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金水清对血尿大鼠模型的疗效机制观察-患者的中医护理论文

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  1  材料与仪器
  1.1  动物6周龄SPF级雄性健康Wistar大鼠50只,体质量(150±20)g,购自湖北省实验动物中心;普通饲料由湖北省医学实验动物中心饲料加工厂提供;高糖高脂饲料由湖北省中医院制剂科生产。
  1.2  试剂牛血清白蛋白(BSA),购自ROCHE生物工程有限公司;葡萄球菌肠毒素B(SEB),购自军事科学院微生物研究所;FITC标记的羊抗大鼠IgA,购自美国Sigma公司;FITC标记的兔抗大鼠IgG,购自武汉博士德生物技术有限公司。
  1.3  仪器SHH-500GS人工气候箱,重庆市永生实验仪器厂生产;YC-D205超声波加湿器,北京亚都科技股份有限公司生产。药物金水清煎剂:由漏芦、连翘和甘草各等份组成,先用水蒸气蒸馏提取芳香水,蒸馏后的药渣再煎煮浓缩至1 g/ml,加入上述芳香水与适量防腐剂,混匀,灌封,灭菌即得。湖北省中医院制剂室生产。血尿安胶囊,云南理想药业有限公司生产(批号20060105)。
  2  方法
  2.1  分组动物经普通饲料适应性饲养1周后,尿检尿红细胞、尿蛋白全部为阴性,随机分为5组,每组10只,分别是正常对照组、模型组、金水清早组(以下称金早组),金水清晚组(以下称金晚组)和血尿安组。
  2.2  造模及实验方法
  2.2.1  模型组实验第1天起,隔日灌胃含0.1BSA(含牛血清白蛋白20 mg)的酸化水2 ml,第4周将大鼠置于造模箱中共120 h(温度35℃,相对湿度95),温度和湿度根据室温逐步提升,每天不超过5℃,120 h后移至自然环境。进入恒温恒湿箱之前10 d和恒温恒湿箱造模120 h期间,都以高糖高脂饲料喂养。第6周时定期尾静脉注射1BSA缓冲液10 mg/kg(1次/d连续3次),第8周时复加尾静脉注射SEB(葡萄球菌肠毒素B)0.4 mg/kg,1次/周,连续3周。观察至第12周。
  2.2.2  金早组造模方法与模型组相同。从第7周开始用金水清煎剂按6.3 g/(kg·d)灌胃给药,1次/d,至12周末。金晚组造模方法与模型组相同。从第9周开始用金水清煎剂按6.3 g/(kg·d)灌胃给药,1次/d,至12周末。血尿安组造模方法与模型组相同。从第9周开始用血尿安按0.38 g/(kg·d)配成水溶液2 ml分别灌胃, 1次/d,至12周末。正常组隔日灌服生理盐水2 ml,不再进行其它处理,观察至第12周末。指标的检测及方法实验第12周末分别检测各组大鼠尿红细胞(尿沉渣镜检)、24 h尿蛋白定量(双缩脲法);取肾组织进行光镜观测;无菌摘除眼球取血,放射免疫法检测血清中IL-6的含量。
  3  结果
  3.1  一般情况和体温实验期间各组实验大鼠无死亡现象。正常对照组大鼠行为、活动等均正常。正常对照组:动物精神状态,活动及反应性,进食、大便性状无明显变化;模型组和各治疗组动物均出现明显的倦怠嗜卧、耸毛、大便烂、进食少、舌质暗红,有的舌苔白腻;部分出现眼眵、腹泻等表现,3~5 d后基本恢复正常。尿红细胞及尿蛋白测定正常组无镜下血尿,0周至第8周末,模一组与其他组比较差异无统计学意义(P>0.05)。第8周末至12周末,模型组和各治疗组与正常组比较,均有非常显着性差异(P<0.01);模型组与各治疗组比较有非常显着性差异(P<0.01)。说明该模型血尿复制成功,且说明各治疗组药物能降低实验大鼠尿红细胞,金早组稍优于金晚组和血尿安组,金晚组与血尿安组相比差异不显着。金早组肾小球系膜细胞、系膜基质轻度增生,毛细血管腔轻度狭窄,肾小管上皮细胞轻度变性,间质有少量炎细胞浸润。金晚组和血尿安组肾小球系膜细胞、系膜基质轻度增生,毛细血管腔轻度狭窄,肾小囊轻度扩张。肾小管上皮细胞变性,间质炎细胞浸润。

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