金线莲抗菌药性作用的分析-动物医学专业导论论文
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金线莲生长于山地林下阴湿地，在我国分布于浙江、福建、台湾、江西、西藏等省区，俗称“金草”、“神药”、“药王”、“乌人参”等[1]。其化学成分除发现氨基酸、微量元素及糖类的含量较高外，还有黄酮类、甾体、三萜类等化合物分离鉴定的报道[2-4]。
1材料与方法
1.1试验菌株
金葡菌ATCC25923、肺炎链球菌ATCC49619、大肠杆菌ATCC25922，由华中科技大学同济医学院微生物教研室提供；金葡菌8195（对红霉素耐药）、肺炎链球菌8220（对红霉素耐药）、流感杆菌8227，由同济医院检验科微生物室提供。
1.2液体培养基
血液增菌培养基170 g加无菌蒸馏水5 000 mL溶解，高压灭菌25 min，4 ℃冷藏保存备用；固体培养基：血液增菌培养基10 g，琼脂粉9 g，加无菌蒸馏水300 mL溶解，高压灭菌25 min备用。供试化合物Ⅰ和Ⅱ，由金线莲药材正丁醇部位分离得到，纯度经鉴定在98%以上。金线莲药材由福建省漳州市南靖县和溪镇供销社提供，由中国科学院武汉植物研究所王映明教授鉴定。受试化合物溶于双蒸水，阳性对照药红霉素（EMA）、阿奇霉素（AZA）溶于DMSO中，配成1 280 μg/mL无菌溶液，分装至无菌小管中，保存备用。
1.3方法
取无菌小试管13支排于试管架，于第1管加入液体培养基1.8 mL，2～12管各加1 mL。将0 2 mL的药物原液加入第1管中，混合后吸出1 mL加入第2管中，用同法依次2倍稀释第2管、第3管……至第12管，从第12管吸1 mL加入到第13管，第13管为样本对照，则各管的浓度依次为128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125、0.06 μg/mL。将1~12管中加入已校正浓度的菌液0 05 mL（105 cfu/mL），混匀，13管不加菌液。取3只试管只加入肉汤1.0 mL，做为空白对照；取3只试管加入肉汤1.0 mL和菌液0.05 mL，做为菌液对照。混匀后试管加硅胶塞塞好，放置37 ℃培养18 h，观察结果，以无细菌生长的最低浓度为最低抑菌浓度（MIC）。同法操作受试化合物，阳性对照EMA、AZA。
2结果
在所测试的2个丁酸衍生物葡萄糖苷中，kinsenoside为含有一个手性中心的丁内酯的吡喃葡萄糖苷，药理活性显着，它的独特结构已经引起国内外研究者的广泛关注[6-9]。本研究将化学与药理方面有机结合，在对该化合物进行降血糖[6]、抗癌、抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B（PTP1B）等活性测试的同时，也测试了金线莲中富含的主要成分kinsenoside[8]体外抑菌的药理活性，为全面评价活性化合物kinsenoside的药理活性提供了科学依据，也为该化合物及药材的药用价值开发奠定了基础。
本课题组通过对野生金线莲的化学成分研究，鉴定了2个丁酸衍生物葡萄糖苷β-D- glucopyranosyl-（3R）-hydroxybutanolide（Ⅰ，kinsenoside），methyl 4-β-D- glucopyranosyl-butanoate （Ⅱ）[5]，其中Ⅰ为首次从该种植物中分离得到，在药材中含量很高；Ⅱ为首次分离得到的天然产物。化合物Ⅰ和Ⅱ都是丁酸衍生物的葡萄糖苷（butanoic acid glucosides），其中Ⅰ的结构中的丁酸以内酯环的形式存在。Kinsenoside作为开春兰属多种植物含有的主要成分，其降血糖[6]、保肝护肝[7]、降血脂[8] 等活性已多有研究，关于抗菌活性的研究国内外尚未见文献报道，本研究对此进行了初步的探讨。
