免疫胶体金标记技术在环境保护方面的作用分析-康复医学论文
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由于免疫胶体金标记技术不断地发展改进及其各种技术优势，已不仅仅局限应用在单一领域。近年来在环境学科中的报道逐渐增多，主要体现在两方面：一是利用免疫胶体金标记技术结合电镜等检测技术，通过观察所测物质的微观结构形态、空间位点变化来揭示其作用机理或者检测宏观性能指标；二是利用免疫层析技术制备免疫胶体金试纸条或试剂盒，现场快速检测进行定性、定量分析。
农药残留超标不仅污染农产品和生态环境，还将危及人体健康和生命安全。仪器分析农药残留样品前处理时间较长，并不适于现场检测。利用胶体金制备的免疫层析试纸条或试剂盒以其快速、简便、灵敏的特点已被逐渐应用于农药残留检测。甲胺磷是一种高效有机磷农药和杀虫剂，微量残留也会给环境造成危害，Shi等[29]制备的甲胺磷免疫层析金标试纸条对甲胺磷有高度的检测特异性，可检测到1.0 μg/mL的甲胺磷。羿国香等[30]利用小分子 蛋白复合物及非均等竞争原理制备氯嘧磺隆胶体金免疫检测试纸条，用于土壤中氯嘧磺隆除草剂残留的现场快速检测，检出限可达100 μg/L，有助于避免其残留毒性使下茬敏感作物受害。Wang等[31]将杀虫剂西维因半抗原偶联在KLH上作为免疫原，制备直流式及侧流式两种免疫金标检测试纸条，在5 min内检出限分别可达50及100 μg/L。Guo等[32]利用同时针对呋喃丹和三唑磷两种物质的双特异性抗体，另外结合分别针对二者的单克隆抗体，制备了两种类型的免疫金标试纸条来同时检测这两种农药残留物。结果显示， 两种试纸条均有效，但第二种抗体制备的试纸条更为敏感，在水样中对二者的检出限分别可达32及4 μg/L。Kaur等[33]以牛血清蛋白为载体蛋白，经其赖氨酸残基联结除草剂阿特拉津半抗原，并经其半胱氨酸残基联结胶体金颗粒，利用这种半抗原 蛋白 金颗粒复合物构造侧流式免疫检测试纸条可在5 min内检测水样中1.0 μg/L级阿特拉津含量。
木质素是农作物秸杆及城市生活垃圾中一种常见的、难降解的物质，处理不当会造成极大的资源浪费和环境污染。因此，木质素的研究逐渐引起人们的关注[40]。He等[41]利用紫外光显微镜、透射电镜结合免疫胶体金标记，检测了杜仲次生木质部分化过程中木质素等组分在细胞壁分布的动态变化，结果显示随着细胞次生壁的形成与木质化，木质素的分布逐渐扩展，其沉积出现不均匀的块状或片状沉积模式。Joseleau等[42]生物合成纯化的紫丁香基脱氢多聚体以制备紫丁香基木质素多克隆抗体，并利用免疫胶体金标记技术对植物细胞中紫丁香基木质素进行定位检测，发现其在S1层中分布较少，而在次生细胞壁形成后期分布较多。该小组还分别标记木质素抗体和紫丁香基木质素抗体来检测应拉木中木质素含量和结构组成的关系，认为应拉木凝胶层中木质素含量较少，但紫丁香基木质素结构含量较高[43]。研究表明，白腐真菌是降解木质素一类芳香化合物能力最强的微生物[44]。白腐真菌通过自身分泌的酶液的共同作用可迅速、有效地降解木质素[45]。因此木质素降解酶成为研究热点，期望由此可了解微生物降解木质素的机制。
水体环境质量对人类生活有直接影响，操作简便、检测快速、灵敏度高及选择性好的水质检测方法能极大提高检测效率。免疫胶体金标记技术便被逐渐应用在水质检测及有关污染物分析研究中。第吲哚美辛是一种非甾体抗炎药，长期将未代谢完的非甾体抗炎药排入水体，将会对水生生物造成危害[34]。Li等[35]制备的快速免疫层析金标试纸条，在10 min内检测水样中吲哚美辛的检出限达0.1 ng/mL，且在室温下可存放8星期，适应于现场快速检测。小球隐孢子虫、贾第鞭毛虫会引起人类肠胃疾病，是水质检测的指标。Rule等[36]结合表面增强共振拉曼散射（SERRS）与免疫胶体金标记技术检测这两种病原体，证明了两种技术的结合进行高灵敏度、多种物质同时检测的可行性。短裸甲藻毒素是一种与赤潮有关的神经毒素。Zhou等[37]利用胶体金标记的单克隆短裸甲藻毒素抗体制备了快速免疫层析试纸条，在10 min的现场检测时间内检出限为20 μg/L。检测样中短裸甲藻毒素浓度在10～4000 μg/L的范围内，试纸条检测区的颜色强度与短裸甲藻毒素浓度呈正相关。微囊藻毒素是由蓝藻产生的一种七肽单环肝毒素，它通过食物链传递严重威胁人类健康。
