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白木香组织培养及植株再生研究-医药学毕业论文

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  白木香以含有带棕黑色树脂的干燥心材入药,具行气止痛、温中止呕、纳气平喘功效,用于治疗胸腹胀痛、胃寒呕吐、心腹疼痛、禁口毒痢、大肠虚闭、气逆、喘息等症。近年来,由于人们对沉香的大量采挖,白木香原始林遭到严重破坏,白木香野生资源量不断减少,被列为国家二级保护野生植物,已载入《中国植物红皮书》和《广东省珍稀濒危植物图谱》。白木香种子为顽拗型,含油率高,极易变质及丧失萌发力,天然更新能力弱。白木香的繁殖方式主要为种子繁殖。随采随播的发芽率可高达80%以上;贮存15 d后,发芽率降至50%以下;贮存3个月的种子完全丧失发芽率[2]。
  1/2MS0培养基配方为1/2MS,不加任何生长激素,而愈伤组织的诱导率高达100%。1/2MB0.2,MIZ等培养基生长激素含量较低,其诱导率大于80%。而其他培养基如1/2MB0.05,MB0.5,MBN0.05等,生长激素浓度偏高,则诱导率在60%~75%之间。在MBD、1/2MBN和MBN等培养基中的诱导率几乎为0,说明2,4-D及NAA这些激素的存在,并不适合愈伤组织的诱导,这与兰芹英[2]等的研究结果有所出入,其研究指出胚轴在1/2MBN的诱导率为54.17%,而在MBN中的诱导率为80%。
  在MIZ培养基中,添加了玉米素(ZT),愈伤组织诱导率高(89%),而且愈伤组织质地致密,颜色鲜绿,出苗数多(87.64%)。在1/2MS0培养基中,诱导率虽然极高(100%),但其愈伤组织易褐化,而在1/2MB0.2培养基中愈伤组织则易玻璃化。1/2MB0.5,MB0.5及MB0.05培养基的出苗率虽然也比较高(>70%),但是由于其愈伤组织的出愈率不高(<75%),因此,也不是诱导白木香胚愈伤组织的理想培养基。而在其他培养基上形成的愈伤组织质地都较疏松,而且出苗的数量较少。综上所述,添加了玉米素(ZT)的MIZ培养基,从出愈率,愈伤组织的情况和出苗率来考察,是在本实验所采用的众多培养基中,效果最好,最适合用于白木香胚愈伤组织诱导的培养基。
  关于白木香的组织培养,叶勤法[3]曾用白木香嫩枝的叶片和茎段诱导愈伤组织,产生不定芽,再进行生根诱导,形成完整植株。兰芹英等[4]曾对白木香成熟胚的组织培养及植株再生进行研究,结果表明,白木香胚轴接种在MS + BA 0.1 mg/L + NAA 0.01 mg/L和1/2MS + BA 0.1 mg/L + NAA 0.01 mg/L培养基上,愈伤组织诱导率分别为80.00% 和83.33%。2,4-D2 mg/L加BA0.5~2 mg/L和ZT1 mg/L加1AA0.1 mg/L有利于子叶诱导愈伤组织,诱导率为100% 。1/2MS + BA 2 mg/L + NAA 0.5 mg/L + 蔗糖3%有利丛芽的诱导,但苗易玻璃化,而1/2MS + KT 2 mg/L + LAA 0.02mg/L对侧芽的诱导和生长较有利。杜勤等[5]探讨了不同外植体、光照条件、激素对诱导白木香愈伤组织产生的影响。
  本实验在前人研究的基础上,通过各种激素成分的正交实验设计,以白木香成熟胚为材料,诱导出愈伤组织和丛芽,从而筛选出适宜白木香丛芽诱导的最佳配方组合。本研究通过组织培养技术,探讨白木香离体再生的不同培养条件,以期为白木香种质资源的保存和优质种苗的离体快繁生产及选育奠定基础。
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