中风芪红利水胶囊对脑缺血中氨基酸及水含量影响的研究-医学教育网护理论文
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1 材料与方法
1.1 药品中风芪红利水胶囊，0.5 g/粒，由河南中医学院第一附属医院制剂室提供。不同组所用中药来源相同，制作加工过程完全相同。步长脑心通胶囊，咸阳步长制药有限公司中药厂生产，每粒含药量为0.4 g。谷氨酸（Glu），天门冬氨酸（Asp）Sigma公司生产。
1.2 动物健康Wistar大鼠72只，普通级，雄性，体质量280～320 g，由河南省实验动物中心提供。常规饲料喂养，自由饮水，按时通风冲刷粪便，保持环境安静。
1.3 分组72只清洁级雄性Wistar大鼠随机分为假手术组，模型组，对照组（步长脑心通胶囊组），中风芪红利水胶囊高、中、低剂量组。灌胃前配置为相应浓度的混悬液。中风芪红利水胶囊分别制成相当于每毫升含0.054 g原药（低剂量组），相当于每毫升含0.108 g原药（中剂量组），相当于每毫升含0.162 g原药（高剂量）。步长脑心通胶囊灌胃前配置浓度为0.044 g/ml的混悬液，置4℃冰箱备用。
在大脑中动脉阻塞造模前，中风芪红利水胶囊低剂量组的中风芪红利水胶囊混悬液，按每天每100 g体质量0.054 g灌胃，两次/d，连续3 d，造模成功2 h灌胃一次。类似地，中风芪红利水胶囊中剂量组按每天每100 g体质量0.108 g给药，中风芪红利水胶囊高剂量组按每天每100 g体质量0.162 g给药，步长脑心通组按每天每100 g体质量0.054 g给药。用相同体积的生理盐水对缺血模型组和假手术组灌胃。相应的药物和生理盐水均分别于造模后2 h灌胃1次。
1.4 模型制备［3］
造模前缝合线在肝素中浸泡10 min。大鼠用10%水合氯醛（0.35 ml/100 g）腹腔注射麻醉后，颈部正中偏左切口，分离肩胛舌骨肌动脉，颈外动脉（external carotid artery,ECA）从周围筋膜和神经中分离，用电凝器将ECA分支烧断（甲状腺上动脉、枕动脉），在距ECA起始处1 cm结扎并电凝ECA主干。将圆头的缝合线（直径为0.3 mm长约5 cm）插入颈外动脉，并推进到颈内动脉直到感到轻微的抵抗。抵抗表明栓线已经到达Willis环。拴线进入深度距颈内动脉分叉处约18～20 mm。操作过程中通过红外线灯保持大鼠体温约37℃。假手术组，颈外动脉作插栓线的准备程序（结扎并灼断），但没有插入栓线，不阻塞大脑中动脉。
1.5 高效液相紫外探测
系统及谷氨酸、天门冬氨酸的测定［4］左侧大脑中动脉造模12 h时后将大鼠处死，迅速剥离左侧局部缺血脑的脑组织，放入液氮内保存。组织置于1%的冰冻磺基水杨酸匀浆，之后组织匀浆被离心（15 000 r/min，10 min）。然后，碱性条件下用2,4 二硝基氟苯柱前衍生。色谱条件：Agilent-C18，2,4 二硝基氟苯前置柱。流速为1 ml·min-1 ，测定波长为360 nm。流动相：流动相A，0.04 mol·L-1 六亚甲基四胺水溶液（用磷酸调pH = 6.3）。流动相B，50%乙腈，50%水。线性洗脱：当时间为0，12，20，40，48 min时，流动相中的B的浓度为0%，15%， 25%，45%，98% 。
1.6 含水量的测定
脑组织经电子天平称重后放入105℃干燥箱中干燥4 h，再称重脑含水量（%）=（脑湿重-脑干重）/脑湿重×100%。
2 结果
在制作左侧大脑中动脉阻塞模型过程中，由于造模不成功，或者死于麻醉药过量，或者死于血管破裂，共有14只大鼠脱失。
2.1 中风芪红利水胶囊对急性脑缺血大鼠脑组织中Glu、Asp含量的影响结果见表2。 结果表明：①与假手术组比较，急性脑缺血模型组脑组织中Glu、Asp均极显着升高（P=0.000）；②与缺血模型组相比，中风芪红利水胶囊高、中、低剂量组在降低脑组织中Glu含量方面效果极显着（P=0.000, P=0.001,P=0.018）；与缺血模型组比较，中风芪红利水胶囊高、中、低剂量组在降低脑组织中Asp含量方面效果极显着（P=0.000, P=0.031,P=0.05）；③与步长脑心通组比较，中风芪红利水胶囊高、中剂量组在降低脑组织中Glu含量方面效果明显优于步长脑心通胶囊组（P=0.000，P=0.045）；中风芪红利水胶囊低剂量组在降低脑组织中Glu含量方面与步长脑心通组比较无显着性差异（P=0.933）；与步长脑心通组比较，中风芪红利水胶囊各剂量组在降低脑组织中Asp含量方面与步长脑心通胶囊组无显着性差异（P>0.05）。
2.2 中风芪红利水胶囊对急性脑缺血大鼠脑组织含水量的影响
表2结果表明：①与假手术组比较，急性脑缺血模型组大鼠脑组织含水量显着升高（P=0.000）；②与急性脑缺血模型组比较，中风芪红利水胶囊高、中、低各剂量组能极显着降低脑组织含水量（P<0.01）；③中风芪红利水胶囊高、中剂量组较步长脑心通组能显着降低脑组织含水量（P=0.000, P=0.015），中风芪红利水胶囊低剂量组降低脑组织含水量与步长脑心通组相比无显着性差异（P=0.054）。