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由于免疫胶体金标记技术不断地发展改进及其各种技术优势，已不仅仅局限应用在单一领域。近年来在环境学科中的报道逐渐增多，主要体现在两方面：一是利用免疫胶体金标记技术结合电镜等检测技术，通过观察所测物质的微观结构形态、空间位点变化来揭示其作用机理或者检测宏观性能指标；二是利用免疫层析技术制备免疫胶体金试纸条或试剂盒，现场快速检测进行定性、定量分析。
农药残留超标不仅污染农产品和生态环境，还将危及人体健康和生命安全。仪器分析农药残留样品前处理时间较长，并不适于现场检测。利用胶体金制备的免疫层析试纸条或试剂盒以其快速、简便、灵敏的特点已被逐渐应用于农药残留检测。甲胺磷是一种高效有机磷农药和杀虫剂，微量残留也会给环境造成危害，Shi等[29]制备的甲胺磷免疫层析金标试纸条对甲胺磷有高度的检测特异性，可检测到1.0 μg/mL的甲胺磷。羿国香等[30]利用小分子 蛋白复合物及非均等竞争原理制备氯嘧磺隆胶体金免疫检测试纸条，用于土壤中氯嘧磺隆除草剂残留的现场快速检测，检出限可达100 μg/L，有助于避免其残留毒性使下茬敏感作物受害。Wang等[31]将杀虫剂西维因半抗原偶联在KLH上作为免疫原，制备直流式及侧流式两种免疫金标检测试纸条，在5 min内检出限分别可达50及100 μg/L。Guo等[32]利用同时针对呋喃丹和三唑磷两种物质的双特异性抗体，另外结合分别针对二者的单克隆抗体，制备了两种类型的免疫金标试纸条来同时检测这两种农药残留物。结果显示， 两种试纸条均有效，但第二种抗体制备的试纸条更为敏感，在水样中对二者的检出限分别可达32及4 μg/L。Kaur等[33]以牛血清蛋白为载体蛋白，经其赖氨酸残基联结除草剂阿特拉津半抗原，并经其半胱氨酸残基联结胶体金颗粒，利用这种半抗原 蛋白 金颗粒复合物构造侧流式免疫检测试纸条可在5 min内检测水样中1.0 μg/L级阿特拉津含量。
木质素是农作物秸杆及城市生活垃圾中一种常见的、难降解的物质，处理不当会造成极大的资源浪费和环境污染。因此，木质素的研究逐渐引起人们的关注[40]。He等[41]利用紫外光显微镜、透射电镜结合免疫胶体金标记，检测了杜仲次生木质部分化过程中木质素等组分在细胞壁分布的动态变化，结果显示随着细胞次生壁的形成与木质化，木质素的分布逐渐扩展，其沉积出现不均匀的块状或片状沉积模式。Joseleau等[42]生物合成纯化的紫丁香基脱氢多聚体以制备紫丁香基木质素多克隆抗体，并利用免疫胶体金标记技术对植物细胞中紫丁香基木质素进行定位检测，发现其在S1层中分布较少，而在次生细胞壁形成后期分布较多。该小组还分别标记木质素抗体和紫丁香基木质素抗体来检测应拉木中木质素含量和结构组成的关系，认为应拉木凝胶层中木质素含量较少，但紫丁香基木质素结构含量较高[43]。研究表明，白腐真菌是降解木质素一类芳香化合物能力最强的微生物[44]。白腐真菌通过自身分泌的酶液的共同作用可迅速、有效地降解木质素[45]。因此木质素降解酶成为研究热点，期望由此可了解微生物降解木质素的机制。
水体环境质量对人类生活有直接影响，操作简便、检测快速、灵敏度高及选择性好的水质检测方法能极大提高检测效率。免疫胶体金标记技术便被逐渐应用在水质检测及有关污染物分析研究中。第吲哚美辛是一种非甾体抗炎药，长期将未代谢完的非甾体抗炎药排入水体，将会对水生生物造成危害[34]。Li等[35]制备的快速免疫层析金标试纸条，在10 min内检测水样中吲哚美辛的检出限达0.1 ng/mL，且在室温下可存放8星期，适应于现场快速检测。小球隐孢子虫、贾第鞭毛虫会引起人类肠胃疾病，是水质检测的指标。Rule等[36]结合表面增强共振拉曼散射（SERRS）与免疫胶体金标记技术检测这两种病原体，证明了两种技术的结合进行高灵敏度、多种物质同时检测的可行性。短裸甲藻毒素是一种与赤潮有关的神经毒素。Zhou等[37]利用胶体金标记的单克隆短裸甲藻毒素抗体制备了快速免疫层析试纸条，在10 min的现场检测时间内检出限为20 μg/L。检测样中短裸甲藻毒素浓度在10～4000 μg/L的范围内，试纸条检测区的颜色强度与短裸甲藻毒素浓度呈正相关。微囊藻毒素是由蓝藻产生的一种七肽单环肝毒素，它通过食物链传递严重威胁人类健康。
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