淫羊藿苷提取工艺研究-医药电子商务论文
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1 仪器与试药
1.1 仪器LC-10AD高效液相色谱仪（日本岛津公司），CLASS-VP色谱工作站，GL-CQ-250S超声波清洗机（上海杰理科技有限公司），AE-240电子天平（上海梅特勒一托利多仪器有限公司）。W一201B数显恒温水浴锅（上海申腾生物技术有限公司），R-201旋转蒸发器 （上海申胜生物技术有限公司）。
1.2 材料与试剂生精汤中各药材（菟丝子、淫羊藿、熟地、补骨脂、女贞子、山药、鸡血藤、刘寄奴、王不留行、制香附、生麦芽）购自浙江中医药大学饮片厂，并经浙江中医药大学姚振生教授鉴定。
淫羊藿苷对照品购自中国药品生物制品检定所，批号：110737-200312，乙腈、甲醇（供高效液相色谱测定用）为色谱纯，超纯水，其余为分析纯。
2.2 淫羊藿苷提取工艺研究
2.2.1 响应面分析法
因素的选取及方案分析按照处方分别称取生精汤各药材，共20.4 g，根据Box-Benhnken中心组合实验设计原理［6］，综合单因素试验的结果，选取料液比、提取时间、乙醇浓度3个因素，每个自变量的低、中、高水平分别以-1，0，1编码，以淫羊藿苷得率作为响应值（Y）。采用SAS9.1.3对实验结果进行回归分析。试验因素与水平见表1，实验方案及结果见表2。
2.2.2 实验结果分析采用SAS9.1.3软件对表2中不同试验条件下所得到的淫羊藿苷得率进行响应面回归分析，得拟合方程：Y1=0.808 7 + 0.291 65 X1 + 0.044 25 X2+ 0.059 575 X3+ 0.021 2 X12- 0.172 6 X1X2 + 0.0377 X1X3- 0.093 6 X22 - 0.003 25 X2X3- 0.348 2 X32。
由表3可知，在置信区间95%时，方程线性相关系数R= 0.989 1。证明回归方程真实、可靠，具有统计学意义，可用于替代实验点对实验结果进行分析。方程各自变量（Xn）方差分析表明，方程一次项、二次项和交互项对多糖提取得率具有显着性影响，因此各因素与响应值之间不是简单的一次关系。并进一步对回归方程各项作显着性检验。
由表４可知，液料比对淫羊藿苷提取得率具有显着性影响，而提取时间、醇浓度则无显着性影响。根据回归分析结果作出相应曲面图和等值线图，见图1～3。利用SAS软件，进行分析计算，得淫羊藿苷的最佳提取工艺条件为：液料比29.7∶1，提取时间1.78 h，乙醇浓度71.8%，在此条件下淫羊藿苷的理论提取得率为1.14 μg/g。结合实际操作方便和方差分析结果，确定最佳提取工艺条件为：加药材30倍量的70%的乙醇提取1.75 h，共提取两次。
3结果
淫羊藿苷能延缓卵巢卵母细胞巢破裂，抑制原始卵泡的发育启动，减少卵泡的消耗，使处于静止期的原始卵泡数增多［5］。淫羊藿总黄酮为生精汤治疗女性多囊卵巢综合征的主要有效成分之一。响应面分析法［6］以回归方法作为函数估算的工具，将多因子试验中因子与试验结果的相互关系函数化，可研究因子与响应值之间、因子与因子之间的相互关系，并可进行优化。本文采用响应面分析法，以提取物淫羊藿苷含量为指标进行实验，考察药材的料液比、乙醇浓度、提取时间等因素对提取工艺的影响，优选淫羊藿苷的最佳提取工艺，以便提出更多的有效成分，提高治疗效果。
医药方面论文 http://www.qikanba.com/
1 仪器与试药
1.1 仪器LC-10AD高效液相色谱仪（日本岛津公司），CLASS-VP色谱工作站，GL-CQ-250S超声波清洗机（上海杰理科技有限公司），AE-240电子天平（上海梅特勒一托利多仪器有限公司）。W一201B数显恒温水浴锅（上海申腾生物技术有限公司），R-201旋转蒸发器 （上海申胜生物技术有限公司）。
1.2 材料与试剂生精汤中各药材（菟丝子、淫羊藿、熟地、补骨脂、女贞子、山药、鸡血藤、刘寄奴、王不留行、制香附、生麦芽）购自浙江中医药大学饮片厂，并经浙江中医药大学姚振生教授鉴定。
淫羊藿苷对照品购自中国药品生物制品检定所，批号：110737-200312，乙腈、甲醇（供高效液相色谱测定用）为色谱纯，超纯水，其余为分析纯。
2.2 淫羊藿苷提取工艺研究
2.2.1 响应面分析法
因素的选取及方案分析按照处方分别称取生精汤各药材，共20.4 g，根据Box-Benhnken中心组合实验设计原理［6］，综合单因素试验的结果，选取料液比、提取时间、乙醇浓度3个因素，每个自变量的低、中、高水平分别以-1，0，1编码，以淫羊藿苷得率作为响应值（Y）。采用SAS9.1.3对实验结果进行回归分析。试验因素与水平见表1，实验方案及结果见表2。
2.2.2 实验结果分析采用SAS9.1.3软件对表2中不同试验条件下所得到的淫羊藿苷得率进行响应面回归分析，得拟合方程：Y1=0.808 7 + 0.291 65 X1 + 0.044 25 X2+ 0.059 575 X3+ 0.021 2 X12- 0.172 6 X1X2 + 0.0377 X1X3- 0.093 6 X22 - 0.003 25 X2X3- 0.348 2 X32。
由表3可知，在置信区间95%时，方程线性相关系数R= 0.989 1。证明回归方程真实、可靠，具有统计学意义，可用于替代实验点对实验结果进行分析。方程各自变量（Xn）方差分析表明，方程一次项、二次项和交互项对多糖提取得率具有显着性影响，因此各因素与响应值之间不是简单的一次关系。并进一步对回归方程各项作显着性检验。
由表４可知，液料比对淫羊藿苷提取得率具有显着性影响，而提取时间、醇浓度则无显着性影响。根据回归分析结果作出相应曲面图和等值线图，见图1～3。利用SAS软件，进行分析计算，得淫羊藿苷的最佳提取工艺条件为：液料比29.7∶1，提取时间1.78 h，乙醇浓度71.8%，在此条件下淫羊藿苷的理论提取得率为1.14 μg/g。结合实际操作方便和方差分析结果，确定最佳提取工艺条件为：加药材30倍量的70%的乙醇提取1.75 h，共提取两次。
3结果
淫羊藿苷能延缓卵巢卵母细胞巢破裂，抑制原始卵泡的发育启动，减少卵泡的消耗，使处于静止期的原始卵泡数增多［5］。淫羊藿总黄酮为生精汤治疗女性多囊卵巢综合征的主要有效成分之一。响应面分析法［6］以回归方法作为函数估算的工具，将多因子试验中因子与试验结果的相互关系函数化，可研究因子与响应值之间、因子与因子之间的相互关系，并可进行优化。本文采用响应面分析法，以提取物淫羊藿苷含量为指标进行实验，考察药材的料液比、乙醇浓度、提取时间等因素对提取工艺的影响，优选淫羊藿苷的最佳提取工艺，以便提出更多的有效成分，提高治疗效果。
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