茯苓药材药用价值实验研究-核心医学期刊
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1 仪器与试药
1.1 仪器
LC-20AT高效液相色谱仪（日本岛津）；大连伊利特Hypersil-ODS （4.6 mm×250 mm）高效液相色谱柱；工作站：CBM-102；检测器：SPD-20A；TP 600超声波提取器（北京天鹏电子新技术有限公司）；BS210S型电子天平（北京塞多利斯公司）。
1.2 试剂
乙腈为色谱纯，磷酸为分析纯，水为双蒸水（经0.45μm微孔滤膜滤过），其他试剂均为分析纯。
1.3 药材
茯苓药材分别采集于宛西制药有限公司GAP基地、河南商城等地共12批（样品来源及编号见表1）。按照本课题组研究的规范化炮制工艺进行浸泡、润蒸并切制成不同规格。表1 样品来源及编号（略）
2 方法与结果
2.1 色谱条件大连伊利特Hypersil-ODS （4.6 mm×250 mm）高效液相色谱柱；检测器：SPD-20A；工作站：CBM-102；流动相：乙腈-0.05%磷酸水，梯度洗脱（见表2）；流速：1.0 ml/min；柱温：30℃；检测波长：242 nm 。
2.2 供试品溶液的制备
取茯苓饮片，粉碎，过40目筛。取粉末约1.0 g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，加95%乙醇25 ml，超声提取20 min，过滤，残渣加95%乙醇重复提取两次，合并滤液并挥干乙醇，用色谱甲醇定容于10 ml容量瓶中，临用前用0.45 μm微孔滤膜过滤，即得供试品溶液。
2.3 方法学考察
2.3.1 精密度实验精密
称取编号3药材，制备供试品溶液，连续进样5次，共有峰的相对保留时间RSD<0.452%，相对峰面积RSD<2.084%，结果表明仪器精密度良好。
2.3.2 稳定性实验精密
称取编号3药材，制备供试品溶液，24 h内连续进样5次，共有峰的相对保留时间RSD<0.636%，相对峰面积RSD<1.166%，结果表明常温下茯苓药材的供试品溶液24 h内稳定性良好。
2.3.3 重复性实验精密
称取编号3药材5份，制备供试品溶液，连续进样，共有峰的相对保留时间RSD<0.454%，相对峰面积RSD<2.122%，结果表明重复性良好。
超声不同的时间所得供试品溶液的指纹图谱无明显差异，但超声20 min提取供试品溶液所得的指纹图谱特征峰的峰面积之和大于超声30 min，超声40 min的峰面积之和，同时考虑到提取时间较短，故选用超声时间为20 min。从12批茯苓饮片的分析结果来看，样本整体相似度较高，其中样本11的相似度偏低，其主要原因可能是样品11来自于新疆茯苓药材，地理位置、气候、土壤等因素的差别造成茯苓药材成分的差异，从而导致炮制加工的茯苓饮片存在差异，但是差异不是很显着（相关系数法大于0.840 3，夹角余弦法大于0.906 8）。
核心医学期刊目录 http://www.qikanba.com/
1 仪器与试药
1.1 仪器
LC-20AT高效液相色谱仪（日本岛津）；大连伊利特Hypersil-ODS （4.6 mm×250 mm）高效液相色谱柱；工作站：CBM-102；检测器：SPD-20A；TP 600超声波提取器（北京天鹏电子新技术有限公司）；BS210S型电子天平（北京塞多利斯公司）。
1.2 试剂
乙腈为色谱纯，磷酸为分析纯，水为双蒸水（经0.45μm微孔滤膜滤过），其他试剂均为分析纯。
1.3 药材
茯苓药材分别采集于宛西制药有限公司GAP基地、河南商城等地共12批（样品来源及编号见表1）。按照本课题组研究的规范化炮制工艺进行浸泡、润蒸并切制成不同规格。表1 样品来源及编号（略）
2 方法与结果
2.1 色谱条件大连伊利特Hypersil-ODS （4.6 mm×250 mm）高效液相色谱柱；检测器：SPD-20A；工作站：CBM-102；流动相：乙腈-0.05%磷酸水，梯度洗脱（见表2）；流速：1.0 ml/min；柱温：30℃；检测波长：242 nm 。
2.2 供试品溶液的制备
取茯苓饮片，粉碎，过40目筛。取粉末约1.0 g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，加95%乙醇25 ml，超声提取20 min，过滤，残渣加95%乙醇重复提取两次，合并滤液并挥干乙醇，用色谱甲醇定容于10 ml容量瓶中，临用前用0.45 μm微孔滤膜过滤，即得供试品溶液。
2.3 方法学考察
2.3.1 精密度实验精密
称取编号3药材，制备供试品溶液，连续进样5次，共有峰的相对保留时间RSD<0.452%，相对峰面积RSD<2.084%，结果表明仪器精密度良好。
2.3.2 稳定性实验精密
称取编号3药材，制备供试品溶液，24 h内连续进样5次，共有峰的相对保留时间RSD<0.636%，相对峰面积RSD<1.166%，结果表明常温下茯苓药材的供试品溶液24 h内稳定性良好。
2.3.3 重复性实验精密
称取编号3药材5份，制备供试品溶液，连续进样，共有峰的相对保留时间RSD<0.454%，相对峰面积RSD<2.122%，结果表明重复性良好。
超声不同的时间所得供试品溶液的指纹图谱无明显差异，但超声20 min提取供试品溶液所得的指纹图谱特征峰的峰面积之和大于超声30 min，超声40 min的峰面积之和，同时考虑到提取时间较短，故选用超声时间为20 min。从12批茯苓饮片的分析结果来看，样本整体相似度较高，其中样本11的相似度偏低，其主要原因可能是样品11来自于新疆茯苓药材，地理位置、气候、土壤等因素的差别造成茯苓药材成分的差异，从而导致炮制加工的茯苓饮片存在差异，但是差异不是很显着（相关系数法大于0.840 3，夹角余弦法大于0.906 8）。
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