木皂苷抑制癌细胞增殖作用研究-制药专业毕业论文
制药专业毕业论文 中医学毕业论文 中医护理论文 药学毕业论文
木根土称三通花根，箭当树根，以根皮常用，味辛，微苦，性平，归肝、肾经，具祛风除湿、健脾利水、利尿消肿、活血散瘀、镇痛消炎、接骨、健胃之功效，用于治疗急慢性肝炎、脾阳虚衰之水湿停滞、肝硬化腹水、肾炎水肿、淋巴结炎、消渴、胃痛腹泻、跌打损伤、骨折、风湿痛、白带、淋病、雪崩、瘰疬、肿瘤等［7］。
1 材料与仪器
1.1 药品与试剂
木皂苷由泸州医学院药物研究所提供，临用前用生理盐水配制并稀释；顺铂（DDP）注射液：云南个旧生物药业有限公司，批号：070601。RPMI1640培养基：GIBCO公司产品；胎牛血清：天津灏洋生物制品科技责任有限公司；CCK-8（cell counting kit-8）：碧云天生物技术研究所。
1.2 细胞株和瘤株
人红白血病细胞株K562、人肝癌细胞株HepG2、人结肠癌细胞株LOVO和人乳腺癌细胞株MDA-MB-231均引自四川大学华西医学中心，采用含10%胎牛血清的RPMI1640 pH 7.4的完全培养基，在37℃，5% CO2条件下常规培养。小鼠肝癌H22和小鼠肉瘤S180，引自四川大学华西医学中心。
1.3 动物
昆明种小鼠，18～22 g，雌性，由泸州医学院动物实验中心提供，合格证号：川实动证第17号。
1.4 仪器
酶标仪：北京普朗新技术有限公司，型号：DNM-9602；倒置相差显微镜：日本Olympus公司，型号：CKX41；CO2培养箱：日本Sanyo公司，型号：MCO-15A；DNM-9602；电子天平：上海民桥精密科学仪器有限公司，型号：FA1104N；离心机：北京医用离心机厂，型号：LG10-3A。
2 方法
分别取对数生长期的K562、HepG2、LOVO和MDA-MB-231细胞，0.25 胰酶制成单个细胞悬液，细胞浓度为1×108/L,接种于96孔板，每孔90 μl，悬浮细胞K562接种后立即加药，其它贴壁细胞培养24 h待其贴壁后加药。每孔加药10 μl，每个浓度3个复孔， 木皂苷终浓度分别为31.25，62.5，125，250，500 mg · L-1，阴性组加等体积无血清RPMI1640，继续培养48 h，每孔加入CCK-8 10 μl继续培养1 h，酶标仪450 nm波长下检测各孔吸光度A值，按下列公式计算抑制率。细胞增殖抑制率%=［1-（ A给药组-A空白孔）/（ A阴性对照组-A空白孔）］×100 ，LOGIT法计算半数抑制浓度（IC50）。
参考文献方法［5］，选接种8 d健康状况良好的H22，S180瘤源小鼠，腹部皮肤消毒后，注射器抽取腹水，离心后弃上清，无菌生理盐水稀释至细胞浓度为1×1010/L，每只小鼠右侧腋部皮下接种0.2 ml以形成实体瘤。次日将小鼠随机分为4组，每组10只，分别为模型组（生理盐水）、阳性对照组（DDP，1 mg · kg-1）、 木皂苷低剂量组（50 mg · kg-1）、 木皂苷高剂量组（100 mg · kg-1）。DDP腹腔注射给药，其余均为灌胃给药，1次/d，连续给药10 d。参考文献方法［5］，模型组中20％小鼠的肿瘤小于400 mg或平均重量小于1mg，均为肿瘤生长不良的表现，实验资料应作废，本实验无上述情况，造模成功。末次给药24 h后颈椎脱臼处死小鼠，称体重，计算体重差（结束体重-开始体重），剥取瘤块、脾脏和胸腺并称重，按照下列公式计算抑瘤率、脾指数和胸腺指数。抑瘤率（%）＝（1-模型组平均瘤重/实验组平均瘤重）×100％，脾（胸腺）指数＝［脾（胸腺）重量（mg）/体质量（g）］×10。
