脑心康片的抗脑缺血作用机制研究-专科护理学毕业论文
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1 材料
1.1 动物Wistar大鼠，雄性，体质量（200±20）g，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供，动物许可证号：黑动字P00101006。大鼠自由进食、饮水，同等条件下饲养，手术前12 h禁食，不禁水。
1.2 药品与试剂脑心康片由蝙蝠葛酚性碱50%、水蛭素50%组成，黑龙江中医药大学实验中心制备。尼莫地平片，天津中央药业有限公司生产。银杏叶片，唐山荣大药业有限公司生产。COX 2抗体（COX 2山羊抗兔IgG多抗）稀释度：1:100，Santa Cruz公司。HRP标记的链霉卵白素-亲和素SP试剂盒、 S/P两步法检测试剂盒、PV6001二步法检测试剂盒、兔抗山羊IgG/HRP、 山羊抗鼠IgG/HRP， DAB显色试剂盒 ，均由北京中杉金桥生物技术有限公司生产。
2 方法
2.1 分组及给药方法Wistar大鼠雄性70只，体质量（200±20）g，按照体质量随机分为7组，每组10只。即脑心康片高剂量组（100 mg/kg）、脑心康片中剂量组（50 mg/kg）、脑心康片低剂量组（25 mg/kg）、尼莫地平组（21.6 mg/kg）、银杏叶片组（135 mg/kg）、模型对照组和假手术组（分别给等体积生理盐水）。各组均连续灌胃给药7 d，末次给药30 min后手术。大鼠脑缺血再灌注模型制备采用大鼠大脑中动脉线栓法制备不完全脑缺血模型，末次给药30 min 后，20%乌拉坦（1 g/kg，ip）麻醉，分离并结扎双侧颈总动脉及迷走神经45 min，然后松开再灌注2 h。假手术组只暴露血管不结扎，其余组均按照上述过程操作。
2.2 实验指标的检测方法在造模手术完成3～5 h，待大鼠苏醒后，能够完全自主活动时，进行第1次神经功能评分；分别于末次给药后24，48，72 h进行第2次神经功能评分。行为学评分后处死动物，迅速取出大脑置于冰盘上。将大脑分成两半，取左侧大脑皮层脑组织2 g制成单细胞悬液，检测大鼠神经细胞凋亡率。取右侧大脑制成1%的脑组织匀浆，采用免疫组织化学法检测大鼠脑组织COX 2蛋白表达。
3 结果
由表2可见模型组与假手术组比较有显着性差异，P＜0.01，说明造模是成功的。所有药物治疗组与假手术组比较，均有显着性差异，P＜0.01，与模型组比较差异亦显着，P＜0.01或P＜0.05。假手术组脑组织的神经细胞可测得凋亡峰，即细胞凋亡率不为0，说明正常的脑组织亦有少量的凋亡现象发生。
实验结果表明，脑心康片具有明显的抗脑缺血作用，对神经元细胞凋亡具有明显的抑制作用，随剂量增加，此作用明显增强。脑心康片高剂量抗脑缺血的作用要优于银杏叶片，与尼莫地平作用相当，中剂量弱于尼莫地平，但与银杏叶片作用相当，低剂量弱于尼莫地平和银杏叶片。经药物治疗后，各组的大鼠脑组织虽可见COX 2阳性细胞表达，但与模型对照组比较，均具有极显着差异，P＜0.01，说明各治疗药物对脑缺血均具有显着的治疗作用，能明显抑制COX 2表达，且脑心康片同一时间点的高、低剂量组比较差异显着，P＜0.01；72 h 脑心康片治疗组的疗效优于24 h脑心康片治疗组（高剂量），差异显着，P＜0.05，说明脑心康片对脑缺血的保护作用存在着一定的量效关系和时效关系。实验结果表明，在缺血早期，脑心康片具有明显的抗脑缺血、抑制COX 2表达的作用，并存在一定的量效关系及时效关系。
护理学基础论文 http://www.qikanba.com/
