刺五加体外培养法研究-中医内科常见病论文
中医内科常见病论文 中医内科论文 内科护理论文发表 医学论文写作
历代本草医药记载，其有益气健脾、补肾安神之功效，已载入《中国药典》（1977年版）。自20世纪70年代末以来以刺五加为原料生产的各种片剂、冲剂、针剂和刺五加参茶等产品远销国外，因而使刺五加资源消耗与日俱增［1,2］。经过几十年掠夺式的采挖，严重地破坏了野生刺五加资源；在自然状态下刺五加结实的株丛少，种子产量低、质量差、传播力弱、休眠程度深［2］，并且扦插成活率低、插穗来源少、管理程序繁琐［3］，1992年出版的《中国植物红皮书》已把刺五加列为了渐危物种。
植物组织、细胞培养具有快速、高效、低成本的优点，因而近年来利用植物组织、细胞培养快速繁殖刺五加的研究成为热点。目前多数研究集中于刺五加体细胞胚胎发生［4］和人工种子包埋［5］方面，并取得了可喜成果，对茎尖的快速繁殖、遗传转化也有初步探索［4］。但关于刺五加的体外培养物生产刺五加主要药用成分--刺五加苷B、E的研究尚未见报道。本文以刺五加的体外培养物为试材，探讨了培养物类型、培养基种类、激素对刺五加苷B、E生产的影响。
利用组织培养生产药用植物次生代谢产物过程中，一般来讲，利用疏松易碎，生长速度快，利于悬浮培养的愈伤组织作为体外培养物较为多见，如红豆杉、茜草等［8］。刺五加在体外培养过程中较容易形成愈伤组织，接种后2周，即从切口处即可见淡黄色、颗粒状的愈伤组织产生，4周后整个外植体完全被愈伤组织所覆盖。将之每隔4周继代入相同培养基，可使其长期保持生命力［9］。但与其他植物不同的是，刺五加具备较好的愈伤组织发生能力的同时也具有良好的体细胞胚胎发生能力，且其体细胞胚胎自产生的同时其上即可产生大量的次级体细胞胚胎，次级体胚能继续产生三级、四级体胚［4］，加之体细胞胚胎中刺五加苷B、E含量较之愈伤组织更高，因此利用体细胞胚胎生产刺五加苷B、E更为便利。
在多数植物中，2,4-D只对胚性细胞或细胞团的形成起到诱导作用，而对体细胞胚胎的进一步发育与生长却是抑制的因素。但对于刺五加而言，不管其体胚发生途径如何，2,4-D对胚性细胞的诱导及体胚的分化均起到了促进作用［4］，而不同浓度处理中的刺五加苷B、E含量和质量间差异不大，因此对于利用体细胞胚胎生产刺五加苷B、E而言，从成本的角度出发，未添加激素的培养基较为适宜。
刺五加苷B、E产量较高的体细胞胚胎在2,4-D 0～1.0 mg/L范围内培养60 d内，刺五加苷B、E含量差异不显着，因此刺五加苷B、E的产量主要受激素对体细胞胚胎质量的影响。2,4-D浓度为0或0.1 mg/L时体外先期产生的体细胞胚胎逐渐产生大量次级体细胞胚胎，而0.5，1.0 mg/L的情况下次级体胚产生量极少，同时早期产生的体胚出现畸形现象。在1.0 mg/L的2,4-D的处理中，原有体细胞胚胎与培养基接触处逐渐产生愈伤组织，该愈伤组织整体继代入不含2,4-D的MS培养基后可产生新的体细胞胚胎，但其产生量较少。
MS培养基处理中体细胞胚胎的刺五加苷B含量显着高于1/2MS培养基处理的含量，刺五加苷E含量在两者之间差异不大。MS培养基中培养物质量略高于1/2MS培养基。在相同条件下培养60 d后MS培养基的刺五加苷B、E产量略优于1/2MS培养基的处理。MS培养基较之1/2MS培养基，大量元素增加1倍，其它成分相同。即在其它条件相当的情况下MS培养基中N源为1/2MS培养基的2倍。与天山雪莲组织培养中，提高培养基中NH4NO3浓度，有利于愈伤组织生长和总黄酮的形成相似［10］，MS培养基中刺五加的体细胞胚胎质量和刺五加苷B、E含量均略优于1/2MS培养基的处理。
关于内科护理论文 http://www.qikanba.com/
历代本草医药记载，其有益气健脾、补肾安神之功效，已载入《中国药典》（1977年版）。自20世纪70年代末以来以刺五加为原料生产的各种片剂、冲剂、针剂和刺五加参茶等产品远销国外，因而使刺五加资源消耗与日俱增［1,2］。经过几十年掠夺式的采挖，严重地破坏了野生刺五加资源；在自然状态下刺五加结实的株丛少，种子产量低、质量差、传播力弱、休眠程度深［2］，并且扦插成活率低、插穗来源少、管理程序繁琐［3］，1992年出版的《中国植物红皮书》已把刺五加列为了渐危物种。
