不同粒径茯苓药粉的茯苓多糖溶出度试验研究-浙江省医学论文
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1 仪器与试药
1.1 仪器
激光粒度测定仪（Winner3001型激光粒度测定仪，济南微纳仪器有限公司）；粉碎机（BFMT6BI型翻滚式贝利粉碎机）；中草药粉碎机（FW135中草药粉碎机，天津市泰斯特仪器有限公司）；溶出仪（ZRS-8G智能溶出试验仪，天津大学无线电厂），紫外分光光度计（UV-9200紫外可见分光光度计，北京瑞利分析仪器公司）。
1.2 样品茯苓（湖南海川医药有限公司提供）
葡萄糖对照品（中国药物生物制品检定所），苯酚，浓硫酸均为分析纯。取苯酚加热蒸馏收集182℃ 的馏分，吸取此馏分10 ml加水至200 ml置棕色瓶内，放冰箱备用。精密称取干燥恒重的葡萄糖标准品14.5 mg加蒸馏水溶解并定容至250 ml 容量瓶中，即得。
2 方法与结果
2.1 茯苓超微粉的制备
取市购茯苓药材1 000 g，40～50℃干燥，分为4份。两份用普通粉碎机分别粉碎成100目和200目的常规细粉，另两份用贝利粉碎机分别粉碎成300目和400目的超微粉。
2.2 茯苓多糖含量测定的实验条件
以硫酸-苯酚法、紫外分光光度法进行测定，通过预试确定最佳反应条件为：加入5%苯酚试剂1.2 ml，浓硫酸4.5 ml，室温下反应并放置20 min，在490 nm处测定吸光度A。
2.3 方法学考察
2.3.1 标准曲线的绘制
精密吸取葡萄糖对照品溶液0.0，0.1，0.2，0.4，0.6，0.8,1.0 ml分别置于20 ml试管中，分别加蒸馏水至1.0 ml，加入5％苯酚溶液1.2 ml，混匀后加入浓硫酸4.5 ml，充分混合，室温放置20 min，在490 nm处测定吸光度A。 求得标准曲线的回归方程：Y=9.320 7 X-0.005（X：对照品含量；Y：吸光度）， 相关系数r=0.999 6（n=7），表明在0.058～0.58 mg范围内葡萄糖含量与吸光度之间有良好的线性关系。
2.3.2 精密度实验
精密吸取葡萄糖对照品溶液1.0 ml 5份，分别置于20 ml试管中，同“2.2”项操作，测定吸光度A，RSD=0.96%（n=5），表明仪器精密度良好。精密吸取供试品溶液1.0 ml 6份，分别置于20 ml试管中，同“2.2”项操作，测定吸光度A，RSD=1.02%（ n=6），表明重复性良好。精密称取已知含量的样品，准确加入对照品一定量，依法测定，计算回收率。分别精密称取适量的不同粒径的茯苓药粉，分别置于900 ml溶出介质中，（37±0.5）℃水浴，转速为60 r·min-1，6 h后，取样2 ml，用0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液在上述色谱条件下测定不同粒径的茯苓药粉的茯苓多糖的含量，作为不同粒径茯苓药粉的100％溶出时茯苓多糖的溶出量。
2.5 溶出度测定
为了使样品在溶剂中具有良好溶出曲线，通过预试确定：转速60 r·min-1，水浴温度（37±0.5）℃，溶出介质 900 ml人工胃液，分别于 2，4，6，8，10，15，20，25，30，45，60 min取样2ml，用0.45 μm微孔滤膜滤过，同时补充同温度同体积的溶出介质，取续滤液1.0 ml，置于20 ml试管中，同“2.2”项操作，分别测定其吸光度A，根据回归方程求出茯苓多糖含量，计算累积溶出百分率。根据威布尔分布用 Casiofx.180p拟合直线， 提取溶出度参数T50（药物溶出50％所需时间）、Td（药物溶出63.2％所需时间）、m（溶出曲线斜率）。
2.6 数据处理对T50，Td，m进行方差分析，用t检验进行多组均数间两两比较。结果表明不同粒径的茯苓药粉的茯苓多糖的溶出参数间的差异具有统计学意义（P＜0.05）。300目茯苓药粉组与400目茯苓药粉组的溶出度参数T50比较差异无统计学意义（P＞0.05）。
