西、四川、陕西、云南、贵州等地。传统药用部分为其干燥根和根茎,性味苦寒,具有祛风利湿、祛痰止咳、清热解毒、活血化瘀等功效。其主要化学成分有蒽醌、酚性物质及黄酮类化合物等,其中蒽醌类化合物主要有大黄素、大黄素甲醚、大黄酚等。大黄素有较广泛的生物活性,具有抑菌、抗炎、免疫调节和抗肿瘤等作用[1]。由于大黄素具有显著的药理学功效,故有着广泛的应用。
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