白英水提物的抗癌作用机制实验结果分析-药品销售论文
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白英为茄科多年生草质藤本植物，又称白毛藤。白英作为传统抗癌中药在肿瘤治疗方面应用广泛而且历史悠久，其主要成分含有甾体皂苷类、生物碱类及有机酸等多种化合物，具有抗肿瘤、抗炎、抗过敏等药理作用［1］。本实验室曾发现白英水提物能诱导宫颈癌Hela细胞和肺癌A549细胞凋亡［2，3］，但它对胃癌细胞凋亡的作用尚未能阐明。
细胞凋亡是一个多基因参与的细胞死亡过程，从启动到完成都受到多种基因的严格调控。在凋亡的信号传导途径中，目前已知的凋亡途径有线粒体途径、死亡受体途径和内质网途径。这3条传导途径中caspase （半胱氨酸蛋白酶） 家族起了至关重要的作用。caspase家族通常以低活性的酶原形式存在，通过不同方式被激活，特异性地裂解相关底物发挥放大并传递凋亡信号以及执行细胞凋亡的功能。而caspase-3在整个传导过程中处于核心地位，一旦 caspase-3被激活，即可作用于多种底物，继而引发一系列特异性凋亡。
细胞凋亡的线粒体途径受bcl-2基因家族的调控，bcl-2家族成员按结构和功能的不同，分为抑制凋亡的家族成员（包括 bcl-2，bcl-xl等）和促进凋亡的家族成员（包括bcl-XS、bax、bak、bid、bad和bim等） 两大类。这两类物质相互结合、彼此抑制，依据其数量的相对多少决定凋亡的发生与否。
Bcl-xl蛋白和BH3结构域凋亡诱导蛋白都是bcl-2家族中的成员，在细胞线粒体凋亡途径中扮演着非常重要的角色。前者的作用是抑制凋亡，后者是促进凋亡。本实验结果显示，白英水提物作用SGC-7901细胞48 h后，bid mRNA表达均上调，而bcl-xl mRNA表达均下调。其作用程度随着药液浓度的升高而增大，表明白英水提物对bcl-xl和bid基因参与SGC-7901细胞凋亡有较好的调控作用。一方面，Bcl-xl蛋白可以抑制线粒体上的一种高电导通道蛋白（ MTP）的开放，减少细胞色素C（Cyt c）和凋亡诱导因子 （AIF）等的释放，从而抑制凋亡；而Bid蛋白则可以增加线粒体膜Cyt c和AIF的释放［6～7］ 。
另一方面，Bid蛋白还可以与线粒体胞质面的Bcl-xl结合形成异二聚体，阻止Bcl-xl和Apaf结合，抑制其抗凋亡活性。此外，当Fas/TNF介导的死亡受体被活化后，导致细胞中的Bid被caspase-8切割形成具有活性的tBid （truncated tBid） ，并从细胞质逐渐向线粒体转位并寡聚到线立体 ［10］上，从而改变线立体膜的通透性，引起Cyt c等释放［11，12］，诱导凋亡。
近年来有关白英抗肿瘤作用的研究不断增多［2～5］。本研究采用MTT法观察了白英对人胃癌SGC-7901细胞增殖的抑制作用，结果表明，12.5，25，50 mg/ml白英对人SGC-7901细胞具有较强的抑制作用，且随着药物浓度的提高和作用时间的延长，抑制作用显着增高，表现出剂量和时间依赖性。
荧光显微镜观察显示，白英各浓度组在处理SGC-7901细胞48 h后可见部分细胞体积缩小，胞浆凝缩，染色质嗜碱性增强凝聚成圆形、新月形附在核膜周边，核固缩呈均一的致密物，有些细胞还可见细胞核断裂，细胞膜起泡，包裹部分染色质以出芽的方式释放出凋亡小体等典型细胞凋亡特征。同时还观察到伴随着白英浓度的增高细胞数量逐渐减少，凋亡细胞则逐渐增多。表明白英呈剂量依赖性的诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡。
