大黄灵仙胶囊治疗胆石病的作用机理分析-消化科护理论文
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1 材料与仪器
1.1 材料、仪器健康家兔，体质量2.5～3.0 kg，雌雄不拘，普通级，广西中医学院实验动物中心提供，合格证号20060820。各生化试剂盒分别购于上海申能德赛诊断技术有限公司和伊利康生物技术有限公司。奥地利Biocell2010酶标仪、日立H-500透射电镜、BX-50-32001奥林巴斯光学显微镜、HPIAS-1000P病理图文分析系统等分别由广西医科大学中心实验室、广西中医学院一附院病理实验室提供。
1.2 药品造模用药：CCl4 分析纯（将CCl4与花生油以1∶2.5比例混合，37℃加热使充分溶解，制成40％CCl4溶液，）、胆固醇分析纯，均为上海国药集团产品。受试用药：大黄灵仙胶囊［1］ （生大黄150 g，威灵仙300 g，芒硝100 g，金钱草300 g，枳壳120 g，鸡内金100 g，泽兰150 g，柴胡120 g，郁金120 g，磁石120 g，黄芪300 g，甘草50 g），以上共计1 930 g生药，由广西中医学院第一附属医院制剂室提取965 ml浓缩药液，并无菌密封瓶装（生药量为2 g /ml）。
2 方法
2.1 动物分组及处理方法健康家兔46只，体质量2.5～3.0 kg，雌雄不拘，适应性喂养1周后随机分为5组，即正常对照组10只、慢性肝损伤组8只、肝硬化组8只、大黄灵仙胶囊大剂量组10只（用药量相当于成人用量的3倍）、大黄灵仙胶囊小剂量组10只（用药量相当于成人用量）。正常对照组普食喂养，每日灌服生理盐水4 ml/kg；慢性肝损伤组采用“慢性肝损伤兔动物模型”的建立［2］，普食喂养10周后，每日灌服生理盐水4 ml/kg；肝硬化模型组造模方法［2］：家兔称重后以2 ml/kg体质量，将40％CCl4溶液颈后皮下注射，每4天1次，以形成皮下丘状突起为宜［3］。造模后第10周开始每日灌服生理盐水8 ml/kg；大黄灵仙胶囊大、小剂量组第10周起每日灌服胆通胶囊提取液8 ml/kg，4 ml/kg。普食喂养。
2.2 检测指标及方法
2.2.1 胆囊结石成石观察结石判定标准为正常胆囊胆汁内无有形成分。肉眼观察胆汁内有无棕黑色成型颗粒或泥沙样沉淀；镜下观察有无结石微粒或结晶。
2.2.2 生化指标检测天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、γ-谷氨酰转肽酶（γ-GT）采用速率法检测；血清中总胆红素、直接胆红素、间接胆红素、血清总胆固醇、总胆汁酸、胆汁总胆汁酸、总胆固醇采用化学比色法检测；钙离子含量采用乙二胺四乙酸二钠法检测；磷脂含量酶显色法检测。
2.3 统计学处理所有数据采用SPSS14.0统计软件进行分析，计量资料以±s表示，两组间均数比较用t检验；两组间率的比较采用卡方检验；P＜0.05认为有统计学意义。
3 结果
家兔肝脏病理改变光镜下观察，慢性肝损伤组（见图1，2）：纤维组织增生，肝细胞水肿，局部气球样变，胆管增生，少许淋巴细胞浸润，汇管纤维间隔稍增宽。肝硬化组（见图3～4）：见假小叶形成，小叶内中央静脉缺如，细胞排列紊乱，多数细胞水肿，局部气球样变，小胆管增生、伴有淋巴细胞浸润。大黄灵仙大剂量组（见图5～6）：细胞排列规则，少数肝细胞水肿，小叶结构清晰，汇管区结构正常，无炎性细胞浸润，未见小胆管增生。大黄灵仙小剂量组（见图7～8）：肝细胞排列规则，中度水肿，局部气球样变，汇管区纤维增宽，胆管增生，少量淋巴细胞浸润。
3.3 家兔电镜肝细胞超微结构的改变电镜观察：大黄灵仙小剂量治疗组图（见图9～12）：正常结构可见，大量滑面内质网、大量胶原纤维。线粒体固缩，嵴可见。大黄灵仙大剂量治疗组（见图13～16）：正常结构可见，糖原多，滑面内质网多，粗面内质网少，大量胶原纤维。核模较完整，线粒体多正常。
