原发性高血压病不同证型PPARγ基因表达研究-本科护理毕业论文
本科护理毕业论文 医学护理论文 医学核心期刊 护理学本科毕业论文
1 资料与方法
1.1 研究对象
1.1.1 病例选择2008~2009年在石家庄市中医院门诊或病房首次确诊为EH阴虚阳亢型25例(设为阴虚阳亢组),痰湿壅盛型25例(设为痰湿壅盛组),健康体检者(设为正常组)25例。各组病例资料见表1。
1.1.2 诊断标准西医诊断标准按照2005年《中国高血压防治指南》修订版中EH的诊断标准。中医证候诊断标准参照中华人民共和国国家药品监督管理局2002年制定颁布的《中药新药临床研究指导原则·中药新药治疗高血压病的临床研究指导原则》中阴虚阳亢型或痰湿壅盛型的诊断标准。
1.1.3 纳入标准西医诊断为EH;中医诊断为阴虚阳亢型或痰湿壅盛型。
1.1.4 排除标准年龄在 45岁以下或 70岁以上;继发性高血压;感染性疾病患者。
1.2 试剂及仪器人淋巴细胞分离液(晶美公司)、Trizol(MRC公司)、半定量逆转录多聚酶链式反应试剂盒(Fermentas公司)、PCR试剂盒(Fermentas公司)、DNA marker(Fermentas公司)、PPARγ引物(上游引物:5'-CAAGACAACCTGCTACAAGC-3' 下游引物:5'-TCCTTGTAGATCTCCTGCAG-3‘, 上海生工工程技术服务有限公司)、β-actin引物(上游引物:5'- TAAAGACCTCTATGCCAACACAGT-3' 下游引物:5'-CACGATGGAGGGGCCGGACTCATC-3' ,上海生工工程技术服务有限公司)、琼脂糖(Amresco公司)、EB(Sigma公司)。低温离心机(Journ公司)、PCR仪(PXE0.2,Thermo公司)、电泳仪(DYY-8C型,北京市八一仪器厂)、凝胶成像分析系统(Vilber lourmat公司)、彩色多普勒超声诊断仪(PowerVision6000,日本东芝) 。
1.3 RT-PCR法检测外周血淋巴细胞PPAPγ mRNA表达[3]抽清晨空腹肘静脉肝素抗凝血,1 000 r/min离心1 min,弃上清;盐水与血等体积混匀稀释;1 ml淋巴细胞分离液面上,用滴管沿壁缓慢加2 ml稀释血;2 000 r/min离心20 min;管内分为4层,吸出云雾层(淋巴细胞);用5×生理盐水稀释,1 500 r/min离心10min,重复1次,分离淋巴细胞。提取细胞总RNA,总RNA逆转录成cDNA,PCR扩增,反应条件:94℃预变性5 min,94℃变性30s,58℃退火45 s,72℃延伸45 s,共35个循环,72℃延伸5 min。PCR产物琼脂糖凝胶电泳,凝胶摄像系统采集电泳图像,用PPARγ条带灰度与β-actin标准条带的比值进行半定量分析。
1.4 彩色多普勒超声测量颈总动脉内膜-中膜厚度由专人操作将探头置于颈部纵横扫查,观察颈总动脉,颈内动脉、颈外动脉,测量颈总动脉内膜-中膜厚度(IMT)。
1.5 统计处理计量资料数据均用±s表示,采用SPSS12.0软件进行分析,组间比较用单因素方差分析,以P<0.05具有统计学意义。
2 结果
各组PPARγ mRNA表达与正常对照组(0.77±0.11)比较,阴虚阳亢型组(0.35±0.10)及痰湿壅盛型(0.22±0.11)患者PPARγ mRNA表达减弱,组间比较具有显着性差异(P<0.05)。与阴虚阳亢型组比较,痰湿壅盛组PPARγ mRNA表达下调明显(P<0.05)。各组颈动脉血管病变与正常对照组比较,阴虚阳亢型和痰湿壅盛型高血压患者IMT增厚,组间比较具有显着性差异(P<0.05)。与阴虚阳亢型组比较,痰湿壅盛型IMT增厚明显(P<0.05)。