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白英为茄科多年生草质藤本植物，又称白毛藤。白英作为传统抗癌中药在肿瘤治疗方面应用广泛而且历史悠久，其主要成分含有甾体皂苷类、生物碱类及有机酸等多种化合物，具有抗肿瘤、抗炎、抗过敏等药理作用［1］。本实验室曾发现白英水提物能诱导宫颈癌Hela细胞和肺癌A549细胞凋亡［2，3］，但它对胃癌细胞凋亡的作用尚未能阐明。
细胞凋亡是一个多基因参与的细胞死亡过程，从启动到完成都受到多种基因的严格调控。在凋亡的信号传导途径中，目前已知的凋亡途径有线粒体途径、死亡受体途径和内质网途径。这3条传导途径中caspase （半胱氨酸蛋白酶） 家族起了至关重要的作用。caspase家族通常以低活性的酶原形式存在，通过不同方式被激活，特异性地裂解相关底物发挥放大并传递凋亡信号以及执行细胞凋亡的功能。而caspase-3在整个传导过程中处于核心地位，一旦 caspase-3被激活，即可作用于多种底物，继而引发一系列特异性凋亡。
细胞凋亡的线粒体途径受bcl-2基因家族的调控，bcl-2家族成员按结构和功能的不同，分为抑制凋亡的家族成员（包括 bcl-2，bcl-xl等）和促进凋亡的家族成员（包括bcl-XS、bax、bak、bid、bad和bim等） 两大类。这两类物质相互结合、彼此抑制，依据其数量的相对多少决定凋亡的发生与否。
Bcl-xl蛋白和BH3结构域凋亡诱导蛋白都是bcl-2家族中的成员，在细胞线粒体凋亡途径中扮演着非常重要的角色。前者的作用是抑制凋亡，后者是促进凋亡。本实验结果显示，白英水提物作用SGC-7901细胞48 h后，bid mRNA表达均上调，而bcl-xl mRNA表达均下调。其作用程度随着药液浓度的升高而增大，表明白英水提物对bcl-xl和bid基因参与SGC-7901细胞凋亡有较好的调控作用。一方面，Bcl-xl蛋白可以抑制线粒体上的一种高电导通道蛋白（ MTP）的开放，减少细胞色素C（Cyt c）和凋亡诱导因子 （AIF）等的释放，从而抑制凋亡；而Bid蛋白则可以增加线粒体膜Cyt c和AIF的释放［6～7］ 。
另一方面，Bid蛋白还可以与线粒体胞质面的Bcl-xl结合形成异二聚体，阻止Bcl-xl和Apaf结合，抑制其抗凋亡活性。此外，当Fas/TNF介导的死亡受体被活化后，导致细胞中的Bid被caspase-8切割形成具有活性的tBid （truncated tBid） ，并从细胞质逐渐向线粒体转位并寡聚到线立体 ［10］上，从而改变线立体膜的通透性，引起Cyt c等释放［11，12］，诱导凋亡。
近年来有关白英抗肿瘤作用的研究不断增多［2～5］。本研究采用MTT法观察了白英对人胃癌SGC-7901细胞增殖的抑制作用，结果表明，12.5，25，50 mg/ml白英对人SGC-7901细胞具有较强的抑制作用，且随着药物浓度的提高和作用时间的延长，抑制作用显着增高，表现出剂量和时间依赖性。
荧光显微镜观察显示，白英各浓度组在处理SGC-7901细胞48 h后可见部分细胞体积缩小，胞浆凝缩，染色质嗜碱性增强凝聚成圆形、新月形附在核膜周边，核固缩呈均一的致密物，有些细胞还可见细胞核断裂，细胞膜起泡，包裹部分染色质以出芽的方式释放出凋亡小体等典型细胞凋亡特征。同时还观察到伴随着白英浓度的增高细胞数量逐渐减少，凋亡细胞则逐渐增多。表明白英呈剂量依赖性的诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡。
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