3 结果
木皂苷可在较高浓度时抑制多种人癌细胞的增殖，对K562，HepG2，LOVO和MDA-MB-231细胞的IC50分别为（209.1±32.69），（273.3±20.4），（293.6±5.85），（329.67±26.42） mg · L-1，均大于30 mg · L-1，揭示其体外抗肿瘤活性不强。浓度-抑制率曲线见图1。
木皂苷能明显抑制小鼠肝癌H22和小鼠肉瘤S180的生长，显示出较强的体内抗瘤活性，与模型组比较差异有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）。 木皂苷不降低荷瘤小鼠的脾指数和胸腺指数，与模型组比较差异无统计学意义。 木皂苷可提高荷瘤小鼠的体重，与生理盐水组比较差异无统计学意义。
本实验结果显示， 木皂苷有一定的抑制人癌细胞增殖的作用，但活性不强，（IC50在209.1～329.67 mg · L-1之间）。 木皂苷灌胃给药，对小鼠移植性肿瘤H22和S180的生长有一定的抑制作用，且随药物浓度增加抑瘤率增加，抑瘤率虽不及阳性对照组（DDP），但 木皂苷各剂量组并不降低小鼠的免疫功能，给药后小鼠一般状态良好，体重有所增加。从实验结果分析，考虑 木皂苷的抑瘤效应可能是通过机体免疫系统而发挥作用。
基础护理论文 http://www.qikanba.com/
木根土称三通花根，箭当树根，以根皮常用，味辛，微苦，性平，归肝、肾经，具祛风除湿、健脾利水、利尿消肿、活血散瘀、镇痛消炎、接骨、健胃之功效，用于治疗急慢性肝炎、脾阳虚衰之水湿停滞、肝硬化腹水、肾炎水肿、淋巴结炎、消渴、胃痛腹泻、跌打损伤、骨折、风湿痛、白带、淋病、雪崩、瘰疬、肿瘤等［7］。
1 材料与仪器
1.1 药品与试剂
木皂苷由泸州医学院药物研究所提供，临用前用生理盐水配制并稀释；顺铂（DDP）注射液：云南个旧生物药业有限公司，批号：070601。RPMI1640培养基：GIBCO公司产品；胎牛血清：天津灏洋生物制品科技责任有限公司；CCK-8（cell counting kit-8）：碧云天生物技术研究所。
1.2 细胞株和瘤株
人红白血病细胞株K562、人肝癌细胞株HepG2、人结肠癌细胞株LOVO和人乳腺癌细胞株MDA-MB-231均引自四川大学华西医学中心，采用含10%胎牛血清的RPMI1640 pH 7.4的完全培养基，在37℃，5% CO2条件下常规培养。小鼠肝癌H22和小鼠肉瘤S180，引自四川大学华西医学中心。
1.3 动物
昆明种小鼠，18～22 g，雌性，由泸州医学院动物实验中心提供，合格证号：川实动证第17号。
1.4 仪器
酶标仪：北京普朗新技术有限公司，型号：DNM-9602；倒置相差显微镜：日本Olympus公司，型号：CKX41；CO2培养箱：日本Sanyo公司，型号：MCO-15A；DNM-9602；电子天平：上海民桥精密科学仪器有限公司，型号：FA1104N；离心机：北京医用离心机厂，型号：LG10-3A。
2 方法
分别取对数生长期的K562、HepG2、LOVO和MDA-MB-231细胞，0.25 胰酶制成单个细胞悬液，细胞浓度为1×108/L,接种于96孔板，每孔90 μl，悬浮细胞K562接种后立即加药，其它贴壁细胞培养24 h待其贴壁后加药。每孔加药10 μl，每个浓度3个复孔， 木皂苷终浓度分别为31.25，62.5，125，250，500 mg · L-1，阴性组加等体积无血清RPMI1640，继续培养48 h，每孔加入CCK-8 10 μl继续培养1 h，酶标仪450 nm波长下检测各孔吸光度A值，按下列公式计算抑制率。细胞增殖抑制率%=［1-（ A给药组-A空白孔）/（ A阴性对照组-A空白孔）］×100 ，LOGIT法计算半数抑制浓度（IC50）。
