木耳多糖抗微波辐射作用研究-优质护理服务的论文
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1 材料
木耳多糖为本实验室提取,蒽酮-硫酸法测定含糖量为84%;三羟甲基氨基甲烷、邻苯三酚、乙二胺四乙酸二钠均为国产分析纯试剂。
电子天平;HH-601超级恒温水浴箱;GYS-2不锈钢电热恒温水浴箱;HZQ-C空气浴振荡器;GZX-DH-50X55-S电热恒温干燥箱;T6 新世纪紫外分光光度计;721可见分光光度计(上海欣茂仪器有限公司);pH计;中草药粉碎机等。
2 方法
2.1 实验动物模型与饲养清洁级Wistar大鼠60只,购回后在紫外消毒、温度23℃的室内自由喂清洁级大鼠专用饲料和水进行1周的适应性饲养后随机分为6组,即:正常对照组、辐射模型组、药物对照组、治疗组、预防组、新模型组(迟10 d微波辐射模型组),每组10只。对辐射模型组、治疗组给予微波辐射表面功率200 mW/cm2,10 min的辐射。第11天对预防组、新模型组给予相同条件的辐射。
正常对照组、辐射模型组、新模型组每天给与1.5 ml的蒸馏水灌胃;药物对照组、治疗组、预防组每天给予1.5 ml浓度为1%的木耳多糖溶液(按150 mg/kg体质量,为人类摄取木耳量中木耳多糖的10倍)。第10天,对预防组和新模型组进行相同功率和时间的辐射。禁食不禁水,18 h后(即第11天),按体质量进行乌拉坦麻醉,腹主动脉取血和摘取肝脏。
2.2 血清和肝匀浆的制备腹主动脉血在室温下20 min后,2 500 r/min离心5 min,得到血清;肝脏利用PBS配制成10%的肝匀浆。
2.3 统计学分析对于两组实验结果的值进行独立样本的t-检验;对于3组以上实验结果考虑其每个因素的影响及其各因素间的交互作用,利用SPSS13.0软件进行多因素方差分析。
2.4 实验步骤
2.4.1 血清SOD的制备及SOD测定液的配制采用临苯三酚自氧化法测定SOD活性[6]。取0.4 ml血清,加入0.4 ml乙醇-氯仿混合液(两者体积比为5∶3),振荡2 min,4 000 r/min离心5 min以除去蛋白质,上清液为SOD抽提液。
取7支试管,分别为对照管和样品管(6组实验动物血清)。反应条件如下:样品管取SOD抽提液100 μl,加入4.8 ml的pH 8.2 Tris-HCl 缓冲液(含0.1 mmol/EDTA),对照管加入4.9 ml的pH8.2 Tris-HCl 缓冲液(0.1 mmol / EDTA),混匀,在25℃恒温水浴中保存10 min后各加入6 mmol/L邻苯三酚100μl,邻苯三酚加入后,摇匀,5 min内测定对照管和样品管的吸光率A对照和A样品,测定波长320 nm,利用邻苯三酚法测定SOD抽提液的A值并计算抑制率。抑制率越高,SOD活性越高,否则相反。
抑制率I(%)= (△A对照 - △A样品)/ △A对照 ×100%。
2.4.2 肝脏过氧脂质化采用TBA法[7],测定肝脏在体外的自氧化作用。取8支试管,分别为对照(1组)、标准(1组)和样品管(6组实验动物血清)。标准组取1 ml MDA (50 nmol/ml),样品组分别取测定MDA的肝匀浆1.0 ml于试管中,再加入蒸馏水1 ml,对照组取蒸馏水2 ml代替,混匀后于37℃空气恒温浴震荡器中震荡1.5 h,取出后加入10%的三氯醋酸2.0 ml, 0.67% TBA1.0 ml ,混匀后在沸水浴中反应15 min,取出后流水冷却,以3 000 r/min离心15 min,取上清液在532 nm波长处比色,测定A值计算对MDA的抑制率,并利用标准MDA试剂求MDA含量。
抑制率I(%)=(A对照-A样品)/A对照×100%
抑制率I(%)=(A标准-A样品)/A对照×100%
本实验从职业(如雷达及通讯检测)和意外情况下接触微波辐射角度考虑,根据本实验室多年研究实验结果,确定微波辐射量表面功率为200 mW/cm2,辐射时间为10 min,探讨在此功率密度下微波辐射对SOD活性的影响及木耳多糖是否具有抗微波辐射作用,从而为专业从事电磁领域者提供治疗保健依据。
