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寻找防治复苏后大鼠甲状腺损伤的新方法 国家核心期刊有哪些

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　　1 材料与方法

　　1.1 实验动物及分组 健康雄性SD大鼠24只，体质量（274.96±29.59 ）g，日龄49～60 d，由中国科学院上海分院实验动物中心提供。将SD大鼠随机分为对照组、常规复苏组、贝科能治疗组，每组8只大鼠。

　　1.2 CPR模型的制备 术前禁食12 h，颈部正中切口，行气管插管，分别于左侧颈外静脉、右侧颈总动脉监测动脉血压。操作完成并稳定30 min后经颈静脉注射琥珀酰胆碱（1.5 mg/kg）抑制呼吸，并应用0.5 mol/L冰氯化钾（4 ℃，1.2 mL/kg）停搏液致大鼠心搏骤停，持续5 min后行心肺复苏，出现自主心律、脉搏且收缩压≥8 kPa，持续10 min以上判定为自主循环恢复（ROSC），ROSC后2 h逐步撤离呼吸机，拔除气管插管和动静脉导管并缝合切口。贝科能治疗组于心搏恢复时将贝科能（按复合剂量1支/10 kg）用生理 盐水稀释后腹腔注入，复苏后 12 h 再给同等剂量;常规复苏组腹腔注射生理盐水0.3 mL，对照组仅进行插管等手术操作，不进行心搏骤停和心肺复苏。本文所有实验参数设计和记录均参照实验研究的Utstein模式［5］。

　　1.3 标本采集 术后24 h取大鼠左侧甲状腺组织，用锐利刀片切成3块1 mm3 大小的组织块放入液氮冷藏，用于检测MDA含量及SOD、Na+ -K+ -ATPase活力。

　　1.4 主要试剂 注射用贝科能，北京双鹭药业股份有限公司生产;MDA、SOD及Na+ -K+ -ATPase测定试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

　　1.5 标本检测

　　1.5.1MDA含量的测定 以四已氧基丙烷为MDA标准品，用硫代巴比妥酸法测定荧光强度，绘制标准曲线。然后，取100 g/L甲状腺组织匀浆液 100 μL ，在与标准曲线相同条件下反应，以空白管调零，测定样品荧光强度，并根据标准曲线计算甲状腺组织MDA含量。

　　1.5.2SOD活力的测定 采用改良的黄嘌呤氧化酶法，取10 g/L甲状腺组织匀浆10 μL，按试剂盒说明书操作，在550 nm处比色，并计算SOD活力。

　　1.5.3Na+ -K+ -ATPase活力测定 采用定磷法，严格按试剂盒说明操作。

　　2 结果

　　常规复苏组大鼠甲状腺组织MDA较对照组及贝科能组显著增高（ t=16.75、2.60，P < 0.01 ）。而常规复苏组甲状腺组织Na+ -K+ -ATPase活力显著低于贝科能组（ t=2.60，P <0.05）。常规复苏组及贝科能组甲状腺组织SOD活力、Na+ -K+ -ATPase活力明显低于对照组，差异具有显著统计学意义（ t= 2.97～ 8.85，P <0.01）。见表1。

　　表1 各组甲状腺组织中MDA含量及SOD、Na+ -K+ -ATPase活力比较（略）

　　3 讨论

　　贝科能是由新鲜酵母中提取的含有辅酶Ⅰ、三磷酸腺苷、辅酶A、黄素核苷酸、还原型谷光甘肽（GSH）、腺苷蛋氨酸（Ade-SD4）、核苷酸、1，6二磷酸果糖（FDP）等多种辅酶及生命活性物质的复合制剂，这些辅酶均为细胞物质代谢和能量代谢所必需，如FDP通过刺激磷酸果糖激酶的活性，聚增细胞内高能磷酸池，提高细胞内ATP浓度，恢复细胞极化状态，从而有益于炎症、休克、缺血、损伤等状态下的细胞能量代谢及对葡萄糖的利用，以促进细胞的修复和功能的改善。而GSH与Ade-SD4可以相互转换从而保持GSH的抗氧化活性，并可以中和机体病理状态下产生的游离自由基，对抗自由基对组织产生的继发性病理损害［6］;辅酶Ⅰ除了是产生能量必需的辅酶外还是强大的抗氧化剂;辅酶A则参与机体上百种生化反应，是必需的辅酶。辅酶Ⅰ与辅酶A两者互相转化补充，共同参与细胞的能量合成，以提高病理状态下的低能状态。本实验结果显示，复苏后甲状腺组织中MDA含量均显著增高，同时SOD、Na+ -K+ -ATPase活力显著低于对照组，说明氧自由基（OFR）介导的脂质过氧化损伤、细胞能量代谢障碍，参与了复苏后甲状腺滤泡细胞急性损伤。贝科能治疗组甲状腺组织中MDA含量较常规复苏组明显下降，而作为体内主要自由基清除系统的SOD活力较常规复苏组显著增高，Na+ -K+ -ATPase活力较常规复苏组明显增强，说明贝科能在减少OFR的产生，提高SOD活力，改善细胞能量代谢等方面起着积极作用。
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