植物组织、细胞培养具有快速、高效、低成本的优点，因而近年来利用植物组织、细胞培养快速繁殖刺五加的研究成为热点。目前多数研究集中于刺五加体细胞胚胎发生［4］和人工种子包埋［5］方面，并取得了可喜成果，对茎尖的快速繁殖、遗传转化也有初步探索［4］。但关于刺五加的体外培养物生产刺五加主要药用成分--刺五加苷B、E的研究尚未见报道。本文以刺五加的体外培养物为试材，探讨了培养物类型、培养基种类、激素对刺五加苷B、E生产的影响。
利用组织培养生产药用植物次生代谢产物过程中，一般来讲，利用疏松易碎，生长速度快，利于悬浮培养的愈伤组织作为体外培养物较为多见，如红豆杉、茜草等［8］。刺五加在体外培养过程中较容易形成愈伤组织，接种后2周，即从切口处即可见淡黄色、颗粒状的愈伤组织产生，4周后整个外植体完全被愈伤组织所覆盖。将之每隔4周继代入相同培养基，可使其长期保持生命力［9］。但与其他植物不同的是，刺五加具备较好的愈伤组织发生能力的同时也具有良好的体细胞胚胎发生能力，且其体细胞胚胎自产生的同时其上即可产生大量的次级体细胞胚胎，次级体胚能继续产生三级、四级体胚［4］，加之体细胞胚胎中刺五加苷B、E含量较之愈伤组织更高，因此利用体细胞胚胎生产刺五加苷B、E更为便利。
在多数植物中，2,4-D只对胚性细胞或细胞团的形成起到诱导作用，而对体细胞胚胎的进一步发育与生长却是抑制的因素。但对于刺五加而言，不管其体胚发生途径如何，2,4-D对胚性细胞的诱导及体胚的分化均起到了促进作用［4］，而不同浓度处理中的刺五加苷B、E含量和质量间差异不大，因此对于利用体细胞胚胎生产刺五加苷B、E而言，从成本的角度出发，未添加激素的培养基较为适宜。
刺五加苷B、E产量较高的体细胞胚胎在2,4-D 0～1.0 mg/L范围内培养60 d内，刺五加苷B、E含量差异不显着，因此刺五加苷B、E的产量主要受激素对体细胞胚胎质量的影响。2,4-D浓度为0或0.1 mg/L时体外先期产生的体细胞胚胎逐渐产生大量次级体细胞胚胎，而0.5，1.0 mg/L的情况下次级体胚产生量极少，同时早期产生的体胚出现畸形现象。在1.0 mg/L的2,4-D的处理中，原有体细胞胚胎与培养基接触处逐渐产生愈伤组织，该愈伤组织整体继代入不含2,4-D的MS培养基后可产生新的体细胞胚胎，但其产生量较少。
MS培养基处理中体细胞胚胎的刺五加苷B含量显着高于1/2MS培养基处理的含量，刺五加苷E含量在两者之间差异不大。MS培养基中培养物质量略高于1/2MS培养基。在相同条件下培养60 d后MS培养基的刺五加苷B、E产量略优于1/2MS培养基的处理。MS培养基较之1/2MS培养基，大量元素增加1倍，其它成分相同。即在其它条件相当的情况下MS培养基中N源为1/2MS培养基的2倍。与天山雪莲组织培养中，提高培养基中NH4NO3浓度，有利于愈伤组织生长和总黄酮的形成相似［10］，MS培养基中刺五加的体细胞胚胎质量和刺五加苷B、E含量均略优于1/2MS培养基的处理。
关于内科护理论文 http://www.qikanba.com/
我要分享到：
最新文章NEWS
- • 高职生道德信仰调查 本文版权由期刊吧所有
- • 医学论文中的统计问题
- • 医学论文投稿秘籍
- • 医学论文写作的程序介绍
- • 医学论文摘要的书写过程中存在的问题
- • 叙述医学研究论文标引用词的选择
- • 医学论文写作五大妙招
- • 如何进行儿科临床科学研究选题
- • 医学论文写作的流程
- • 医学论文统计设计方面存在问题总结
推荐期刊Tui Jian
Chinese Journal of Integrative Medicine
Journal of Genetics and Genomics
Journal of Bionic Engineering
Pedosphere
Chinese Journal of Structural Chemistry