护理毕业论文提纲 http://www.qikanba.com/
1 资料与方法
1.1 研究对象
1.1.1 病例选择2008~2009年在石家庄市中医院门诊或病房首次确诊为EH阴虚阳亢型25例(设为阴虚阳亢组),痰湿壅盛型25例(设为痰湿壅盛组),健康体检者(设为正常组)25例。各组病例资料见表1。
1.1.2 诊断标准西医诊断标准按照2005年《中国高血压防治指南》修订版中EH的诊断标准。中医证候诊断标准参照中华人民共和国国家药品监督管理局2002年制定颁布的《中药新药临床研究指导原则·中药新药治疗高血压病的临床研究指导原则》中阴虚阳亢型或痰湿壅盛型的诊断标准。
1.1.3 纳入标准西医诊断为EH;中医诊断为阴虚阳亢型或痰湿壅盛型。
1.1.4 排除标准年龄在 45岁以下或 70岁以上;继发性高血压;感染性疾病患者。
1.2 试剂及仪器人淋巴细胞分离液(晶美公司)、Trizol(MRC公司)、半定量逆转录多聚酶链式反应试剂盒(Fermentas公司)、PCR试剂盒(Fermentas公司)、DNA marker(Fermentas公司)、PPARγ引物(上游引物:5'-CAAGACAACCTGCTACAAGC-3' 下游引物:5'-TCCTTGTAGATCTCCTGCAG-3‘, 上海生工工程技术服务有限公司)、β-actin引物(上游引物:5'- TAAAGACCTCTATGCCAACACAGT-3' 下游引物:5'-CACGATGGAGGGGCCGGACTCATC-3' ,上海生工工程技术服务有限公司)、琼脂糖(Amresco公司)、EB(Sigma公司)。低温离心机(Journ公司)、PCR仪(PXE0.2,Thermo公司)、电泳仪(DYY-8C型,北京市八一仪器厂)、凝胶成像分析系统(Vilber lourmat公司)、彩色多普勒超声诊断仪(PowerVision6000,日本东芝) 。
1.3 RT-PCR法检测外周血淋巴细胞PPAPγ mRNA表达[3]抽清晨空腹肘静脉肝素抗凝血,1 000 r/min离心1 min,弃上清;盐水与血等体积混匀稀释;1 ml淋巴细胞分离液面上,用滴管沿壁缓慢加2 ml稀释血;2 000 r/min离心20 min;管内分为4层,吸出云雾层(淋巴细胞);用5×生理盐水稀释,1 500 r/min离心10min,重复1次,分离淋巴细胞。提取细胞总RNA,总RNA逆转录成cDNA,PCR扩增,反应条件:94℃预变性5 min,94℃变性30s,58℃退火45 s,72℃延伸45 s,共35个循环,72℃延伸5 min。PCR产物琼脂糖凝胶电泳,凝胶摄像系统采集电泳图像,用PPARγ条带灰度与β-actin标准条带的比值进行半定量分析。
1.4 彩色多普勒超声测量颈总动脉内膜-中膜厚度由专人操作将探头置于颈部纵横扫查,观察颈总动脉,颈内动脉、颈外动脉,测量颈总动脉内膜-中膜厚度(IMT)。
1.5 统计处理计量资料数据均用±s表示,采用SPSS12.0软件进行分析,组间比较用单因素方差分析,以P<0.05具有统计学意义。
2 结果
各组PPARγ mRNA表达与正常对照组(0.77±0.11)比较,阴虚阳亢型组(0.35±0.10)及痰湿壅盛型(0.22±0.11)患者PPARγ mRNA表达减弱,组间比较具有显着性差异(P<0.05)。与阴虚阳亢型组比较,痰湿壅盛组PPARγ mRNA表达下调明显(P<0.05)。各组颈动脉血管病变与正常对照组比较,阴虚阳亢型和痰湿壅盛型高血压患者IMT增厚,组间比较具有显着性差异(P<0.05)。与阴虚阳亢型组比较,痰湿壅盛型IMT增厚明显(P<0.05)。
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