宫内缺氧对胎儿发育的影响-儿科护理毕业论文范文
儿科护理毕业论文范文 儿科护理论文 儿科医学论文 儿科本科毕业论文
1 材料
鼠抗VEGF（中杉金桥生物技术有限公司）、SABC试剂盒、DAB显色试剂盒（棕黄色） 购自武汉博士德生物工程公司；250g/L的当归注射液购自武汉大学附属第二医院药剂科（批号060926）。OLYMPUS Bx-70荧光显微镜成像系统为日本OLYMPUS光学仪器有限公司生产；德国莱卡切片机；三气培养箱（购自美国REVCO公司）。SD大鼠15只（220～250g）由泸州医学院 动物实验中心提供 。
2 方法
2.1 动物配种与分组
成年健康SD雌大鼠15只（体质量220～260 g），分别与SD雄鼠合笼配种，次日晨见阴栓记为大鼠怀孕0 d，孕鼠随机分为对照组、缺氧组、当归组各5只。
2.2 宫内缺氧模型建立
参照余鸿［1］等制作的宫内缺氧模型。当归组孕鼠自孕14 d开始，每天下午2：00经尾静脉注射250g/L的当归注射液8ml/kg（孕第14～20 天，连续7 d），1h后放入设置好的三气培养箱（氧体积分数130 ml／L，温度25℃ ，二氧化碳体积分数0.4～0.6 ml／L）内缺氧2 h，连续缺氧3d（孕第14～16天），第17，18，19，20天仍给予当归注射，但不缺氧。缺氧组用生理盐水代替当归注射液，其余同当归组。对照组不缺氧，余同缺氧组。
2.3 取材、石蜡切片及VEGF免疫组织化学测定
每组随机选取15个新生鼠肾脏，然后进行常规石蜡包埋，经肾脏冠状切面切片（片厚4 μm），每组切片脱蜡至水，各组随机取12张切片分别作VEGF（1∶200）免疫组化染色（常规链酶亲和素一生物素一过氧化物酶复合物法）。其余切片做HE染色，免疫组化切片在400倍显微镜下观察肾脏皮质，每张切片随机选取5 个视野，每个视野随机选取3～5 个近曲小管。采用OLYMPUS Bx-70荧光显微镜成像系统拍照，经Image-Pro Plus5.1图像分析系统对阳性细胞进行图像分析。
2.4 统计学处理各组间比较
用方差分析，两两比较用LSD法检验。采用SPSS13.0软件包完成数据分析（P<0.05）。
3 结果
对照组VEGF免疫组化反应阳性细胞分布呈区域性，大多位于肾远曲小管上皮细胞，胞质中有棕黄色颗粒。缺氧组VEGF免疫组化反应阳性细胞分布区域与对照组相似，与对照组相比缺氧组阳性细胞染色增强、阳性细胞数量增加、积分光密度值增大（P＜0.05）。当归治疗组VEGF免疫组化反应阳性细胞分布与对照组相似，与缺氧组相比缺氧组阳性细胞染色减弱、数量减少、其积分光密度值减小（P＜0.05）（见图1c，表1）。
血管内皮生长因子是调节血管发生的基本生长因子，在肾脏中含量丰富，已有较多证据表明VEGF 在肾脏胚胎发育中起重要作用。宫内缺氧是影响胚胎发育的常见因素，而肾脏是对缺血缺氧最敏感的器官之一，VEGF是调节血管发生的基本生长因子，它可以与内皮细胞上的受体相结合，从而促进内皮细胞的增殖，加速新生血管的生成。许多组织器官在低氧环境下，都可诱导血管内皮细胞生长因子VEGF的表达，使毛细血管代偿增生，缓解缺氧状态。近年来也有报道VEGF与肾脏的生理和一些病理状态相关。
儿科护理论文发表 http://www.qikanba.com/
1 材料
鼠抗VEGF（中杉金桥生物技术有限公司）、SABC试剂盒、DAB显色试剂盒（棕黄色） 购自武汉博士德生物工程公司；250g/L的当归注射液购自武汉大学附属第二医院药剂科（批号060926）。OLYMPUS Bx-70荧光显微镜成像系统为日本OLYMPUS光学仪器有限公司生产；德国莱卡切片机；三气培养箱（购自美国REVCO公司）。SD大鼠15只（220～250g）由泸州医学院 动物实验中心提供 。
2 方法
2.1 动物配种与分组
成年健康SD雌大鼠15只（体质量220～260 g），分别与SD雄鼠合笼配种，次日晨见阴栓记为大鼠怀孕0 d，孕鼠随机分为对照组、缺氧组、当归组各5只。
2.2 宫内缺氧模型建立
参照余鸿［1］等制作的宫内缺氧模型。当归组孕鼠自孕14 d开始，每天下午2：00经尾静脉注射250g/L的当归注射液8ml/kg（孕第14～20 天，连续7 d），1h后放入设置好的三气培养箱（氧体积分数130 ml／L，温度25℃ ，二氧化碳体积分数0.4～0.6 ml／L）内缺氧2 h，连续缺氧3d（孕第14～16天），第17，18，19，20天仍给予当归注射，但不缺氧。缺氧组用生理盐水代替当归注射液，其余同当归组。对照组不缺氧，余同缺氧组。
2.3 取材、石蜡切片及VEGF免疫组织化学测定
每组随机选取15个新生鼠肾脏，然后进行常规石蜡包埋，经肾脏冠状切面切片（片厚4 μm），每组切片脱蜡至水，各组随机取12张切片分别作VEGF（1∶200）免疫组化染色（常规链酶亲和素一生物素一过氧化物酶复合物法）。其余切片做HE染色，免疫组化切片在400倍显微镜下观察肾脏皮质，每张切片随机选取5 个视野，每个视野随机选取3～5 个近曲小管。采用OLYMPUS Bx-70荧光显微镜成像系统拍照，经Image-Pro Plus5.1图像分析系统对阳性细胞进行图像分析。
2.4 统计学处理各组间比较
用方差分析，两两比较用LSD法检验。采用SPSS13.0软件包完成数据分析（P<0.05）。
3 结果
对照组VEGF免疫组化反应阳性细胞分布呈区域性，大多位于肾远曲小管上皮细胞，胞质中有棕黄色颗粒。缺氧组VEGF免疫组化反应阳性细胞分布区域与对照组相似，与对照组相比缺氧组阳性细胞染色增强、阳性细胞数量增加、积分光密度值增大（P＜0.05）。当归治疗组VEGF免疫组化反应阳性细胞分布与对照组相似，与缺氧组相比缺氧组阳性细胞染色减弱、数量减少、其积分光密度值减小（P＜0.05）（见图1c，表1）。
血管内皮生长因子是调节血管发生的基本生长因子，在肾脏中含量丰富，已有较多证据表明VEGF 在肾脏胚胎发育中起重要作用。宫内缺氧是影响胚胎发育的常见因素，而肾脏是对缺血缺氧最敏感的器官之一，VEGF是调节血管发生的基本生长因子，它可以与内皮细胞上的受体相结合，从而促进内皮细胞的增殖，加速新生血管的生成。许多组织器官在低氧环境下，都可诱导血管内皮细胞生长因子VEGF的表达，使毛细血管代偿增生，缓解缺氧状态。近年来也有报道VEGF与肾脏的生理和一些病理状态相关。
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