中华护理杂志论文 http://www.qikanba.com/
1 材料
木耳多糖为本实验室提取,蒽酮-硫酸法测定含糖量为84%;三羟甲基氨基甲烷、邻苯三酚、乙二胺四乙酸二钠均为国产分析纯试剂。
电子天平;HH-601超级恒温水浴箱;GYS-2不锈钢电热恒温水浴箱;HZQ-C空气浴振荡器;GZX-DH-50X55-S电热恒温干燥箱;T6 新世纪紫外分光光度计;721可见分光光度计(上海欣茂仪器有限公司);pH计;中草药粉碎机等。
2 方法
2.1 实验动物模型与饲养清洁级Wistar大鼠60只,购回后在紫外消毒、温度23℃的室内自由喂清洁级大鼠专用饲料和水进行1周的适应性饲养后随机分为6组,即:正常对照组、辐射模型组、药物对照组、治疗组、预防组、新模型组(迟10 d微波辐射模型组),每组10只。对辐射模型组、治疗组给予微波辐射表面功率200 mW/cm2,10 min的辐射。第11天对预防组、新模型组给予相同条件的辐射。
正常对照组、辐射模型组、新模型组每天给与1.5 ml的蒸馏水灌胃;药物对照组、治疗组、预防组每天给予1.5 ml浓度为1%的木耳多糖溶液(按150 mg/kg体质量,为人类摄取木耳量中木耳多糖的10倍)。第10天,对预防组和新模型组进行相同功率和时间的辐射。禁食不禁水,18 h后(即第11天),按体质量进行乌拉坦麻醉,腹主动脉取血和摘取肝脏。
2.2 血清和肝匀浆的制备腹主动脉血在室温下20 min后,2 500 r/min离心5 min,得到血清;肝脏利用PBS配制成10%的肝匀浆。
2.3 统计学分析对于两组实验结果的值进行独立样本的t-检验;对于3组以上实验结果考虑其每个因素的影响及其各因素间的交互作用,利用SPSS13.0软件进行多因素方差分析。
2.4 实验步骤
2.4.1 血清SOD的制备及SOD测定液的配制采用临苯三酚自氧化法测定SOD活性[6]。取0.4 ml血清,加入0.4 ml乙醇-氯仿混合液(两者体积比为5∶3),振荡2 min,4 000 r/min离心5 min以除去蛋白质,上清液为SOD抽提液。
取7支试管,分别为对照管和样品管(6组实验动物血清)。反应条件如下:样品管取SOD抽提液100 μl,加入4.8 ml的pH 8.2 Tris-HCl 缓冲液(含0.1 mmol/EDTA),对照管加入4.9 ml的pH8.2 Tris-HCl 缓冲液(0.1 mmol / EDTA),混匀,在25℃恒温水浴中保存10 min后各加入6 mmol/L邻苯三酚100μl,邻苯三酚加入后,摇匀,5 min内测定对照管和样品管的吸光率A对照和A样品,测定波长320 nm,利用邻苯三酚法测定SOD抽提液的A值并计算抑制率。抑制率越高,SOD活性越高,否则相反。
抑制率I(%)= (△A对照 - △A样品)/ △A对照 ×100%。
2.4.2 肝脏过氧脂质化采用TBA法[7],测定肝脏在体外的自氧化作用。取8支试管,分别为对照(1组)、标准(1组)和样品管(6组实验动物血清)。标准组取1 ml MDA (50 nmol/ml),样品组分别取测定MDA的肝匀浆1.0 ml于试管中,再加入蒸馏水1 ml,对照组取蒸馏水2 ml代替,混匀后于37℃空气恒温浴震荡器中震荡1.5 h,取出后加入10%的三氯醋酸2.0 ml, 0.67% TBA1.0 ml ,混匀后在沸水浴中反应15 min,取出后流水冷却,以3 000 r/min离心15 min,取上清液在532 nm波长处比色,测定A值计算对MDA的抑制率,并利用标准MDA试剂求MDA含量。
抑制率I(%)=(A对照-A样品)/A对照×100%
抑制率I(%)=(A标准-A样品)/A对照×100%
本实验从职业(如雷达及通讯检测)和意外情况下接触微波辐射角度考虑,根据本实验室多年研究实验结果,确定微波辐射量表面功率为200 mW/cm2,辐射时间为10 min,探讨在此功率密度下微波辐射对SOD活性的影响及木耳多糖是否具有抗微波辐射作用,从而为专业从事电磁领域者提供治疗保健依据。
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