甜菜碱对离体大鼠脂肪组织的作用研究-妇产科护士论文
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1 材料
1.1 药品和溶液甜菜碱、小牛血清白蛋白(BSA)、腺苷酸环化酶抑制剂SQ 22,536由美国Sigma公司提供。心得安北京第二制药厂生产,异搏定兰州制药厂生产,盐酸肾上腺素天津金耀氨基酸有限公司提供。Krebs液成分如下:NaCl 7.05 g/ L,KCl 0.44 g/ L,NaH2PO4 0.187 g/ L,MgCl2 0.244 g/ L,NaHCO3 1.29 g/ L,CaCl2 0.277 g/ L,C6H12O6 1.14 g/ L,其中CaCl2在溶液稀释后再加入,以免发生沉淀。MDA,T AOC测定试剂盒:购自南京建成生物工程研究所(批号为:20080924)。
1.2 动物清洁级,健康,SD大鼠50只,雌雄各半,体质量(250±20)g,兰州大学医学实验中心提供。
2 方法
2.1 实验分组
正常对照组,加入0.9%的生理盐水;盐酸肾上腺素组,加入10-6 mol/L盐酸肾上腺素;药物组,分别应用低剂量为10-7 mol/L,中剂量为10-6 mol/L和高剂量为10-5 mol/L的甜菜碱;机制探讨组,中剂量的甜菜碱分别加上10-5 mol/L的心得安,异搏定和SQ22,536。
实验时,大鼠脱臼处死,迅速取出腹膜后的脂肪组织,称重,每份脂肪块重量约(50.0±2.0) mg,然后剪成小块,置于37℃含小牛血清白蛋白(0.04 g/ml)的2 ml Krebs液中温育,在温育液中分别加入不同浓度的甜菜碱及阻断剂,加入药物容量各为20 μl。脂肪组织温育过程中持续通入95% O2和5% CO2的混合气体,使溶液的pH值保持在7.4。标本温育90 min后,吸取其温育上清液,用一次提取比色法测定FFA的含量;用TBA比色法测定MDA含量和比色法测定T AOC的含量。
2.2 观察指标及统计学处理FFA(μmol/L)=(OD测定管-OD空白管)/(OD标准管-OD空白管)×1000。
MDA(nmol/ml) =(OD测定管-OD测定空白管)/ (OD标准管-OD标准空白管)×标准品浓度。
T AOC(IU/ml)=(OD测定管- OD对照管)/0.01/30×3.7×1。所有数据经统计软件SPSS11.5处理,实验数据以 ±s表示,各组之间的比较用单因素方差分析,以P<0.05为差异有统计学意义。
3 结果
正常对照组相比,盐酸肾上腺素明显促进大鼠离体脂肪组织释放FFA(P=0.000);低剂量的甜菜碱对FFA的释放无明显的促进作用(P=0.367);而中,高剂量的甜菜碱可明显促进FFA释放(均为P=0.000)。与中剂量的甜菜碱组相比,用心得安阻断β受体,异搏定阻断L型Ca2+ 通道和抑制腺苷酸环化酶后,均部分降低了甜菜碱促进离体脂肪组织释放FFA的作用,分别降低了19.03%,18.38%,15.47%(分别为P=0.000,P=0.000,P=0.001)。
与正常对照组相比,盐酸肾上腺素明显降低了MDA,升高了T AOC(均为P=0.001);甜菜碱组的MDA降低了41.87%(P=0.000),而T AOC升高了40.54%(P=0.039) 。加心得安,异搏定和SQ 22,536后,MDA与甜菜碱组相比却分别升高了25%,33.66%和21.53%(均为P=0.000),而T AOC却分别降低了46.15%,51.92%,44.23% (分别为P=0.001,P=0.000,P=0.003)。这说明阻断剂明显抑制了甜菜碱降低MDA,升高T AOC的作用。
内科护理教育研究论文 http://www.qikanba.com/
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1.1 药品和溶液甜菜碱、小牛血清白蛋白(BSA)、腺苷酸环化酶抑制剂SQ 22,536由美国Sigma公司提供。心得安北京第二制药厂生产,异搏定兰州制药厂生产,盐酸肾上腺素天津金耀氨基酸有限公司提供。Krebs液成分如下:NaCl 7.05 g/ L,KCl 0.44 g/ L,NaH2PO4 0.187 g/ L,MgCl2 0.244 g/ L,NaHCO3 1.29 g/ L,CaCl2 0.277 g/ L,C6H12O6 1.14 g/ L,其中CaCl2在溶液稀释后再加入,以免发生沉淀。MDA,T AOC测定试剂盒:购自南京建成生物工程研究所(批号为:20080924)。
1.2 动物清洁级,健康,SD大鼠50只,雌雄各半,体质量(250±20)g,兰州大学医学实验中心提供。
2 方法
2.1 实验分组
正常对照组,加入0.9%的生理盐水;盐酸肾上腺素组,加入10-6 mol/L盐酸肾上腺素;药物组,分别应用低剂量为10-7 mol/L,中剂量为10-6 mol/L和高剂量为10-5 mol/L的甜菜碱;机制探讨组,中剂量的甜菜碱分别加上10-5 mol/L的心得安,异搏定和SQ22,536。
实验时,大鼠脱臼处死,迅速取出腹膜后的脂肪组织,称重,每份脂肪块重量约(50.0±2.0) mg,然后剪成小块,置于37℃含小牛血清白蛋白(0.04 g/ml)的2 ml Krebs液中温育,在温育液中分别加入不同浓度的甜菜碱及阻断剂,加入药物容量各为20 μl。脂肪组织温育过程中持续通入95% O2和5% CO2的混合气体,使溶液的pH值保持在7.4。标本温育90 min后,吸取其温育上清液,用一次提取比色法测定FFA的含量;用TBA比色法测定MDA含量和比色法测定T AOC的含量。
2.2 观察指标及统计学处理FFA(μmol/L)=(OD测定管-OD空白管)/(OD标准管-OD空白管)×1000。
MDA(nmol/ml) =(OD测定管-OD测定空白管)/ (OD标准管-OD标准空白管)×标准品浓度。
T AOC(IU/ml)=(OD测定管- OD对照管)/0.01/30×3.7×1。所有数据经统计软件SPSS11.5处理,实验数据以 ±s表示,各组之间的比较用单因素方差分析,以P<0.05为差异有统计学意义。
3 结果
正常对照组相比,盐酸肾上腺素明显促进大鼠离体脂肪组织释放FFA(P=0.000);低剂量的甜菜碱对FFA的释放无明显的促进作用(P=0.367);而中,高剂量的甜菜碱可明显促进FFA释放(均为P=0.000)。与中剂量的甜菜碱组相比,用心得安阻断β受体,异搏定阻断L型Ca2+ 通道和抑制腺苷酸环化酶后,均部分降低了甜菜碱促进离体脂肪组织释放FFA的作用,分别降低了19.03%,18.38%,15.47%(分别为P=0.000,P=0.000,P=0.001)。
与正常对照组相比,盐酸肾上腺素明显降低了MDA,升高了T AOC(均为P=0.001);甜菜碱组的MDA降低了41.87%(P=0.000),而T AOC升高了40.54%(P=0.039) 。加心得安,异搏定和SQ 22,536后,MDA与甜菜碱组相比却分别升高了25%,33.66%和21.53%(均为P=0.000),而T AOC却分别降低了46.15%,51.92%,44.23% (分别为P=0.001,P=0.000,P=0.003)。这说明阻断剂明显抑制了甜菜碱降低MDA,升高T AOC的作用。
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