海带中的褐藻糖胶药活性研究-妇科护理论文
妇科护理论文 代写护理论文 中医妇科论文 医学护理论文
1仪器与试剂
1.1仪器
HH-6恒温水浴锅（江苏金坛市宏华仪器厂）；RE-52CS旋转蒸发器（巩义市英峪予华仪器厂）；予华牌循环水真空泵（河南省巩义市英峪予华仪器厂）；UV1101紫外-可见分光光度仪（上海天美科学仪器有限公司）；AY120电子分析天平（日本岛津公司）；KH-400KDB型高功率数控超声清洗器（昆山禾创超声仪器有限公司，频率40 kHz，功率400 W）；摇摆式高速中药粉碎机（大德中药机械有限公司）。
1.2试剂
海带购自广州市清平市场，经中科院南海海洋研究所钟红茂研究员鉴定为海带目海带科的一种大型褐藻Laminaria japonica Aresch，晒干后粉碎至40目备用。葡萄糖对照品（分析纯，纯度≥99%,广州汕头市西陇化工厂）。实验用试剂均为分析纯。
2方法
2.2标准曲线的制备
分别精密吸取上述葡萄糖对照品溶液1.0、2 0、3.0、4.0、5.0、6.0、8.0、10.0、12.0 mL至50 mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。分别精密吸取2.0 mL于试管中，于冰水浴条件下缓慢加入5%（质量分数）苯酚溶液1.0 mL，摇匀，迅速加入浓硫酸溶液5.0 mL，振摇5 min，沸水浴15 min，然后置冷水浴中冷却20 min。取1.0 mL蒸馏水，加等量苯酚和浓硫酸，同法操作，作为空白溶液，在 490 nm处测量其吸光度值。以葡萄糖的质量浓度（ρ）为横坐标，溶液的吸光度值（A）为纵坐标，绘制标准曲线。经回归分析，得标准曲线方程：A=26.894ρ+0.030 2，r=0.999 7葡萄糖的质量浓度在0.002 5～0.030 0 mg·mL-1范围内与吸收值线性关系良好。
2.5单因素试验
2.5.1超声提取温度的影响
称取含海带粉末5 0 g、固液比为1∶20的样品溶液，分别在30、40、50、60 ℃的水浴，以320 W的功率超声30 min，其他步骤同“2.3”。随着温度的升高，褐藻糖胶的提取量迅速增大，当温度升高到50 ℃时，提取量的增大速度减慢，直至趋于平衡。故褐藻糖胶的提取应控制在一定的温度范围内。
2.5.2超声功率的影响称取含海带粉末5.0 g、固液比为1∶20的样品溶液，于40 ℃的水浴中，以200、240、280、320、360、400 W功率分别超声30 min，其他步骤同“2.3”。在超声功率为200~320 W范围内，褐藻糖胶的提取量随超声功率的提高而增大，在功率为320 W时，提取量达到峰值。
2.5.3超声提取时间的影响称取含海带粉末5 0 g、固液比为1∶20的样品溶液，在40 ℃的水浴中，以320 W的功率分别超声10、20、30、40、50、60 min，其他步骤同“2.3”。在提取时间为30 min时，提取量达到最大值32 mg·g-1。此后随着时间的延长，提取量反而减小。
2.5.4固液比的影响称取含海带粉末5.0 g、固液比分别为1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30、1∶35、1∶40的样品溶液，在40 ℃的水浴中，以320 W的功率超声30 min， 其他步骤同“2.3”。 在固液比为 1∶20~1∶30的范围内，提取量迅速增大，曲线的斜率明显增大。但在1∶30~1∶40的范围内，褐藻糖胶提取量的增大趋于平缓。
2.6正交试验
