关于蛇足石杉的石杉碱甲研究-儿童护理论文
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含量测定
利用高效液相色谱法（HPLC）测定千层塔中石杉碱甲含量，简单、准确、选择性高［22］。孙远明等［23］采用HPLC法测得蛇足石杉中HupA的含量约为0.2‰ ，含量明显高于储滨孟等［24］用高效薄层扫描法测定的蛇足石杉中HupA 的含量0.066‰。顾月华、孙远明等［23，25，26］利用HPLC测定比较植物不同药用部位石杉碱甲的含量，结果表明，叶中HupA含量最高，茎次之，根最低。另外，研究得出不同产地HupA含量有一定差异，而提取方法之间差异不显着［18，23］。估计蛇足石杉全草中HupA 含量还随季节变化［18］。
提取分离工艺研究
由于石杉碱甲在千层塔中的含量极低且价格昂贵，所以提取方法的选择尤为重要。石杉碱甲提取的传统方法有酒石酸浸泡、盐酸渗漉、Soxhlet抽提以及用乙醇回流提取等。但是，这些方法的缺点是耗时、得率低以及杂质较多。近年来，微波协助提取（MAE）中草药及天然产物有效成分的研究已有报道，查圣华等［16］利用微波协助提取石杉碱甲和石杉碱乙，取得了很好的效果， 3次重复实验所得石杉碱甲和石杉碱乙回收率分别是93.7％和93.9%，与传统的回流提取工艺相比，过程时间从2h缩短为90s，回收率提高了10%以上。另外，查圣华等［17］室温下超声提取石杉碱甲和石杉碱乙，不仅缩短了提取时间，从原来的2 h缩短为15 min，减少了提取步骤，降低了溶剂耗量，而且使石杉碱甲和石杉碱乙回收率达到了97.3％。
一般的溶剂萃取、硅胶柱层析等方法进行分离，虽然能获得少量产品，但费时且得率低，难以规模化生产［18，19］。沈生荣等［19］则巧妙地利用HupA 在不同pH值下存在形态的变换特性，系统研究了HupA 高效提取的分离纯化技术，结果表明：pH对HupA的存在形态有很大影响，利用变换pH 的办法去除杂质效果理想；适量的活性炭及适宜的吸附时间和溶液浓度除杂效果显着；低温下氯仿的重结晶可得到纯度大于99%的高纯度HupA。陈建华等［20］则利用高速逆流色谱技术成功地从千层塔提取物中分离制备了纯度高于98%的石杉碱甲单体，并找到了合适的两相溶剂体系n-Hexane／n-BuOH／H2O（4∶1∶5，V／V／V）。
石杉碱甲（HupA）在我国首次由徐择邻教授从华南马尾杉中分离得到。石杉科植物中很多种都含有HupA，均是HupA的药物资源，但以蛇足石杉的含量相对较多，活性最好，已被广泛地应用于临床［15］。目前在药物分析方面，毛细管电泳（CE）技术，因其分离性能高、分析速度快、超微量进样、几乎没有废液，特别是无需考虑复杂组分对价格昂贵的色谱柱引起污染的特点，也越来越受到药物研究工作者的重视，有望成为未来石杉碱甲分离测定的更有效途径。 A. Ben Hameda等［21］使毛细管电泳测定石杉碱甲通过试验设计和人造神经系统网络的结合使用得到进一步优化，优化条件为醋酸缓冲液50 mM，pH 4.6，分离电压为10 kV，水力注入时间为10s，温度为25℃。
儿童病重护理论文 http://www.qikanba.com/
含量测定
利用高效液相色谱法（HPLC）测定千层塔中石杉碱甲含量，简单、准确、选择性高［22］。孙远明等［23］采用HPLC法测得蛇足石杉中HupA的含量约为0.2‰ ，含量明显高于储滨孟等［24］用高效薄层扫描法测定的蛇足石杉中HupA 的含量0.066‰。顾月华、孙远明等［23，25，26］利用HPLC测定比较植物不同药用部位石杉碱甲的含量，结果表明，叶中HupA含量最高，茎次之，根最低。另外，研究得出不同产地HupA含量有一定差异，而提取方法之间差异不显着［18，23］。估计蛇足石杉全草中HupA 含量还随季节变化［18］。
提取分离工艺研究
由于石杉碱甲在千层塔中的含量极低且价格昂贵，所以提取方法的选择尤为重要。石杉碱甲提取的传统方法有酒石酸浸泡、盐酸渗漉、Soxhlet抽提以及用乙醇回流提取等。但是，这些方法的缺点是耗时、得率低以及杂质较多。近年来，微波协助提取（MAE）中草药及天然产物有效成分的研究已有报道，查圣华等［16］利用微波协助提取石杉碱甲和石杉碱乙，取得了很好的效果， 3次重复实验所得石杉碱甲和石杉碱乙回收率分别是93.7％和93.9%，与传统的回流提取工艺相比，过程时间从2h缩短为90s，回收率提高了10%以上。另外，查圣华等［17］室温下超声提取石杉碱甲和石杉碱乙，不仅缩短了提取时间，从原来的2 h缩短为15 min，减少了提取步骤，降低了溶剂耗量，而且使石杉碱甲和石杉碱乙回收率达到了97.3％。
一般的溶剂萃取、硅胶柱层析等方法进行分离，虽然能获得少量产品，但费时且得率低，难以规模化生产［18，19］。沈生荣等［19］则巧妙地利用HupA 在不同pH值下存在形态的变换特性，系统研究了HupA 高效提取的分离纯化技术，结果表明：pH对HupA的存在形态有很大影响，利用变换pH 的办法去除杂质效果理想；适量的活性炭及适宜的吸附时间和溶液浓度除杂效果显着；低温下氯仿的重结晶可得到纯度大于99%的高纯度HupA。陈建华等［20］则利用高速逆流色谱技术成功地从千层塔提取物中分离制备了纯度高于98%的石杉碱甲单体，并找到了合适的两相溶剂体系n-Hexane／n-BuOH／H2O（4∶1∶5，V／V／V）。
石杉碱甲（HupA）在我国首次由徐择邻教授从华南马尾杉中分离得到。石杉科植物中很多种都含有HupA，均是HupA的药物资源，但以蛇足石杉的含量相对较多，活性最好，已被广泛地应用于临床［15］。目前在药物分析方面，毛细管电泳（CE）技术，因其分离性能高、分析速度快、超微量进样、几乎没有废液，特别是无需考虑复杂组分对价格昂贵的色谱柱引起污染的特点，也越来越受到药物研究工作者的重视，有望成为未来石杉碱甲分离测定的更有效途径。 A. Ben Hameda等［21］使毛细管电泳测定石杉碱甲通过试验设计和人造神经系统网络的结合使用得到进一步优化，优化条件为醋酸缓冲液50 mM，pH 4.6，分离电压为10 kV，水力注入时间为10s，温度为25℃。
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