茯苓饮片HPLC指纹图谱及技术参数分析-医学硕士论文

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　　1 仪器与试药
　　1.1 仪器
　　LC-20AT高效液相色谱仪（日本岛津）；大连伊利特Hypersil-ODS （4.6 mm×250 mm）高效液相色谱柱；工作站：CBM-102；检测器：SPD-20A；TP 600超声波提取器（北京天鹏电子新技术有限公司）；BS210S型电子天平（北京塞多利斯公司）。
　　1.2 试剂
　　乙腈为色谱纯，磷酸为分析纯，水为双蒸水（经0.45μm微孔滤膜滤过），其他试剂均为分析纯。
　　1.3 药材
　　茯苓药材分别采集于宛西制药有限公司GAP基地、河南商城等地共12批（样品来源及编号见表1）。按照本课题组研究的规范化炮制工艺进行浸泡、润蒸并切制成不同规格。
　　2.4 茯苓饮片HPLC指纹图谱及技术参数
　　2.4.1 指纹图谱选择及特征峰的标定［4］
　　测定12批茯苓饮片60min内指纹图谱，获得11个共有峰，由指纹图谱可以看出10号峰峰面积积分百分比较大，分离度及峰形较好，因此选择10号峰作为参照峰，标号为S，其他特征峰依次标号为1，2，3，……，S，11。根据结果采用“ChromafingerV0.9 beta ”软件建立了茯苓饮片的色谱指纹图谱共有模式和茯苓饮片色谱叠加图结果见图1～2。
　　2.4.2　茯苓饮片指纹图谱特征峰相对保留时间和相对峰面积
　　采用12批茯苓饮片的指纹图谱，选用10号峰作为参照峰，选取12批样品的共有峰共11个，计算相对保留时间和相对峰面积。
　　2.4.3 指纹图谱相似度的计算采用“ Chromafinger V0.9 beta ”软件对12批茯苓饮片指纹图谱进行处理得到茯苓饮片相似度分析结果。
　　3结果
　　实验中考察了超声提取的时间和溶剂，用醋酸乙酯、丙酮作为溶剂所得提取液的指纹图谱上特征峰数目较少，且峰形较差；用正丁醇、95%乙醇和甲醇作为溶剂所得提取液的指纹图谱无明显的差异，特征峰数目较多，且峰形较好，但考虑到甲醇有较大的毒性，正丁醇由于粘度大，过滤困难，故选用95%乙醇作为提取溶剂。本研究根据12批茯苓饮片检测结果，选择11个共有峰标定茯苓饮片的指纹图谱，具有良好的系统性、特征性和重现性。经过相似度评价，所选择的12批茯苓饮片的指纹图谱相似度较高，具有良好的相关性。
　　核心医学期刊 http://www.qikanba.com/

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