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1 材料与仪器
1.1 材料、仪器健康家兔，体质量2.5～3.0 kg，雌雄不拘，普通级，广西中医学院实验动物中心提供，合格证号20060820。各生化试剂盒分别购于上海申能德赛诊断技术有限公司和伊利康生物技术有限公司。奥地利Biocell2010酶标仪、日立H-500透射电镜、BX-50-32001奥林巴斯光学显微镜、HPIAS-1000P病理图文分析系统等分别由广西医科大学中心实验室、广西中医学院一附院病理实验室提供。
1.2 药品造模用药：CCl4 分析纯（将CCl4与花生油以1∶2.5比例混合，37℃加热使充分溶解，制成40％CCl4溶液，）、胆固醇分析纯，均为上海国药集团产品。受试用药：大黄灵仙胶囊［1］ （生大黄150 g，威灵仙300 g，芒硝100 g，金钱草300 g，枳壳120 g，鸡内金100 g，泽兰150 g，柴胡120 g，郁金120 g，磁石120 g，黄芪300 g，甘草50 g），以上共计1 930 g生药，由广西中医学院第一附属医院制剂室提取965 ml浓缩药液，并无菌密封瓶装（生药量为2 g /ml）。
2 方法
2.1 动物分组及处理方法健康家兔46只，体质量2.5～3.0 kg，雌雄不拘，适应性喂养1周后随机分为5组，即正常对照组10只、慢性肝损伤组8只、肝硬化组8只、大黄灵仙胶囊大剂量组10只（用药量相当于成人用量的3倍）、大黄灵仙胶囊小剂量组10只（用药量相当于成人用量）。正常对照组普食喂养，每日灌服生理盐水4 ml/kg；慢性肝损伤组采用“慢性肝损伤兔动物模型”的建立［2］，普食喂养10周后，每日灌服生理盐水4 ml/kg；肝硬化模型组造模方法［2］：家兔称重后以2 ml/kg体质量，将40％CCl4溶液颈后皮下注射，每4天1次，以形成皮下丘状突起为宜［3］。造模后第10周开始每日灌服生理盐水8 ml/kg；大黄灵仙胶囊大、小剂量组第10周起每日灌服胆通胶囊提取液8 ml/kg，4 ml/kg。普食喂养。
2.2 检测指标及方法
2.2.1 胆囊结石成石观察结石判定标准为正常胆囊胆汁内无有形成分。肉眼观察胆汁内有无棕黑色成型颗粒或泥沙样沉淀；镜下观察有无结石微粒或结晶。
2.2.2 生化指标检测天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、γ-谷氨酰转肽酶（γ-GT）采用速率法检测；血清中总胆红素、直接胆红素、间接胆红素、血清总胆固醇、总胆汁酸、胆汁总胆汁酸、总胆固醇采用化学比色法检测；钙离子含量采用乙二胺四乙酸二钠法检测；磷脂含量酶显色法检测。
2.3 统计学处理所有数据采用SPSS14.0统计软件进行分析，计量资料以±s表示，两组间均数比较用t检验；两组间率的比较采用卡方检验；P＜0.05认为有统计学意义。
3 结果
家兔肝脏病理改变光镜下观察，慢性肝损伤组（见图1，2）：纤维组织增生，肝细胞水肿，局部气球样变，胆管增生，少许淋巴细胞浸润，汇管纤维间隔稍增宽。肝硬化组（见图3～4）：见假小叶形成，小叶内中央静脉缺如，细胞排列紊乱，多数细胞水肿，局部气球样变，小胆管增生、伴有淋巴细胞浸润。大黄灵仙大剂量组（见图5～6）：细胞排列规则，少数肝细胞水肿，小叶结构清晰，汇管区结构正常，无炎性细胞浸润，未见小胆管增生。大黄灵仙小剂量组（见图7～8）：肝细胞排列规则，中度水肿，局部气球样变，汇管区纤维增宽，胆管增生，少量淋巴细胞浸润。
3.3 家兔电镜肝细胞超微结构的改变电镜观察：大黄灵仙小剂量治疗组图（见图9～12）：正常结构可见，大量滑面内质网、大量胶原纤维。线粒体固缩，嵴可见。大黄灵仙大剂量治疗组（见图13～16）：正常结构可见，糖原多，滑面内质网多，粗面内质网少，大量胶原纤维。核模较完整，线粒体多正常。
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