以超声提取时间、超声功率、固液比和超声提取温度为因素，设计了四因素三水平正交试验，因素水平表见表1。正交试验中每个试验的海带粉末质量均为5.0 g。称取海带粉末5.0 g，精密称定。以优选出来的最佳提取工艺重复实验3次，测定褐藻糖胶的提取量。
3结果与分析
海带中的褐藻糖胶具有广泛的生理活性[2-3]，如抗病毒、调节免疫系统、抗辐射、抗凝血、抗氧化、抗肿瘤、降血糖、降血脂等。很多学者对海带多糖的提取方法进行了研究探讨，传统方法主要为酸提取法、碱提取法、酶提取法等[4]，均存在一定的缺陷。如酸提取法可造成多糖水解；碱提取法造成多糖生物活性降低；酶提取法耗时较长，且工业生产需要使用的酶量大、成本高；热水提取醇沉的方法较简便，但是耗时耗能。可见传统的提取工艺能耗大、时间长，且易破坏海带中的有效成分，故距实际生产应用还有很大距离。
本试验对超声法、水提法、酸提法所得褐藻糖胶提取量进行了对比。结果显示，超声提取2次，每次30 min所得的海带褐藻糖胶提取量与100 ℃热水提取5 h相当，可大大缩短提取时间。且经热水提取离心所得的提取液呈深棕色，明显比超声提取的提取液颜色深，提示利用超声波作为海洋生物多糖提取手段能有效减少色素的析出，在实际应用中可简化除色素等预处理步骤。通过对超声提取与常规提取方法的对比可知，超声提取具有时间短、能耗低等优势，且提取工作在低温下进行，可避免高温对提取成分的破坏，同时可以减少提取过程中色素的析出。故超声提取技术是一种良好的多糖提取新工艺，具有很好的发展前景。
医学影像超声论文 http://www.qikanba.com/
1仪器与试剂
1.1仪器
HH-6恒温水浴锅（江苏金坛市宏华仪器厂）；RE-52CS旋转蒸发器（巩义市英峪予华仪器厂）；予华牌循环水真空泵（河南省巩义市英峪予华仪器厂）；UV1101紫外-可见分光光度仪（上海天美科学仪器有限公司）；AY120电子分析天平（日本岛津公司）；KH-400KDB型高功率数控超声清洗器（昆山禾创超声仪器有限公司，频率40 kHz，功率400 W）；摇摆式高速中药粉碎机（大德中药机械有限公司）。
1.2试剂
海带购自广州市清平市场，经中科院南海海洋研究所钟红茂研究员鉴定为海带目海带科的一种大型褐藻Laminaria japonica Aresch，晒干后粉碎至40目备用。葡萄糖对照品（分析纯，纯度≥99%,广州汕头市西陇化工厂）。实验用试剂均为分析纯。
2方法
2.2标准曲线的制备
分别精密吸取上述葡萄糖对照品溶液1.0、2 0、3.0、4.0、5.0、6.0、8.0、10.0、12.0 mL至50 mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。分别精密吸取2.0 mL于试管中，于冰水浴条件下缓慢加入5%（质量分数）苯酚溶液1.0 mL，摇匀，迅速加入浓硫酸溶液5.0 mL，振摇5 min，沸水浴15 min，然后置冷水浴中冷却20 min。取1.0 mL蒸馏水，加等量苯酚和浓硫酸，同法操作，作为空白溶液，在 490 nm处测量其吸光度值。以葡萄糖的质量浓度（ρ）为横坐标，溶液的吸光度值（A）为纵坐标，绘制标准曲线。经回归分析，得标准曲线方程：A=26.894ρ+0.030 2，r=0.999 7葡萄糖的质量浓度在0.002 5～0.030 0 mg·mL-1范围内与吸收值线性关系良好。
2.5单因素试验
2.5.1超声提取温度的影响
称取含海带粉末5 0 g、固液比为1∶20的样品溶液，分别在30、40、50、60 ℃的水浴，以320 W的功率超声30 min，其他步骤同“2.3”。随着温度的升高，褐藻糖胶的提取量迅速增大，当温度升高到50 ℃时，提取量的增大速度减慢，直至趋于平衡。故褐藻糖胶的提取应控制在一定的温度范围内。
