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地黄寡糖(ROS)的药理功能实验研究-急诊急救护理论文

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  1 仪器与试剂
  日本岛津液相色谱仪一套,包括LC-20ATVP色谱泵、RID-10A示差检测器、柱温箱、LCsolution 1.03色谱工作站;KQ-250B超声波清洗器,昆山市超声仪器有限公司生产;SYS-550型石英亚沸高纯水蒸馏器,由金坛市丹阳门石英玻璃厂生产;水苏糖对照品,购于北京慧德易科技有限责任公司,纯度99.8%。ROS,自制。
  2 方法与结果
  2.1 溶液的制备
  2.1.1  对照品溶液的制备精密称取水苏糖对照品适量,加水制成每毫升含1.0 mg的溶液,即得。
  2.1.2  供试品溶液的制备即自制ROS,稀释10倍,用0.45 μm的膜滤过,作为供试品溶液。
  2.2  色谱条件
  色谱柱:菲罗门Rezex RPM-Monosaccharide Pb+ +8%(7.8 mm×300 mm);流动相:水;流速:0.8 ml/min;柱温:80℃,示差检测器,进样量:10 μl。结果表明供试品溶液在水苏糖位置上有相应的峰存在,且与其它色谱峰可以基线分离。表明水苏糖在此色谱条件下分离良好。理论塔板数按水苏糖计,应不低于3 000。色谱图见图1。
  2.3 线性关系实验
  分别精密称取水苏糖对照品,加水配制浓度分别为0.20,0.40,0.80,1.60,3.2 mg/ml的溶液,按色谱条件分别进样10 μl,测得峰面积,以对照品浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标,得线性回归方程为:Y=100 409X-3 340.9,r=0.999 5。结果表明水苏糖在0.20~3.20 mg/ml时,浓度与峰面积呈良好线性关系。
  2.4 精密度和稳定性实验取同一供试品溶液,按上述色谱条件,重复进样6次,10 μl/次,测定水苏糖峰面积,其RSD为1.2%,表明此法的精密度良好。取同一供试品溶液,并分别于0,3,6,9,12,24 h,按上述色谱条件,进样10 μl,测定水苏糖含量,RSD为1.9%,表明水苏糖在24 h内稳定。
  2.5  加样回收率实验取供试品6批,分别加入水苏糖对照品1或2 mg,按供试品溶液的制备方法制成供试品溶液,进样,计算回收率,见表1,平均回收率为99.91%,RSD为1.20%。地黄常被作为益智药物使用。地黄饮子治疗血管性痴呆39例,总有效率可达66.67%[1]。地黄饮子证明对中风患者的神经功能恢复具有良好的治疗效果[2]。熟地黄水煎剂可以改善AlCl3导致痴呆小鼠和大鼠的学习记忆功能[3]。尽管地黄的药理作用得到人们认可,但地黄发挥作用的具体成分并不清楚。由于以上地黄制剂在使用时均为其水溶性成分,因此,推断其发挥作用的应为水溶性成分。在此推论的基础上制备了地黄寡糖[4](ROS),研究表明,ROS对缺血再灌导致的大鼠学习记忆损伤具有保护作用[4];对谷氨酸诱导的神经细胞损伤具有保护作用[5]。为进一步探讨ROS发挥药理学作用的物质基础,对ROS中的水苏糖含量进行了测定。
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