生物医学工程论文 http://www.qikanba.com/
1 仪器与试药
1.1 仪器
激光粒度测定仪（Winner3001型激光粒度测定仪，济南微纳仪器有限公司）；粉碎机（BFMT6BI型翻滚式贝利粉碎机）；中草药粉碎机（FW135中草药粉碎机，天津市泰斯特仪器有限公司）；溶出仪（ZRS-8G智能溶出试验仪，天津大学无线电厂），紫外分光光度计（UV-9200紫外可见分光光度计，北京瑞利分析仪器公司）。
1.2 样品茯苓（湖南海川医药有限公司提供）
葡萄糖对照品（中国药物生物制品检定所），苯酚，浓硫酸均为分析纯。取苯酚加热蒸馏收集182℃ 的馏分，吸取此馏分10 ml加水至200 ml置棕色瓶内，放冰箱备用。精密称取干燥恒重的葡萄糖标准品14.5 mg加蒸馏水溶解并定容至250 ml 容量瓶中，即得。
2 方法与结果
2.1 茯苓超微粉的制备
取市购茯苓药材1 000 g，40～50℃干燥，分为4份。两份用普通粉碎机分别粉碎成100目和200目的常规细粉，另两份用贝利粉碎机分别粉碎成300目和400目的超微粉。
2.2 茯苓多糖含量测定的实验条件
以硫酸-苯酚法、紫外分光光度法进行测定，通过预试确定最佳反应条件为：加入5%苯酚试剂1.2 ml，浓硫酸4.5 ml，室温下反应并放置20 min，在490 nm处测定吸光度A。
2.3 方法学考察
2.3.1 标准曲线的绘制
精密吸取葡萄糖对照品溶液0.0，0.1，0.2，0.4，0.6，0.8,1.0 ml分别置于20 ml试管中，分别加蒸馏水至1.0 ml，加入5％苯酚溶液1.2 ml，混匀后加入浓硫酸4.5 ml，充分混合，室温放置20 min，在490 nm处测定吸光度A。 求得标准曲线的回归方程：Y=9.320 7 X-0.005（X：对照品含量；Y：吸光度）， 相关系数r=0.999 6（n=7），表明在0.058～0.58 mg范围内葡萄糖含量与吸光度之间有良好的线性关系。
2.3.2 精密度实验
精密吸取葡萄糖对照品溶液1.0 ml 5份，分别置于20 ml试管中，同“2.2”项操作，测定吸光度A，RSD=0.96%（n=5），表明仪器精密度良好。精密吸取供试品溶液1.0 ml 6份，分别置于20 ml试管中，同“2.2”项操作，测定吸光度A，RSD=1.02%（ n=6），表明重复性良好。精密称取已知含量的样品，准确加入对照品一定量，依法测定，计算回收率。分别精密称取适量的不同粒径的茯苓药粉，分别置于900 ml溶出介质中，（37±0.5）℃水浴，转速为60 r·min-1，6 h后，取样2 ml，用0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液在上述色谱条件下测定不同粒径的茯苓药粉的茯苓多糖的含量，作为不同粒径茯苓药粉的100％溶出时茯苓多糖的溶出量。
2.5 溶出度测定
为了使样品在溶剂中具有良好溶出曲线，通过预试确定：转速60 r·min-1，水浴温度（37±0.5）℃，溶出介质 900 ml人工胃液，分别于 2，4，6，8，10，15，20，25，30，45，60 min取样2ml，用0.45 μm微孔滤膜滤过，同时补充同温度同体积的溶出介质，取续滤液1.0 ml，置于20 ml试管中，同“2.2”项操作，分别测定其吸光度A，根据回归方程求出茯苓多糖含量，计算累积溶出百分率。根据威布尔分布用 Casiofx.180p拟合直线， 提取溶出度参数T50（药物溶出50％所需时间）、Td（药物溶出63.2％所需时间）、m（溶出曲线斜率）。
2.6 数据处理对T50，Td，m进行方差分析，用t检验进行多组均数间两两比较。结果表明不同粒径的茯苓药粉的茯苓多糖的溶出参数间的差异具有统计学意义（P＜0.05）。300目茯苓药粉组与400目茯苓药粉组的溶出度参数T50比较差异无统计学意义（P＞0.05）。
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