采用正交实验优选莲白消癌丸提取工艺条件-专科护理毕业论文

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　　1 仪器与材料
　　1.1 仪器岛津高效液相色谱系统，包括LC-10ATVP泵，SPD-10AVP紫外光检测器，science柱温箱，Ckchrom-ehromatography数据采集系统； BP211D型分析天平（德国赛多利斯）。
　　1.2 材料本处方中药材均购自郑州市药材公司，经河南中医学院陈随清教授鉴定均为正品。野黄芩苷对照品（中国药品生物制品检定所提供，供含量测定用，批号：880-200701，含量96.14%）；甲醇为色谱纯，其它试剂均为分析纯。半枝莲药材中野黄芩苷的含量为0.57％。
　　2 方法与结果
　　2.1 提取方法设计该制剂采用水煎提，正交实验方法对加水量（因素A）、煎煮次数（因素B）、煎煮时间（因素C）3个因素进行考察，根据预试结果采用L9（34）正交表安排实验，因素水平设计见表1。将处方中提取药材按照L9（34）正交表规定的因素水平煎煮提取，滤过合并提取液，减压浓缩至相对密度1.3（60℃），60℃减压干燥，得提取物。
　　2.2 考察指标测定
　　2.2.1   水总浸出物的测定方法分别精密量取水提药液20 ml，按浸出物测定法（《中国药典》2005年版Ⅰ部附录XA）操作，以20 ml提取液相当于原药材量作为分母，以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的浸出率。
　　2.2.2 野黄芩苷含量测定方法色谱条件：色谱柱为依利特 C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为甲醇-水-醋酸（33∶63∶4）［4］；检测波长335 nm；流速1.0 ml/min；柱温为室温。
　　供试品溶液的制备：取工艺考察项下方法制备的样品干浸膏约6 g，精密称定，加石油醚（60～90℃）100 ml回流2 h，弃去醚液，残渣挥干，加甲醇100 ml，80 ml回流提取两次，1 h/次，过滤，合并滤液浓缩，甲醇定容于100 ml量瓶中，即得［5］。系统适应性试验：分别精密吸取对照品溶液、阴性样品溶液、供试品溶液各10 μl，进样。结果表明，野黄芩苷色谱峰理论塔板数大于1 500，阴性样品在野黄芩苷色谱峰位置无干扰。结果见图1。
　　2.2.3 工作曲线的制备从野黄芩苷对照品中分别精密量取2，4，6，8，10 μl，注入液相色谱仪中测定。以野黄芩苷进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，计算得回归方程为Y=1 006 970.06X-14 550.57，r=0.998 6，其中：Y-代表峰面积，X-代表进样量。表明野黄芩苷进样量在0.16～0.8 μg与峰面积呈良好的线性关系。
　　2.2.4 样品测定取按各提取工艺制备的样品约6.0 g，精密称定，按照供试品溶液的制备方法制备供试液并测定。结果见表2。
　　由上表：采用综合加权评分的方法，分别将水总浸出物得率、野黄芩苷提取率两项指标加权评分。处方中半枝莲为君药，其主成分野黄芩苷的权重系数设为0.6，水总浸出物得率项的权重系数为0.4。故综合加权评分公式为Y=0.4X（Y1+69.8）+0.6X（Y2+52.4）。对正交实验的结果进行数据处理和方差分析。结果见表2～3。方差分析显示，A因素的影响具有高度显着性意义、C因素的影响具有显着性意义。由极差直观分析可知A>C>B，因此确定，莲白消癌丸水提取的最佳工艺为A3B1C1。即提取3次，分别加水8倍量、6倍量、4倍量，提取时间分别为2，1.5，1 h。
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