利用指纹图谱技术研究中药急性子的药性成分研究-股骨骨折的护理论文

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　　1 仪器、试剂与药材
　　美国Agillent 1100 高效液相色谱仪，二级阵列检测器。乙腈为色谱纯，水为娃哈哈纯净水。8批样品分别为山东、河南、西安、湖北、安徽、沈阳、四川、北京的药材，药材来源见表1。表1 急性子药材来源（略）
　　2   方法
　　2.1 色谱条件色谱柱为迪马公司C18（4.6 mm×200 mm）；流动相： 0.1%甲酸（A）- 乙腈（B），梯度洗脱程序为（B）；0～15 min，25 %～90 %；15～20 min，90%，20.01～25 min，25%。体积流量为1.0 ml/min，柱温为30℃，检测波长为260 nm。
　　2.2 供试品溶液制备取急性子药材粉末1.0 g，精密称定，置三角瓶中，精密加入甲醇20 ml，称重，过滤，超声提取20 min，取出，放凉，称重（必要时补足所失重量，摇匀），滤过，取续滤液经微孔滤膜滤过，溶液备用。
　　2.3 测定方法分别精密吸取不同地区（山东，河南，西安，湖北，安徽，沈阳，四川，北京）的急性子药材试品溶液5 μl，注入高效液相色谱仪，记录25 min 的色谱图即得。供试品色谱图中，以色谱峰（S峰）的保留时间和峰面积为参照，计算各指纹峰的相对保留时间和峰面积比值。
　　2.4 分析时间考察吸取供试品溶液S6溶液5 μl，注入高效液相色谱仪，运行55 min，记录色谱图，发现25 min以后已无明显色谱峰，因此分析时间定为25 min。
　　3 结果与分析
　　3.1 指纹图谱及技术参数［2］
　　3.1.1 共有峰的标定本实验以急性子的急黄新苷色谱峰为参照，确定其相对保留时间为1，计算其他主要色谱峰的相对保留时间，标定出13 个共有峰，结果见表2，指纹图谱见图1。
　　3.1.2 共有峰面积比值以急黄新苷面积作为1，计算各共有指纹的相对峰面积，结果各相对峰面积差异较大，表明不同地区的药材质量之间存在较大的差别。
　　3.1.3 谱峰匹配本实验根据样品相对保留时间，结合样品指纹图谱的谱峰形状特点对标定的共有峰进行匹配。结果所标定13个共有峰匹配无误，见图2。
　　急性子的指纹图谱的建立、分析与评价对8份急性子供试品的色谱分离图进行叠加比较可以看出，8份急性子的供试品HPLC指纹图谱具有较高的一致性，它们可作为鉴别急性子的必要条件之一。由表2可以看出13个峰相对峰面积相差较大，说明其生长条件不同；相同化学成分的含量有所不同，即药材质量间存在一定的差异，因此对不同的急性子供试品共有指纹峰的相对面积进行比较，可以鉴别不同来源急性子的质量。采用HPLC法分别建立药材HPLC-紫外指纹图谱，方法简单，重复性好，检测灵敏度高。
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