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1.1 动物Wistar大鼠，雄性，体质量（200±20）g，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供，动物许可证号：黑动字P00101006。大鼠自由进食、饮水，同等条件下饲养，手术前12 h禁食，不禁水。
1.2 药品与试剂脑心康片由蝙蝠葛酚性碱50%、水蛭素50%组成，黑龙江中医药大学实验中心制备。尼莫地平片，天津中央药业有限公司生产。银杏叶片，唐山荣大药业有限公司生产。COX 2抗体（COX 2山羊抗兔IgG多抗）稀释度：1:100，Santa Cruz公司。HRP标记的链霉卵白素-亲和素SP试剂盒、 S/P两步法检测试剂盒、PV6001二步法检测试剂盒、兔抗山羊IgG/HRP、 山羊抗鼠IgG/HRP， DAB显色试剂盒 ，均由北京中杉金桥生物技术有限公司生产。
2 方法
2.1 分组及给药方法Wistar大鼠雄性70只，体质量（200±20）g，按照体质量随机分为7组，每组10只。即脑心康片高剂量组（100 mg/kg）、脑心康片中剂量组（50 mg/kg）、脑心康片低剂量组（25 mg/kg）、尼莫地平组（21.6 mg/kg）、银杏叶片组（135 mg/kg）、模型对照组和假手术组（分别给等体积生理盐水）。各组均连续灌胃给药7 d，末次给药30 min后手术。大鼠脑缺血再灌注模型制备采用大鼠大脑中动脉线栓法制备不完全脑缺血模型，末次给药30 min 后，20%乌拉坦（1 g/kg，ip）麻醉，分离并结扎双侧颈总动脉及迷走神经45 min，然后松开再灌注2 h。假手术组只暴露血管不结扎，其余组均按照上述过程操作。
2.2 实验指标的检测方法在造模手术完成3～5 h，待大鼠苏醒后，能够完全自主活动时，进行第1次神经功能评分；分别于末次给药后24，48，72 h进行第2次神经功能评分。行为学评分后处死动物，迅速取出大脑置于冰盘上。将大脑分成两半，取左侧大脑皮层脑组织2 g制成单细胞悬液，检测大鼠神经细胞凋亡率。取右侧大脑制成1%的脑组织匀浆，采用免疫组织化学法检测大鼠脑组织COX 2蛋白表达。
3 结果
由表2可见模型组与假手术组比较有显着性差异，P＜0.01，说明造模是成功的。所有药物治疗组与假手术组比较，均有显着性差异，P＜0.01，与模型组比较差异亦显着，P＜0.01或P＜0.05。假手术组脑组织的神经细胞可测得凋亡峰，即细胞凋亡率不为0，说明正常的脑组织亦有少量的凋亡现象发生。
实验结果表明，脑心康片具有明显的抗脑缺血作用，对神经元细胞凋亡具有明显的抑制作用，随剂量增加，此作用明显增强。脑心康片高剂量抗脑缺血的作用要优于银杏叶片，与尼莫地平作用相当，中剂量弱于尼莫地平，但与银杏叶片作用相当，低剂量弱于尼莫地平和银杏叶片。经药物治疗后，各组的大鼠脑组织虽可见COX 2阳性细胞表达，但与模型对照组比较，均具有极显着差异，P＜0.01，说明各治疗药物对脑缺血均具有显着的治疗作用，能明显抑制COX 2表达，且脑心康片同一时间点的高、低剂量组比较差异显着，P＜0.01；72 h 脑心康片治疗组的疗效优于24 h脑心康片治疗组（高剂量），差异显着，P＜0.05，说明脑心康片对脑缺血的保护作用存在着一定的量效关系和时效关系。实验结果表明，在缺血早期，脑心康片具有明显的抗脑缺血、抑制COX 2表达的作用，并存在一定的量效关系及时效关系。
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