参考文献方法［5］，选接种8 d健康状况良好的H22，S180瘤源小鼠，腹部皮肤消毒后，注射器抽取腹水，离心后弃上清，无菌生理盐水稀释至细胞浓度为1×1010/L，每只小鼠右侧腋部皮下接种0.2 ml以形成实体瘤。次日将小鼠随机分为4组，每组10只，分别为模型组（生理盐水）、阳性对照组（DDP，1 mg · kg-1）、 木皂苷低剂量组（50 mg · kg-1）、 木皂苷高剂量组（100 mg · kg-1）。DDP腹腔注射给药，其余均为灌胃给药，1次/d，连续给药10 d。参考文献方法［5］，模型组中20％小鼠的肿瘤小于400 mg或平均重量小于1mg，均为肿瘤生长不良的表现，实验资料应作废，本实验无上述情况，造模成功。末次给药24 h后颈椎脱臼处死小鼠，称体重，计算体重差（结束体重-开始体重），剥取瘤块、脾脏和胸腺并称重，按照下列公式计算抑瘤率、脾指数和胸腺指数。抑瘤率（%）＝（1-模型组平均瘤重/实验组平均瘤重）×100％，脾（胸腺）指数＝［脾（胸腺）重量（mg）/体质量（g）］×10。
3 结果
木皂苷可在较高浓度时抑制多种人癌细胞的增殖，对K562，HepG2，LOVO和MDA-MB-231细胞的IC50分别为（209.1±32.69），（273.3±20.4），（293.6±5.85），（329.67±26.42） mg · L-1，均大于30 mg · L-1，揭示其体外抗肿瘤活性不强。浓度-抑制率曲线见图1。
木皂苷能明显抑制小鼠肝癌H22和小鼠肉瘤S180的生长，显示出较强的体内抗瘤活性，与模型组比较差异有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）。 木皂苷不降低荷瘤小鼠的脾指数和胸腺指数，与模型组比较差异无统计学意义。 木皂苷可提高荷瘤小鼠的体重，与生理盐水组比较差异无统计学意义。
本实验结果显示， 木皂苷有一定的抑制人癌细胞增殖的作用，但活性不强，（IC50在209.1～329.67 mg · L-1之间）。 木皂苷灌胃给药，对小鼠移植性肿瘤H22和S180的生长有一定的抑制作用，且随药物浓度增加抑瘤率增加，抑瘤率虽不及阳性对照组（DDP），但 木皂苷各剂量组并不降低小鼠的免疫功能，给药后小鼠一般状态良好，体重有所增加。从实验结果分析，考虑 木皂苷的抑瘤效应可能是通过机体免疫系统而发挥作用。
基础护理论文 http://www.qikanba.com/
我要分享到：
最新文章NEWS
- • 高职生道德信仰调查 本文版权由期刊吧所有
- • 医学论文中的统计问题
- • 医学论文投稿秘籍
- • 医学论文写作的程序介绍
- • 医学论文摘要的书写过程中存在的问题
- • 叙述医学研究论文标引用词的选择
- • 医学论文写作五大妙招
- • 如何进行儿科临床科学研究选题
- • 医学论文写作的流程
- • 医学论文统计设计方面存在问题总结
推荐期刊Tui Jian
Chinese Journal of Integrative Medicine
Journal of Genetics and Genomics
Journal of Bionic Engineering
Pedosphere
Chinese Journal of Structural Chemistry