朱砂根不同部位中岩白菜素含量的测定-中国全科医生杂志投稿

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　　1 仪器与试药
　　Agilent1200系列高效液相色谱仪(包括四元泵,自动进样器,脱气机,紫外可见检测器,柱温箱)。朱砂根；岩白菜素对照品(批号111532-200202,含量测定用)由中国药品生物制品检定所提供,纯度在98%以上。水为重蒸馏水,甲醇为色谱纯,其余试剂均为分析纯。
　　2 方法
　　2.1 朱砂根的薄层色谱鉴别
　　取本品粉末0.2 g,加甲醇20 mL,超声处理30 min,放冷,滤过,滤液蒸至约1 mL,作为供试品溶液。另取岩白菜素对照品,加甲醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液,作为对照品溶液。按照《中华人民共和国药典》薄层色谱法(附录ⅥB)试验,吸取上述两种溶液各3 μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇(5∶4∶2)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%三氯化铁溶液-1%铁氰化钾溶液(1∶1)的混合溶液。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
　　2.2 含量测定
　　2.2.1 色谱条件
　　Agilent Eclipse XDB-C18柱(4.6 mm×150 mm, 5 μm)；流动相为甲醇-水(25∶75),流速：1.0 mL/min；检测波长：275 nm；柱温：30 ℃。理论塔板数按岩白菜素峰计算应不低于1 500[1]。
　　2.2.2 线性关系考察
　　分别精密吸取岩白菜素对照品溶液(57.1 μg/mL)1、2、3、4、5、10 mL, 置于10 mL的容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,各进样10 μL,连续进样2次,测定峰面积。以对照品进样量(μg)为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程：Y＝1.48×103X＋0.51,r＝0.999 9,在5.71～28.55 μg范围内呈良好的线性关系。
　　2.2.3 精密度试验
　　取岩白菜素对照品溶液,各重复进样6次,测定峰面积,结果岩白菜素峰面积RSD＝0.55%。取同一批样品(6份),按供试品溶液制备方法制备供试品溶液, 测定朱砂根中岩白菜素含量,结果RSD＝0.72%。取同一供试品溶液,分别于配制后0、4、8、12 h依法测定峰面积,结果岩白菜素的RSD＝0.50%,表明样品溶液在12 h内基本稳定。
　　2.2.4 加样回收率试验
　　取已知岩白菜素含量的朱砂根(茎)粉末,取约0.05 g,分别精密称定,平行称取6份,各加入一定量的岩白菜素对照品,制备供试品溶液。在所确定的色谱条件下进行测定,并测定峰面积,计算回收率。平均回收率为99.61%,RSD＝0.87%。从薄层色谱和高效液相色谱中可看出,同一株朱砂根中根、茎、叶中均含岩白菜素成分,而且茎的岩白菜素含量大于根,叶中的岩白菜素含量最低(0.08%),提示朱砂根的茎有良好的药用开发前景,这对于扩大朱砂根的天然资源具有较重要的意义。本试验考察了广西主产的朱砂根,其中桂林产的朱砂根质量最佳,未对其他产区的朱砂根进行研究。
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