湖南农大动物医学论文 http://www.qikanba.com/
金线莲生长于山地林下阴湿地，在我国分布于浙江、福建、台湾、江西、西藏等省区，俗称“金草”、“神药”、“药王”、“乌人参”等[1]。其化学成分除发现氨基酸、微量元素及糖类的含量较高外，还有黄酮类、甾体、三萜类等化合物分离鉴定的报道[2-4]。
1材料与方法
1.1试验菌株
金葡菌ATCC25923、肺炎链球菌ATCC49619、大肠杆菌ATCC25922，由华中科技大学同济医学院微生物教研室提供；金葡菌8195（对红霉素耐药）、肺炎链球菌8220（对红霉素耐药）、流感杆菌8227，由同济医院检验科微生物室提供。
1.2液体培养基
血液增菌培养基170 g加无菌蒸馏水5 000 mL溶解，高压灭菌25 min，4 ℃冷藏保存备用；固体培养基：血液增菌培养基10 g，琼脂粉9 g，加无菌蒸馏水300 mL溶解，高压灭菌25 min备用。供试化合物Ⅰ和Ⅱ，由金线莲药材正丁醇部位分离得到，纯度经鉴定在98%以上。金线莲药材由福建省漳州市南靖县和溪镇供销社提供，由中国科学院武汉植物研究所王映明教授鉴定。受试化合物溶于双蒸水，阳性对照药红霉素（EMA）、阿奇霉素（AZA）溶于DMSO中，配成1 280 μg/mL无菌溶液，分装至无菌小管中，保存备用。
1.3方法
取无菌小试管13支排于试管架，于第1管加入液体培养基1.8 mL，2～12管各加1 mL。将0 2 mL的药物原液加入第1管中，混合后吸出1 mL加入第2管中，用同法依次2倍稀释第2管、第3管……至第12管，从第12管吸1 mL加入到第13管，第13管为样本对照，则各管的浓度依次为128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125、0.06 μg/mL。将1~12管中加入已校正浓度的菌液0 05 mL（105 cfu/mL），混匀，13管不加菌液。取3只试管只加入肉汤1.0 mL，做为空白对照；取3只试管加入肉汤1.0 mL和菌液0.05 mL，做为菌液对照。混匀后试管加硅胶塞塞好，放置37 ℃培养18 h，观察结果，以无细菌生长的最低浓度为最低抑菌浓度（MIC）。同法操作受试化合物，阳性对照EMA、AZA。
2结果
在所测试的2个丁酸衍生物葡萄糖苷中，kinsenoside为含有一个手性中心的丁内酯的吡喃葡萄糖苷，药理活性显着，它的独特结构已经引起国内外研究者的广泛关注[6-9]。本研究将化学与药理方面有机结合，在对该化合物进行降血糖[6]、抗癌、抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B（PTP1B）等活性测试的同时，也测试了金线莲中富含的主要成分kinsenoside[8]体外抑菌的药理活性，为全面评价活性化合物kinsenoside的药理活性提供了科学依据，也为该化合物及药材的药用价值开发奠定了基础。
本课题组通过对野生金线莲的化学成分研究，鉴定了2个丁酸衍生物葡萄糖苷β-D- glucopyranosyl-（3R）-hydroxybutanolide（Ⅰ，kinsenoside），methyl 4-β-D- glucopyranosyl-butanoate （Ⅱ）[5]，其中Ⅰ为首次从该种植物中分离得到，在药材中含量很高；Ⅱ为首次分离得到的天然产物。化合物Ⅰ和Ⅱ都是丁酸衍生物的葡萄糖苷（butanoic acid glucosides），其中Ⅰ的结构中的丁酸以内酯环的形式存在。Kinsenoside作为开春兰属多种植物含有的主要成分，其降血糖[6]、保肝护肝[7]、降血脂[8] 等活性已多有研究，关于抗菌活性的研究国内外尚未见文献报道，本研究对此进行了初步的探讨。
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