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达肝清治疗病毒性肝炎的实验结果分析-外科护理论文

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  达肝清是由三姐妹、黄根等药物组成的中药复方,具有清热解毒、益气健脾、利湿化瘀等功效,临床上主要用于治疗急、慢性病毒性肝炎,疗效显着。研究已表明达肝清具有保肝降酶,抗乙肝病毒等作用[1],对急、慢性肝损伤具有明显的保护作用[2],同时对2215细胞分泌的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和e抗原(HBeAg)有抑制作用[3]。本实验采用撤除苯巴比妥钠诱导肝细胞凋亡模型,观察达肝清对肝细胞异常凋亡的影响,以进一步揭示其治疗病毒性肝炎的作用机理。
  流式细胞仪分析凋亡率流式细胞仪分析表明(见表1),凋亡对照组凋亡率明显高于空白对照组及非凋亡对照组(P<0.01);与凋亡对照组比较,达肝清高、中剂量组肝细胞凋亡率有显着差异(P<0.01),达肝清低剂量组肝细胞凋亡率虽低于凋亡对照组但无显着性差异(P>0.05)。
  组织学改变及肝/体质量比如表2所示,与非凋亡对照组相比,凋亡对照组小鼠肝/体质量比回落13.5%,达肝清高、中、低剂量组分别回落1.2%,7.5%,8.4%。各组动物肝组织HE染色,高倍镜下可见(见图1,表2),凋亡对照组有散在凋亡小体,凋亡细胞胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象;达肝清高剂量组、中剂量组凋亡细胞数量明显低于凋亡对照组(P<0.01),部分肝细胞轻度浊肿变性,肝细胞间散在淋巴细胞浸润,汇管区有少量炎细胞浸润。
  TUNEL反应凋亡对照组可见单个散在分布的凋亡细胞,凋亡细胞胞核着棕黄色或棕褐色, 核固缩或染色质浓聚附边。非凋亡对照组及达肝清高、中剂量组无明显凋亡现象,凋亡细胞数与凋亡对照组比较有显着差异(P<0.01)。达肝清低剂量组仍有散在凋亡小体等改变, 凋亡细胞数与凋亡对照组比较无显着差异(P>0.05)(见表3,图2 )。
  肝细胞的异常凋亡在急、慢性肝损伤的发病机制中起着重要作用[4,5],从肝细胞异常凋亡的角度观察保肝药物的作用及机制具有重要意义。PB能诱导动物肝脏增殖,停药后增殖迅速回落,这种回落是一个典型的凋亡过程[5]。本研究采用撤除PB引起肝细胞异常凋亡为模型, 通过流式细胞术、HE染色、Tunel染色法,观察达肝清对小鼠肝细胞异常凋亡的抑制作用。
  本实验中,凋亡对照组,HE染色可见散在凋亡小体,凋亡细胞呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象;TUNEL法检测可见凋亡细胞胞核着棕黄色或棕褐色, 核固缩或染色质浓聚附边,且凋亡对照组凋亡细胞计数明显高于非凋亡对照组及空白对照组,提示肝细胞异常凋亡模型复制成功。
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