独一味对蟾蜍离体心脏功能影响的研讨-口腔本科毕业论文
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独一味是藏、蒙、纳西等民族民间常用草药，以往对独一味的研究集中在止血、止痛、免疫调节、抗菌抗炎、抗肿瘤等方面，而独一味对心血管的作用研究较少。本实验研究结果显示：独一味提取物对蟾蜍离体心脏具有抑制作用，明显使心肌收缩力减弱，心输出量减少，而对心率的影响不明显。在0.01～2.0 mg·ml-1浓度范围内，随着独一味浓度的升高，其对心肌收缩力的抑制作用增强，呈现出明显的量效关系。由此分析，独一味可能主要影响心脏的工作细胞，而对心脏的自律细胞影响较小。
通过改变灌流液中的钙离子（Ca2+）浓度及加入不同的工具药可以进一步分析独一味对心脏作用的相关机制。Ca2+是心肌细胞兴奋-收缩偶联的关键物质。由于心肌细胞的肌浆网不太发达，所以，细胞外Ca2+内流的多少对细胞内的Ca2+浓度影响较大。实验中观察到，随灌流液中的Ca2+浓度升高，心肌的收缩力加强；加入独一味后，心肌的收缩力降低，并且随灌流液中的Ca2+浓度升高，独一味的作用明显增强。说明独一味可能通过阻断心肌细胞膜上的Ca2+通道，抑制Ca2+内流，从而减少细胞内的Ca2+浓度而使心肌收缩力减弱。
1 材料与仪器
1.1 药品和溶液
氯化乙酰胆碱，国药集团化学试剂有限公司生产，批号 20071109；阿托品，天津金耀氨基酸有限公司生产，批号 0607281；肾上腺素，天津金耀氨基酸有限公司，批号 0701291；普萘洛尔，天津力生制药股份有限公司生产，批号 0701003；独一味提取物，由本校天然药物化学实验室提供。正常任氏液、高钙任氏液（钙离子浓度为正常任氏液2倍，其他离子浓度不变）和低钙任氏液（钙离子浓度为正常任氏液的一半，其他离子浓度不变）。 1.2 仪器
BL-420F生物信号记录系统，成都泰盟科技有限公司生产；FT张力传感器，成都泰盟科技有限公司生产；AUY120分析天平，日本岛津公司生产。
1.3 动物蟾蜍60只，雌雄兼用，由天津市实验动物中心提供，合格证号为SCXJ（津）2005-0001。
2 方法
2.1 独一味提取物的制备［7］取独一味粉碎，加水煎煮3次，1 h/次，合并滤液，过滤，将过滤后的滤液浓缩成相对密度1.30的浸膏，80℃以下干燥成棕色粉末。用时用蒸馏水配制并用任氏液稀释至所需浓度，保存于冰箱。
2.2 离体心脏标本的制备
采用巴木氏法制备蟾蜍离体心脏标本备用［8］。
2.3 独一味对蟾蜍离体心脏功能的影响
按照累加法逐渐加入独一味溶液，使灌流液中的独一味浓度为0.01～2.0 mg·ml-1。观察心肌收缩力、心输出量和心率的变化。
2.4 独一味对心功能的作用机制研究
分别以乙酰胆碱、阿托品、肾上腺素、普萘洛尔为工具以及调整灌流液中的钙离子浓度，通过比较心肌收缩力、心每分输出量和心率的变化，分析独一味对蟾蜍离体心脏作用的机制。
2.5 数据处理各组数据均采用±s表示，组间差异的显着性检验采用t检验，P 0.05为差异显着。
3 结果
氯化乙酰胆碱对心肌收缩力的作用及阿托品的拮抗作用 10μg·ml-1的氯化乙酰胆碱使心肌收缩力降低，阿托品（2μg·ml-1,下同）可完全拮抗乙酰胆碱的作用。在2.0 mg·ml-1独一味的作用下，心肌收缩力降低33.3%，心输出量减少48.3%。给予阿托品后，再给予相同浓度的独一味，心肌收缩力仅降低了15.0％，心输出量减少34.7%。肾上腺素（2μg·ml-1,下同）可明显使心肌收缩力加强，心输出量增加，心率加快。2.0 mg·ml-1独一味不能阻断肾上腺素的上述作用，而普萘洛尔（4 μg·ml-1）则能完全阻断肾上腺素的心脏兴奋作用。
分别用低钙任氏液、正常任氏液和高钙任氏液进行灌流，并分别给予0.5 mg·m-1的独一味，可见独一味使心肌收缩力分别降低15.2%，33.0%和47.3%。独一味的作用随钙离子浓度的升高而增强。
