中药天仙子中药性成分含量的测定实验分析-外科护士论文
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2.1 仪器与试剂
毛细管电泳电化学发光综合分析仪（西安瑞迈电子科技有限公司）。ECL检测采用三电极系统：直径500 μm Pt盘工作电极、Ag/AgCl饱和参比电极、Pt丝对极。石英毛细管（52 cm×25 μm i.d.，河北永年光学纤维厂）。三联吡啶钌六水合氯化物（美国Aldrich公司）。硫酸阿托品和氢溴酸东莨菪碱（美国Sigma公司）。磷酸盐、NaOH、氯仿和石油醚均为分析纯。二次蒸馏水采用Mili Q超高纯净水体系（美国Milipore公司）制备，所有溶液均用二次蒸馏水配制。中药天仙子购于长春市药材公司。
2.2 实验方法
毛细管用0.1 mol/L NaOH充满并浸泡过夜。电泳分离之前，分别用0.1 mol/L NaOH、二次蒸馏水、缓冲液冲洗毛细管各10 min。ECL检测池中添加5 mmol/L 三联吡啶钌、50 mmol/L磷酸盐缓冲液（pH 7.48），检测池中溶液3 h后更换一次，以保持实验重现性。本实验采用柱端ECL检测模式，借助光学显微镜准直工作电极与毛细管出口端，并固定二者距离为150 μm。综合考虑进样量对检测灵敏度和分离度双重影响，本实验电动进样条件为12 kV×9 s。分离缓冲溶液pH 8.48，检测电位1.2 V，光电倍增管偏置电压800 V。
2.3 中药生物碱的提取
取约0.5 g碾成粉末状的天仙子准确称重，加入5 mL石油醚超声20 min，弃掉石油醚层。加入4 mL氯仿超声20 min，萃取过程重复2次。提取液合并后挥干，提取物用二次蒸馏水溶解，经0.45 μm醋酸纤维膜过滤，滤液储存于4 ℃冰箱中备用。
3 结果与讨论
3.3 线性范围、精密度和检出限
在最优条件下， 阿托品和东莨菪碱分别在0.29～5.8 mg/L和3.0～303 mg/L范围内，浓度与峰高呈良好线性关系。连续进样6次测峰高与迁移时间的RSD，阿托品为6.1%和0.68%，东莨菪碱为5.8%和1.6%。阿托品和东莨菪碱的检出限分为0.014和0.03 mg/L（S/N=3）。在最佳分析条件下，天仙子提取液适当稀释进样，获得生物碱含量为：阿托品0.035%，东莨菪碱0.051%。阿托品和东莨菪碱的回收率分别为96.21%和97.04%。
天仙子是一种天然中草药，它的主要活性成分为阿托品和东莨菪碱 。目前，分析天仙子的方法主要有：核磁共振技术、紫外分光光度法、高效液相色谱法和毛细管电泳分离法等。毛细管电泳技术（CE）具有进样体积小、分离效率高等优势。吡啶钌（Ru（bpy）2+3）电化学发光法具有激发态寿命长、发光效率高、试剂可循环再生等优点。 CE与Ru（bpy）2+3电化学发光联用技术（CE ECL）将二者优势有机组合，已成为分析化学领域中很好的分析工具。阿托品和东莨菪碱具有叔氨结构，可以增强吡啶钌电化学发光，本研究采用CE ECL分析技术分析了中药天仙子中的阿托品和东莨菪碱。
产科医学论文 http://www.qikanba.com/
2.1 仪器与试剂
毛细管电泳电化学发光综合分析仪（西安瑞迈电子科技有限公司）。ECL检测采用三电极系统：直径500 μm Pt盘工作电极、Ag/AgCl饱和参比电极、Pt丝对极。石英毛细管（52 cm×25 μm i.d.，河北永年光学纤维厂）。三联吡啶钌六水合氯化物（美国Aldrich公司）。硫酸阿托品和氢溴酸东莨菪碱（美国Sigma公司）。磷酸盐、NaOH、氯仿和石油醚均为分析纯。二次蒸馏水采用Mili Q超高纯净水体系（美国Milipore公司）制备，所有溶液均用二次蒸馏水配制。中药天仙子购于长春市药材公司。
2.2 实验方法
毛细管用0.1 mol/L NaOH充满并浸泡过夜。电泳分离之前，分别用0.1 mol/L NaOH、二次蒸馏水、缓冲液冲洗毛细管各10 min。ECL检测池中添加5 mmol/L 三联吡啶钌、50 mmol/L磷酸盐缓冲液（pH 7.48），检测池中溶液3 h后更换一次，以保持实验重现性。本实验采用柱端ECL检测模式，借助光学显微镜准直工作电极与毛细管出口端，并固定二者距离为150 μm。综合考虑进样量对检测灵敏度和分离度双重影响，本实验电动进样条件为12 kV×9 s。分离缓冲溶液pH 8.48，检测电位1.2 V，光电倍增管偏置电压800 V。
2.3 中药生物碱的提取
取约0.5 g碾成粉末状的天仙子准确称重，加入5 mL石油醚超声20 min，弃掉石油醚层。加入4 mL氯仿超声20 min，萃取过程重复2次。提取液合并后挥干，提取物用二次蒸馏水溶解，经0.45 μm醋酸纤维膜过滤，滤液储存于4 ℃冰箱中备用。
3 结果与讨论
3.3 线性范围、精密度和检出限
在最优条件下， 阿托品和东莨菪碱分别在0.29～5.8 mg/L和3.0～303 mg/L范围内，浓度与峰高呈良好线性关系。连续进样6次测峰高与迁移时间的RSD，阿托品为6.1%和0.68%，东莨菪碱为5.8%和1.6%。阿托品和东莨菪碱的检出限分为0.014和0.03 mg/L（S/N=3）。在最佳分析条件下，天仙子提取液适当稀释进样，获得生物碱含量为：阿托品0.035%，东莨菪碱0.051%。阿托品和东莨菪碱的回收率分别为96.21%和97.04%。
天仙子是一种天然中草药，它的主要活性成分为阿托品和东莨菪碱 。目前，分析天仙子的方法主要有：核磁共振技术、紫外分光光度法、高效液相色谱法和毛细管电泳分离法等。毛细管电泳技术（CE）具有进样体积小、分离效率高等优势。吡啶钌（Ru（bpy）2+3）电化学发光法具有激发态寿命长、发光效率高、试剂可循环再生等优点。 CE与Ru（bpy）2+3电化学发光联用技术（CE ECL）将二者优势有机组合，已成为分析化学领域中很好的分析工具。阿托品和东莨菪碱具有叔氨结构，可以增强吡啶钌电化学发光，本研究采用CE ECL分析技术分析了中药天仙子中的阿托品和东莨菪碱。
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