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1 材料与方法
1.1 药品中风芪红利水胶囊，0.5 g/粒，由河南中医学院第一附属医院制剂室提供。不同组所用中药来源相同，制作加工过程完全相同。步长脑心通胶囊，咸阳步长制药有限公司中药厂生产，每粒含药量为0.4 g。谷氨酸（Glu），天门冬氨酸（Asp）Sigma公司生产。
1.2 动物健康Wistar大鼠72只，普通级，雄性，体质量280～320 g，由河南省实验动物中心提供。常规饲料喂养，自由饮水，按时通风冲刷粪便，保持环境安静。
1.3 分组72只清洁级雄性Wistar大鼠随机分为假手术组，模型组，对照组（步长脑心通胶囊组），中风芪红利水胶囊高、中、低剂量组。灌胃前配置为相应浓度的混悬液。中风芪红利水胶囊分别制成相当于每毫升含0.054 g原药（低剂量组），相当于每毫升含0.108 g原药（中剂量组），相当于每毫升含0.162 g原药（高剂量）。步长脑心通胶囊灌胃前配置浓度为0.044 g/ml的混悬液，置4℃冰箱备用。
在大脑中动脉阻塞造模前，中风芪红利水胶囊低剂量组的中风芪红利水胶囊混悬液，按每天每100 g体质量0.054 g灌胃，两次/d，连续3 d，造模成功2 h灌胃一次。类似地，中风芪红利水胶囊中剂量组按每天每100 g体质量0.108 g给药，中风芪红利水胶囊高剂量组按每天每100 g体质量0.162 g给药，步长脑心通组按每天每100 g体质量0.054 g给药。用相同体积的生理盐水对缺血模型组和假手术组灌胃。相应的药物和生理盐水均分别于造模后2 h灌胃1次。
1.4 模型制备［3］
造模前缝合线在肝素中浸泡10 min。大鼠用10%水合氯醛（0.35 ml/100 g）腹腔注射麻醉后，颈部正中偏左切口，分离肩胛舌骨肌动脉，颈外动脉（external carotid artery,ECA）从周围筋膜和神经中分离，用电凝器将ECA分支烧断（甲状腺上动脉、枕动脉），在距ECA起始处1 cm结扎并电凝ECA主干。将圆头的缝合线（直径为0.3 mm长约5 cm）插入颈外动脉，并推进到颈内动脉直到感到轻微的抵抗。抵抗表明栓线已经到达Willis环。拴线进入深度距颈内动脉分叉处约18～20 mm。操作过程中通过红外线灯保持大鼠体温约37℃。假手术组，颈外动脉作插栓线的准备程序（结扎并灼断），但没有插入栓线，不阻塞大脑中动脉。
1.5 高效液相紫外探测
系统及谷氨酸、天门冬氨酸的测定［4］左侧大脑中动脉造模12 h时后将大鼠处死，迅速剥离左侧局部缺血脑的脑组织，放入液氮内保存。组织置于1%的冰冻磺基水杨酸匀浆，之后组织匀浆被离心（15 000 r/min，10 min）。然后，碱性条件下用2,4 二硝基氟苯柱前衍生。色谱条件：Agilent-C18，2,4 二硝基氟苯前置柱。流速为1 ml·min-1 ，测定波长为360 nm。流动相：流动相A，0.04 mol·L-1 六亚甲基四胺水溶液（用磷酸调pH = 6.3）。流动相B，50%乙腈，50%水。线性洗脱：当时间为0，12，20，40，48 min时，流动相中的B的浓度为0%，15%， 25%，45%，98% 。
1.6 含水量的测定
脑组织经电子天平称重后放入105℃干燥箱中干燥4 h，再称重脑含水量（%）=（脑湿重-脑干重）/脑湿重×100%。
2 结果
在制作左侧大脑中动脉阻塞模型过程中，由于造模不成功，或者死于麻醉药过量，或者死于血管破裂，共有14只大鼠脱失。
2.1 中风芪红利水胶囊对急性脑缺血大鼠脑组织中Glu、Asp含量的影响结果见表2。 结果表明：①与假手术组比较，急性脑缺血模型组脑组织中Glu、Asp均极显着升高（P=0.000）；②与缺血模型组相比，中风芪红利水胶囊高、中、低剂量组在降低脑组织中Glu含量方面效果极显着（P=0.000, P=0.001,P=0.018）；与缺血模型组比较，中风芪红利水胶囊高、中、低剂量组在降低脑组织中Asp含量方面效果极显着（P=0.000, P=0.031,P=0.05）；③与步长脑心通组比较，中风芪红利水胶囊高、中剂量组在降低脑组织中Glu含量方面效果明显优于步长脑心通胶囊组（P=0.000，P=0.045）；中风芪红利水胶囊低剂量组在降低脑组织中Glu含量方面与步长脑心通组比较无显着性差异（P=0.933）；与步长脑心通组比较，中风芪红利水胶囊各剂量组在降低脑组织中Asp含量方面与步长脑心通胶囊组无显着性差异（P>0.05）。
2.2 中风芪红利水胶囊对急性脑缺血大鼠脑组织含水量的影响
表2结果表明：①与假手术组比较，急性脑缺血模型组大鼠脑组织含水量显着升高（P=0.000）；②与急性脑缺血模型组比较，中风芪红利水胶囊高、中、低各剂量组能极显着降低脑组织含水量（P<0.01）；③中风芪红利水胶囊高、中剂量组较步长脑心通组能显着降低脑组织含水量（P=0.000, P=0.015），中风芪红利水胶囊低剂量组降低脑组织含水量与步长脑心通组相比无显着性差异（P=0.054）。
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