2.5.2超声功率的影响称取含海带粉末5.0 g、固液比为1∶20的样品溶液，于40 ℃的水浴中，以200、240、280、320、360、400 W功率分别超声30 min，其他步骤同“2.3”。在超声功率为200~320 W范围内，褐藻糖胶的提取量随超声功率的提高而增大，在功率为320 W时，提取量达到峰值。
2.5.3超声提取时间的影响称取含海带粉末5 0 g、固液比为1∶20的样品溶液，在40 ℃的水浴中，以320 W的功率分别超声10、20、30、40、50、60 min，其他步骤同“2.3”。在提取时间为30 min时，提取量达到最大值32 mg·g-1。此后随着时间的延长，提取量反而减小。
2.5.4固液比的影响称取含海带粉末5.0 g、固液比分别为1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30、1∶35、1∶40的样品溶液，在40 ℃的水浴中，以320 W的功率超声30 min， 其他步骤同“2.3”。 在固液比为 1∶20~1∶30的范围内，提取量迅速增大，曲线的斜率明显增大。但在1∶30~1∶40的范围内，褐藻糖胶提取量的增大趋于平缓。
2.6正交试验
以超声提取时间、超声功率、固液比和超声提取温度为因素，设计了四因素三水平正交试验，因素水平表见表1。正交试验中每个试验的海带粉末质量均为5.0 g。称取海带粉末5.0 g，精密称定。以优选出来的最佳提取工艺重复实验3次，测定褐藻糖胶的提取量。
3结果与分析
海带中的褐藻糖胶具有广泛的生理活性[2-3]，如抗病毒、调节免疫系统、抗辐射、抗凝血、抗氧化、抗肿瘤、降血糖、降血脂等。很多学者对海带多糖的提取方法进行了研究探讨，传统方法主要为酸提取法、碱提取法、酶提取法等[4]，均存在一定的缺陷。如酸提取法可造成多糖水解；碱提取法造成多糖生物活性降低；酶提取法耗时较长，且工业生产需要使用的酶量大、成本高；热水提取醇沉的方法较简便，但是耗时耗能。可见传统的提取工艺能耗大、时间长，且易破坏海带中的有效成分，故距实际生产应用还有很大距离。
本试验对超声法、水提法、酸提法所得褐藻糖胶提取量进行了对比。结果显示，超声提取2次，每次30 min所得的海带褐藻糖胶提取量与100 ℃热水提取5 h相当，可大大缩短提取时间。且经热水提取离心所得的提取液呈深棕色，明显比超声提取的提取液颜色深，提示利用超声波作为海洋生物多糖提取手段能有效减少色素的析出，在实际应用中可简化除色素等预处理步骤。通过对超声提取与常规提取方法的对比可知，超声提取具有时间短、能耗低等优势，且提取工作在低温下进行，可避免高温对提取成分的破坏，同时可以减少提取过程中色素的析出。故超声提取技术是一种良好的多糖提取新工艺，具有很好的发展前景。
医学影像超声论文 http://www.qikanba.com/
我要分享到：
最新文章NEWS
- • 高职生道德信仰调查 本文版权由期刊吧所有
- • 医学论文中的统计问题
- • 医学论文投稿秘籍
- • 医学论文写作的程序介绍
- • 医学论文摘要的书写过程中存在的问题
- • 叙述医学研究论文标引用词的选择
- • 医学论文写作五大妙招
- • 如何进行儿科临床科学研究选题
- • 医学论文写作的流程
- • 医学论文统计设计方面存在问题总结
推荐期刊Tui Jian
Chinese Journal of Integrative Medicine
Journal of Genetics and Genomics
Journal of Bionic Engineering
Pedosphere
Chinese Journal of Structural Chemistry