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独一味是藏、蒙、纳西等民族民间常用草药，以往对独一味的研究集中在止血、止痛、免疫调节、抗菌抗炎、抗肿瘤等方面，而独一味对心血管的作用研究较少。本实验研究结果显示：独一味提取物对蟾蜍离体心脏具有抑制作用，明显使心肌收缩力减弱，心输出量减少，而对心率的影响不明显。在0.01～2.0 mg·ml-1浓度范围内，随着独一味浓度的升高，其对心肌收缩力的抑制作用增强，呈现出明显的量效关系。由此分析，独一味可能主要影响心脏的工作细胞，而对心脏的自律细胞影响较小。
通过改变灌流液中的钙离子（Ca2+）浓度及加入不同的工具药可以进一步分析独一味对心脏作用的相关机制。Ca2+是心肌细胞兴奋-收缩偶联的关键物质。由于心肌细胞的肌浆网不太发达，所以，细胞外Ca2+内流的多少对细胞内的Ca2+浓度影响较大。实验中观察到，随灌流液中的Ca2+浓度升高，心肌的收缩力加强；加入独一味后，心肌的收缩力降低，并且随灌流液中的Ca2+浓度升高，独一味的作用明显增强。说明独一味可能通过阻断心肌细胞膜上的Ca2+通道，抑制Ca2+内流，从而减少细胞内的Ca2+浓度而使心肌收缩力减弱。
1 材料与仪器
1.1 药品和溶液
氯化乙酰胆碱，国药集团化学试剂有限公司生产，批号 20071109；阿托品，天津金耀氨基酸有限公司生产，批号 0607281；肾上腺素，天津金耀氨基酸有限公司，批号 0701291；普萘洛尔，天津力生制药股份有限公司生产，批号 0701003；独一味提取物，由本校天然药物化学实验室提供。正常任氏液、高钙任氏液（钙离子浓度为正常任氏液2倍，其他离子浓度不变）和低钙任氏液（钙离子浓度为正常任氏液的一半，其他离子浓度不变）。 1.2 仪器
BL-420F生物信号记录系统，成都泰盟科技有限公司生产；FT张力传感器，成都泰盟科技有限公司生产；AUY120分析天平，日本岛津公司生产。
1.3 动物蟾蜍60只，雌雄兼用，由天津市实验动物中心提供，合格证号为SCXJ（津）2005-0001。
2 方法
2.1 独一味提取物的制备［7］取独一味粉碎，加水煎煮3次，1 h/次，合并滤液，过滤，将过滤后的滤液浓缩成相对密度1.30的浸膏，80℃以下干燥成棕色粉末。用时用蒸馏水配制并用任氏液稀释至所需浓度，保存于冰箱。
2.2 离体心脏标本的制备
采用巴木氏法制备蟾蜍离体心脏标本备用［8］。
2.3 独一味对蟾蜍离体心脏功能的影响
按照累加法逐渐加入独一味溶液，使灌流液中的独一味浓度为0.01～2.0 mg·ml-1。观察心肌收缩力、心输出量和心率的变化。
2.4 独一味对心功能的作用机制研究
分别以乙酰胆碱、阿托品、肾上腺素、普萘洛尔为工具以及调整灌流液中的钙离子浓度，通过比较心肌收缩力、心每分输出量和心率的变化，分析独一味对蟾蜍离体心脏作用的机制。
2.5 数据处理各组数据均采用±s表示，组间差异的显着性检验采用t检验，P 0.05为差异显着。
3 结果
氯化乙酰胆碱对心肌收缩力的作用及阿托品的拮抗作用 10μg·ml-1的氯化乙酰胆碱使心肌收缩力降低，阿托品（2μg·ml-1,下同）可完全拮抗乙酰胆碱的作用。在2.0 mg·ml-1独一味的作用下，心肌收缩力降低33.3%，心输出量减少48.3%。给予阿托品后，再给予相同浓度的独一味，心肌收缩力仅降低了15.0％，心输出量减少34.7%。肾上腺素（2μg·ml-1,下同）可明显使心肌收缩力加强，心输出量增加，心率加快。2.0 mg·ml-1独一味不能阻断肾上腺素的上述作用，而普萘洛尔（4 μg·ml-1）则能完全阻断肾上腺素的心脏兴奋作用。
分别用低钙任氏液、正常任氏液和高钙任氏液进行灌流，并分别给予0.5 mg·m-1的独一味，可见独一味使心肌收缩力分别降低15.2%，33.0%和47.3%。独一味的作用随钙离子浓度的升高而增强。
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