紫外分光光度法测定总黄酮含量实验-中国医院管理杂志投稿
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仪器与试药
Lab Alliance-Series Ш型高效液相色谱仪,Model 500型紫外检测器,Alltech Apollo C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)；UV-2600A型紫外分光光度；Sarturius-BS124S分析天平(北京赛多利斯天平有限公司)；KQ·250TB型数控超声波清洗器。试验药材：辽宁宽甸(批号20070715)、辽宁本溪(批号20070710)、辽宁凤城(批号20070722)、辽宁新宾(批号20070718)和吉林通化(批号20070720)产地所有药材均由沈阳药科大学中药学院路金才副教授鉴定为朝鲜淫羊藿(Epimedium Koreanum Nakai)。淫羊藿苷对照品。乙腈,水为娃哈哈纯净水,其余试剂均为分析纯。
紫外分光光度法测定总黄酮含量
3.1 供试品溶液制备
精密量取淫羊藿苷测定项下的供试品溶液0.5 mL,置50 mL容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,作为供试品溶液。
3.2 对照品溶液制备
精密称取淫羊藿苷对照品适量,加甲醇制成每1 mL含10 μg的溶液,即得。
3.3 测定方法
以甲醇作为空白溶液,在270 nm波长处分别测定供试品溶液与对照品溶液的吸光度,计算,即得。
3.4 方法学考察
3.4.1 精密度试验
精密称取批号为20070715样品,样品处理方法同“2.2”、“3.1”项,结果RSD＝0.24%,表明仪器精密度符合要求。精密称取批号为20070715样品,按上述测定方法测定,分别在制备样品后的0、10、30、40、50、60 min测定吸光度,结果RSD＝0.57%,表明供试品溶液在1 h内稳定。精密称取批号为20070715样品6份,每份0.2 g,精密称定,按“2.2”、“3.1”项下方法制备供试品溶液,测定其吸光度,结果RSD＝1.36%,表明方法的重复性良好。
3.4.2 回收率试验
精密称取批号为20070715样品6份,各约0.1 g,分别精密加入淫羊藿苷对照品溶液(1 mg/mL)8 mL于量瓶中,按“2.2”、“3.1”项下方法制备样品溶液,按“3.3”项下方法测定,计算平均回收率为100.38%,RSD＝1.60%(n＝6),结果见表2。结果表明,不同产地朝鲜淫羊藿不同部位的总黄酮和淫羊藿苷含量差异较大,叶中总黄酮和淫羊藿苷远高于茎,但总黄酮含量高的地区淫羊藿苷的含量并不一定高；叶中含量高的茎中并不一定高。其中,叶中总黄酮含量最高的是宽甸地区,而茎中总黄酮含量最高的是新宾地区；叶中淫羊藿苷含量最高的是宽甸地区,而茎中淫羊藿苷含量最高的是凤城和新宾地区。由于朝鲜淫羊藿的最佳有效部位是叶,因此,辽宁省内朝鲜淫羊藿最佳产地是宽甸地区。
全科护理投稿 http://www.qikanba.com/
仪器与试药
Lab Alliance-Series Ш型高效液相色谱仪,Model 500型紫外检测器,Alltech Apollo C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)；UV-2600A型紫外分光光度；Sarturius-BS124S分析天平(北京赛多利斯天平有限公司)；KQ·250TB型数控超声波清洗器。试验药材：辽宁宽甸(批号20070715)、辽宁本溪(批号20070710)、辽宁凤城(批号20070722)、辽宁新宾(批号20070718)和吉林通化(批号20070720)产地所有药材均由沈阳药科大学中药学院路金才副教授鉴定为朝鲜淫羊藿(Epimedium Koreanum Nakai)。淫羊藿苷对照品。乙腈,水为娃哈哈纯净水,其余试剂均为分析纯。
紫外分光光度法测定总黄酮含量
3.1 供试品溶液制备
精密量取淫羊藿苷测定项下的供试品溶液0.5 mL,置50 mL容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,作为供试品溶液。
3.2 对照品溶液制备
精密称取淫羊藿苷对照品适量,加甲醇制成每1 mL含10 μg的溶液,即得。
3.3 测定方法
以甲醇作为空白溶液,在270 nm波长处分别测定供试品溶液与对照品溶液的吸光度,计算,即得。
3.4 方法学考察
3.4.1 精密度试验
精密称取批号为20070715样品,样品处理方法同“2.2”、“3.1”项,结果RSD＝0.24%,表明仪器精密度符合要求。精密称取批号为20070715样品,按上述测定方法测定,分别在制备样品后的0、10、30、40、50、60 min测定吸光度,结果RSD＝0.57%,表明供试品溶液在1 h内稳定。精密称取批号为20070715样品6份,每份0.2 g,精密称定,按“2.2”、“3.1”项下方法制备供试品溶液,测定其吸光度,结果RSD＝1.36%,表明方法的重复性良好。
3.4.2 回收率试验
精密称取批号为20070715样品6份,各约0.1 g,分别精密加入淫羊藿苷对照品溶液(1 mg/mL)8 mL于量瓶中,按“2.2”、“3.1”项下方法制备样品溶液,按“3.3”项下方法测定,计算平均回收率为100.38%,RSD＝1.60%(n＝6),结果见表2。结果表明,不同产地朝鲜淫羊藿不同部位的总黄酮和淫羊藿苷含量差异较大,叶中总黄酮和淫羊藿苷远高于茎,但总黄酮含量高的地区淫羊藿苷的含量并不一定高；叶中含量高的茎中并不一定高。其中,叶中总黄酮含量最高的是宽甸地区,而茎中总黄酮含量最高的是新宾地区；叶中淫羊藿苷含量最高的是宽甸地区,而茎中淫羊藿苷含量最高的是凤城和新宾地区。由于朝鲜淫羊藿的最佳有效部位是叶,因此,辽宁省内朝鲜淫羊藿最佳产地是宽甸地区。
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